本发明专利技术系统的评价了噻酰菌胺（ＴＤＬ）及其杂环酰胺和芳环酰胺及其中间体４－甲基－１，２，３－噻二唑－５－甲酸、４－甲基－１，２，３－噻二唑－５－甲酰对甲氧基苯胺、４－甲基－１，２，３－噻二唑－５－甲酰－２’，６’－二氯苯胺、４－甲基－１，２，３－噻二唑－５－甲酰－５’－甲基－１’，３’－噻唑－２’－胺、４－甲基－１，２，３－噻二唑－５－甲酰－３’－氯－４’－甲基苯胺、４－甲基－１，２，３－噻二唑－５－甲酰－１’，３’－噻唑－２’－胺和４－（２’，４’－二氯苯基－５－正丙基－１，３－噻唑－２－胺通过组织培养和活体植株以及室内生物反应器诱导贯叶连翘和元宝草产生金丝桃素类物质金丝桃素（Ｈｙｐｅｒｉｓｉｎ，简称ＨＰ）、伪（假）金丝桃素（Ｐｓｅｕｄ ｏｈｙｐｅｒｉｃｉｎ，简称ＰＨＰ）、原假金丝桃素（Ｐｒｏｔｏｐｓｅｕｄ ｏｈｙｐｅｒｉｃｉｎ，简称ＰＰＨＰ）、贯叶金丝桃素（Ｈｙｐｅｒｆｏｒｉｎ，简称ＨＦ）的活性。研究发现，ＳＺＧ系列的化合物和ＬＤ系列化合物其及中间体具有诱导贯叶连翘和元宝草组培苗代谢产物ＰＨＰ，ＨＰ或ＨＦ合成的能力并能诱导生物量的增加；在水培条件下验证了ＳＺＧ－７的诱导活性，并且诱导时间的规律得到基本确定；在固体培养条件下，添加２５微摩尔／升与５０微摩尔／升的ＳＺＧ－７相比，对代谢产物的合成影响的差异不显著。活体植株以及生物反应器诱导培养也能产生同样的诱导效果。本发明专利技术公开了上述化合物的诱导活性及其测定方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术的技术方案涉及含1，2-二唑的杂环化合物及其诱导植物次生代谢的作用，具体涉及噻二唑衍生物以及这些衍生物诱导金丝桃属植物贯叶连翘和元宝草产生金丝桃素类物质如金丝桃素(Hyperisin，简称HP)、伪(假)金丝桃素(Pseudohypericin，简称PHP)、原假金丝桃素(Protopseudohypericin，简称PPHP)、贯叶金丝桃素(Hyperforin，简称HF)的活性。
技术介绍
噻二唑类衍生物具有广泛的生物活性，是重要的医药和农药中间体，噻二唑有噻二唑、噻二唑、噻二唑、噻二唑4种异构体，目前应用最多的是噻二唑的衍生物，由于噻二唑是几个异构体中唯一能够通过热解和光解很容易产生N2的异构体，因此，该类化合物正在成为研究的热点。文献报道的部分高活性噻二唑衍生物的化学结构见表1，其中比较值得关注的是该类化合物中的BTH和TDL以及SV-03均具有很好的诱导植物产生对病原菌的抗性。BTH英文通用名acibenzolar-S-methyl；IUPAC名S-甲基苯并噻二唑-7-硫代羧酸酯；在植物体内迅速降解为无活性的苯并噻二唑-7-甲酸，但BTH能激活植物的免疫系统产生对真菌、细菌、线虫和病毒的保护作用(Sonnemannet al.，Does induced resistance in plant affect the belowground community？Applied Soil Ecology，2002，21179-185)；噻酰菌胺即3’-氯-4，4’-二甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰胺(TDL)具有很好杀菌活性(Tsubata et al.Thiadiazole carboxamide derivative，plant disease controlling agent，and methodof using the same.WO 9923084，1999-05-14)，它和中间体-噻二唑-5-甲酸(SV-03)都能诱导烟草抗性基因的表达并产生对烟草抗烟草花叶病毒(TMV)的抗性(Yasuda et al.Thiadiazolecarboxylic acid moiety of tiadinil，SV-03，induces systemic acquired resistance in tobacco withoutsalicylic acid accumulation.J.Pestic.Sci.，2006，31(3)329-334)。有关噻二唑的合成、反应、性质和应用见Bakulev和Dehaen教授出版的“The Chemistry of 1，2，3-thiadiazole”一书。植物诱导抗病激活剂的创制研究在国内报道不多，本专利技术的专利技术人在前期建立植物抗病激活剂诱导活性筛选体系的基础上对BTH和TDL两个先导化合物进行了较系统结构改造，合成了100多个新的衍生物，发现部分化合物具有很好的诱导烟草抗TMV的活性，部分新化合物有很好的杀菌活性(范志金等，苯并噻二唑衍生物及其合成方法和诱导抗病活性的筛选，中国国家专利技术专利，公开号CN1680342A，2005-10-12；范志金等，新型噻二唑表1 高活性1，2，3-噻二唑类化合物的化学结构 衍生物及其合成方法和用途，中国国家专利技术专利，公开号CN1810808A，2006-8-2)。