生血管肝素结合肽两亲物制造技术

肽两亲物及相关组合物，包括硫酸化多糖，例如，但不限于硫酸化糖胺聚糖，以及与生血管生长因子的包囊作用和／或受控释放相关的使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利说明生血管肝素结合肽两亲物 专利
0001本申请要求2005年3月4日提交的第60/658,503号临时申请的优先权，在此引入其全部作为参考。0002依照美国国家健康协会(National Institute of Health)的授予号R01 EB003806-01和与美国陆军医疗研究与材料司令部(U.S.Army Medical Research and Material Command，USAMRMC)-远程医疗和高级技术研究中心(Telemedicine and Advanced TechnologyResearch Center，TATRC)的合同，授予号为W81XWH-05-1-0381(OSR授予号为32199)——授予西北大学，美国政府对本专利技术拥有某些权利。
技术介绍
0003血管生成，即从现有血管形成新的血管的过程，对于正常的伤口愈合是必需的，而且这完全是由身体调节的。不充分的血管生成能够引起各种各样的疾病状况，包括慢性皮肤创伤和心肌梗塞。血管生成将会对组织工程变得越来越重要，因为植入的支架，不管它们是传递自身的细胞还是募集渗透过来的宿主细胞，都需要血液的供应以维持活性组织的形成。为了达到这个目标，生物相容性基质的开发已成为关注的对象，这种生物相容性基质能有效地地促进血管生成，它具有指定的化学和结构多功能性，这样，经过适当的修饰，它能被用作血管化支架以促进组织愈合和组织生长。此外，这种基质也将有助于促进心肌梗塞后和慢性皮肤伤口中所看到的缺血性伤口愈合。这种体系的研发和实施已经成为本领域眼下的热点。然而，以前所采取的各种方法表明需要进一步的改善，而且为进一步的努力和革新提供了动力。 附图简述 0004附图说明图1.根据本专利技术的某些实施方式，HBPA-1(上图)和HBPA-2(下图)两亲性肽化合物的结构。0005图2A-C.肝素触发的HBPA-2(2A，刻度尺50nm)和HBPA-1(2B，刻度尺40nm)纳米纤维束的透射电子镜显微照片。2B也显示了标记至(连接至，tagged to)金纳米颗粒(黑点)的肝素，金纳米颗粒修饰了纳米纤维。2C显示了荧光素肝素染色的HBPA-1纤维束(刻度尺100μm)的共焦荧光显微照片。0006图3A-G.HBPA-1和2与肝素的相互作用。3A和3B显示的是肝素和碱触发的HBPA-1凝胶(3A)和HBPA-2凝胶(3B)的振荡流变测定值。这两张图里的黑色曲线描述的是肝素触发的凝胶，灰色曲线描述的是碱触发的凝胶，其中方块代表的是弹性模量，三角代表的是粘性模量。所有凝胶的弹性模量统计学上比粘性模量高，另外，两种情况下肝素触发的凝胶统计学上比碱触发的凝胶的要高(p＜0.05，这些值代表的是平均和标准偏差)。3C和3D显示的是HBP-1溶液(3C)和HBPA-2溶液(3D)的圆二色光谱图，这表明在两种情况下加入肝素后，占主导地位的α螺旋构象(灰色)变成了占主导地位的β折叠构象(黑色)。3E和3F显示了热量变化的积分值(integrated value)(黑点)以及拟合线(fit line)，该拟合线是当将增量的肝素加入到HBPA-1(3E)和HBPA-2(3F)溶液时，相对于肝素与HBPA的摩尔比绘制的，以便得到各自的Ka。表3G比较了HBPA-1和HBPA-2与肝素相互作用的热动力学指标。虽然两种情况下的ΔG是类似的，但是ΔH在SPA与肝素的相互作用中占主导地位，表明是一个熵驱动的反应，而-TΔS在HBPA与肝素的相互作用中占主导地位，表明是一个焓驱动的反应。0007图4.若丹明-FGF-2从HBPA-1-肝素凝胶网络中慢速释放曲线(灰白色曲线)，相对于从HBPA-1-Na2HPO4凝胶的更快的释放(黑色曲线)(尺度条是标准偏差)。0008图5A-H.