延缓人源骨髓间充质干细胞体外培养导致衰老的方法技术

技术编号:15255643 阅读:175 留言:0更新日期:2017-05-02 23:24
本发明专利技术公开了一种延缓人源骨髓间充质干细胞体外培养导致衰老的方法;通过在人源MSC细胞中提高FOXP1表达水平,来提高MSC的增殖能力,保护MSC的分化能力,延缓MSC的衰老。具体是以慢病毒为载体,转染人源MSC,抗生素筛选阳性MSC克隆并传代扩大培养。与现有技术相比,本发明专利技术能有效提升年轻人源MSC的体外扩增能力;能逆转老龄70‑80岁以上人源MSC的衰老症状;能促进MSC的成骨分化潜能;能抑制MSC的成脂分化潜能。

Method for delaying senescence of human bone marrow mesenchymal stem cells in vitro

The invention discloses a delay of human bone marrow mesenchymal stem cells cultured in vitro in ageing method; by increasing the expression level of FOXP1 in human MSC cells, increased the proliferation of MSC, MSC protection ability of differentiation, delaying senescence of MSC. In particular, the lentiviral vector was used to transfect human MSC, and the positive clones were screened by MSC. Compared with the prior art, the invention can effectively improve the amplification ability of young people MSC in vitro can reverse aging; 70 over the age of 80 MSC of human aging symptoms; can promote MSC differentiation into bone; can inhibit MSC differentiation into fat.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞生物学领域,具体涉及一种延缓人源骨髓间充质干细胞(MSC)体外培养导致衰老的方法。
技术介绍
间充质干细胞(MSC)是一种重要的成体干细胞(Caplan,1991)。MSC在身体器官的多个部位,如脐带血都能检测到(Goodwinetal.,2001),其中骨髓是MSC重要的储藏部位(FehrerandLepperdinger,2005;Mendez-Ferretetal.,2010)。骨髓间充质干细胞具有高度的自我更新能力,同时具有向成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞分化的能力(Biancoetal.,2008a;Biancoetal.,2008b;Nombela-Arrietaetal.,2011;Pittengeretal.,1999),参与了骨骼系统的形成和稳态保持。大部分研究将成骨、成脂肪和成软骨的三系分化能力作为定义间充质干细胞的“金标准”(Biancoetal.,2008b)。MSC细胞表面标记包括CD73,CD90和CD105,但不表达CD11b,CD14,CD34,CD45,和HLA-DR。MSC可以用来移植治疗各种疾病(AnkrumandKarp,20本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种延缓人源骨髓间充质干细胞体外培养导致衰老的方法,其特征在于,在人源MSC细胞中提高FOXP1表达水平。

【技术特征摘要】
1.一种延缓人源骨髓间充质干细胞体外培养导致衰老的方法,其特征在于,在人源MSC细胞中提高FOXP1表达水平。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,以病毒为载体,转染人源MSC,抗生素筛选阳性MSC克隆并传代扩大培养。3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述病毒为LV、AAV或pMSCV病毒载体。4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:S1、分离和培养人源骨髓MSC,按1∶3~1∶6比例稀释传代培养;S2、在人源骨髓MSC传代培养液中加入含FOXP1基因的慢病毒原液,感染;S3、吸去含病毒的培养基,换成含青霉素、链霉素的MSC培养基,培养,使病毒携带的抗性基因表达;S4、加入含Puromycin的MSC培养基进行筛选培养;S5、将感染并在筛选过程中存活的细胞继续消化传代,待扩增至获得稳转细胞株即可。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤S2中,在人源骨髓MSC传代培养液中按MOI为5~20...

【专利技术属性】
技术研发人员:郭熙志李汉骏
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:上海;31

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1