由于茉莉酸甲酯(表2)和上述3个化合物都具有诱导植物对农业病害产生抗病性的活性，文献也报道了贯叶连翘提取物的主要成分就是金丝桃素类物质(Tatsis，et al.，Identification of the majorconstituents of hypericum perforatum by LC/SPE/NMR and/or LC/MS.Phytochemistry，2007，68383-393)，同时，茉莉酸甲酯具有诱导贯叶连翘产生金丝桃素类物质(结构见表2)的活性(Sirvent，et al.，Induction of hypericins and hyperforin in Hypericum perforatum L.in response tobiotic and chemical elicitors.Physiol.Mol.Plant Pathol.，2002，60311-320；Walker，et al.，Jasmonic acid-induced hypericin production in cell suspension cultures of Hypericum perforatum L.(St.John′s wort).Phytochemistry，2002，60(3)289-293)，考虑到金丝桃素类物质具有很好的抗忧郁活性、抗微生物、抗肿瘤和抗病毒及防治禽流感的作用(娄海容等，在防治禽流感中引人注目的中草药-金丝桃属和金丝桃素，现代医院，2006，6(4)3-5.)，我们预期自己合成的噻二唑衍生物及其中间体可能与茉莉酸甲酯一样具有共同的诱导贯叶连翘的活性，因此，专利技术人在国家自然科学基金(批准号20672062和30270883)和国家重点基础研究发展计划“973”项目(批准号2003CB114402)及天津市自然科学基金(批准号07JCYBJC01200)和元素有机化学国家重点实验室开放基金(0602和0702)的资助下对已合成的具有诱导烟草抗TMV活性的化合物进行了诱导贯叶连翘和元宝草产生金丝桃素类物质活性的测定，结果在国际上首次发现，噻二唑的衍生物具有诱导金丝桃属植物产生金丝桃素类物质的特性。表2 茉莉酸甲酯及金丝桃素类化合物的化学结构 本专利技术的目的本专利技术的目的是提供新型诱导贯叶连翘和元宝草产生金丝桃素类物质的1，2，3-噻二唑衍生物以及这些化合物用于诱导贯叶连翘和元宝草产生金丝桃素类物质的方法。本专利技术的内容本专利技术所要解决的技术问题是提供新型1，2，3-噻二唑的衍生物，利用组织培养的方法测定这些化合物诱导贯叶连翘和元宝草产生金丝桃素类物质的活性，同时以茉莉酸甲酯为对照。本专利技术解决该技术问题所采用的技术方案是分别利用固体培养基和液体培养基进行新型1，2，3-噻二唑衍生物分别诱导，分别进行贯叶连翘和元宝草产生金丝桃素类物质的活性测定，并系统评价各化合物的诱导活性，本专利技术具体涉及的化合物的化学结构式(I)描述的具体化合物的化学结构式见表3 表3 本专利技术涉及的具有诱导植物产生金丝桃素类物质的化学结构特征 I.MS固体培养基的制备和继代诱导培养MS固体培养基含有6-卞基腺嘌呤(BA)0.1毫克/升，4-吲哚-3-丁酸(IBA)0.05毫克/升，琼脂0.6％，蔗糖3％，121度(0.105MPa)高温灭菌15分钟，待培养基温度降至约50度，将化合物以50微摩尔/升终浓度加入培养基中，充分摇匀后静置待用，以培养基中添加1微升/毫升的DMF为对照；取继代培养(MS+BA0.1毫克/升+IBA0.05毫克/升)约一年的贯叶连翘或元宝草组培苗，剪切成3～4个节点，接入含有不同化合物的培养基中，光照(16小时/8小时)培养，光强3700Lux，培养温度25±2本文档来自技高网...
【技术保护点】
新型１，２，３－噻二唑的衍生物，其特征在于它是结构式（Ⅰ）描述的化合物和该化合物是４－（２’，４’－二氯苯基－５－正丙基－１，３－噻唑－２－胺：＊＊＊（Ⅰ）其中：Ｒ分别是对甲氧基苯胺基、２，６－二氯苯胺基、羟基、５－甲基 －１，３－噻唑－２－胺基、３－氯－４－甲基苯胺基、１，３－噻唑－２－胺基以及整个是４－（２’，４’－二氯苯基－５－正丙基－１，３－噻唑－２－胺。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：范志金，刘晓娜，孙君社，石祖贵，吴琼，刘秀峰，巴库勒夫瓦西里耶阿勒克什维奇，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]
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