体外血管生成实验。是在存在(A)但不存在(B)生长因子下，在肝素-有核HBPA-1凝胶中，用Vybrant CFDA染色的bPAEC的荧光共聚焦显微照片。黑色的通道是在三维图中延伸的连续内腔(尺度格的每个边长，在(A)中为75μm和在(B)中为37μm)。与存在(C)但不存在(D)生长因子时的HBPA-2-肝素凝胶相对应的样品(刻度尺＝80μm)显示出偶然的类似裂缝的内腔(箭头所指)。胶原(质)对照凝胶，生长因子被混入到胶原凝胶(E)里，表明生长着的细胞没有特定的方向；相反，含有补加肝素(F)、含有补加生长因子(G)以及含有补加肝素和生长因子(H)的胶原凝胶，都显示出带有偶然的类似裂缝的内腔(箭头所指)的接合网络(对于C-F，刻尺度＝40μm)。0009图6.体内缺血性伤口愈合实验。在一只缺血性兔子耳朵上产生一个6mm的伤口12天之后测得的上皮裂口。与所有的其它对照相比，存在和不存在生长因子的HBPA-1-肝素凝胶都诱发了统计学上显著的伤口愈合(p＜0.05，图表示的是平均值而且为95％的置信度)。 专利技术概述 0010鉴于前述，本专利技术的目的是提供一系列的两亲性的肽化合物，相关的肝素结合的组合物和/或其在一种或更多种血管生成方法里的应用，因此克服了现有技术的各种缺陷和短处，包括上面概述的那些。本领域的普通技术人员应当理解的是本专利技术的一个或多个方面能满足某些目的，而一个或多个其它方面能满足其他的某些目的。在所有的方面里，对于本专利技术的每一个方面，每个目的可以不均等的应用。同样，关于本专利技术的任何一个方面，能以另外的方式看待下面的目的。0011本专利技术的一个目的是提供了一系列的结构多样性的两亲性肽化合物(amphiphilic peptide compound)，这些化合物与一个或多个硫酸化的糖胺聚糖组分相互作用，与现有技术相比较，这种相互作用在这些组分与血管生长因子的亲和力方面，显示出优势。0012本专利技术的另外一个目的是，结合一个或多个上述的组合物，提供了一个或多个生血管生长因子(angiogenic growth factors)的活化、结合、传递和/或释放。0013本专利技术的另外一个目的是提供诱导血管生成的一种或多种方法，以及与所述方法一起使用的组合物，以促进组织愈合和/或生长。0014通过本概述以及随后的某些实施方案的描述，本专利技术的其它目的、特征、利益和优点将是显而易见的，而且对于本领域的普通技术人员来说也是容易理解的，他们具备各种肽两亲物、硫酸化多糖结合的组合物和/或其在促进血管生成方面的应用的知识。结合伴随的实施例、数据、图和由此得到的所有合理的推论，单独或考虑并入本文的参考文献，通过上面的描述，这样的目的、特征、利益和优点将是显而易见的。0015部分地，本专利技术涉及由疏水组分和肽组分组成的两亲性肽化合物。疏水组分能在肽组分的C-端或N-端处或其附近或周围被偶联到肽组分上。肽组分能包括至少一个残基，这个残基能与硫酸化多糖非共价相互作用或结合。不受限制地，这些残基能与硫酸化糖胺聚糖组分相互作用或与硫酸化糖胺聚糖组分具有非共价结合亲和力，所述硫酸化糖胺聚糖包括但并不限于硫酸肝素、硫酸乙酰肝素及其组合。正如本文其他地方所阐述的和在并入本文的一个或多个参考文献中更充分描述的那样，此化合物的疏水组分能包括范围从大约C4或大约C6到大约C22或更高碳原子数的部分。0016不管怎样，可相互作用的残基能包本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种两亲性肽化合物，其包括疏水性组分和肽组分，所述的疏水性组分被偶联到所述肽组分的Ｃ－端和Ｎ－端中的其中一个上，所述的肽组分包括能与硫酸化多糖产生非共价相互作用的残基。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：SI施图普，JF胡瓦特，K拉亚加姆，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]