盐酸克伦特罗检测盒的制作方法技术

本发明专利技术涉及检测试剂条，公开了一种盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，包括制备金标记的克伦特罗抗体溶液、胶体金结合垫和包被膜，对胶体金结合垫和包被膜进行组装、切条、分装，将盐酸克伦特罗检测卡组装到密封的检测盒。卡盖和底盒密封连接，观测孔用于密封的透明窗，加样孔下侧设有透明薄膜，打开塑料袋后，即使不立即使用，盐酸克伦特罗检测卡也不会被污染，进而影响检测效果；解决了现有技术中塑料袋中取出检测盒后不立即使用就会影响效果的技术问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测试剂条，尤其涉及盐酸克伦特罗检测盒的制作方法。
技术介绍
盐酸克伦特罗(Clenbuterol，CL)，又名瘦肉精，药品名为克喘素、氨哮素等，为白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦，易溶于水、甲醇、乙醇，微溶于丙酮、氯仿，不溶于乙醚和苯，化学性质稳定；它是一种人工合成的β-肾上腺素受体激动剂，具有扩张支气管的作用，常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。当其应用剂量达到治疗量的5～10倍时，又具有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉积减少，因此将其俗称为“瘦肉精”，在养猪业中一些非法使用者将其作为一种生长促进剂添加到饲料中，用以改善胴体的品质，但同时也造成了猪肉中盐酸克伦特罗的残留。当人们食用含有盐酸克伦特罗残留的肉品后，常常造成心动过速，低血钾，低磷酸盐血症，肌肉震颤，头晕，口干，失眠甚至于瘫痪等中毒症状，对心脏病患者更有生命危险。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的缺点，公开了盐酸克伦特罗检测盒的制作方法。为了解决上述技术问题，本专利技术通过下述技术方案得以解决。盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，包括以下步骤，A.取9mg抗原，用10mMpH值为8.2的PBS缓冲液将抗原稀释至1.5mg/ml；B.取6mg羊抗鼠igG抗体，用10mMpH值为8.2的PBS缓冲液将羊抗鼠igG抗体稀释至1mg/ml；C.打开点膜机开关，设定参数如下：将PBS缓冲液稀释后的抗原作为检测线，将PBS缓冲液稀释后的羊抗鼠igG抗体作为质控线，检测线与质控线间的距离为0.5cm，质控线和检测线距膜边缘均为1cm，喷点量为1微升/cm；D.取一卷硝酸纤维膜置于喷点仪的被动轮上，将硝酸纤维膜及垫织穿过喷点仪上的固定装置，硝酸纤维膜的另一端固定到主动轮上，开始喷检测线和质控线；E.将喷好的硝酸纤维膜取下，放入恒温干燥箱，干燥10h，即制得包被膜；将包被膜置于密封塑料袋内，干燥保存待用；F.取一张30cm×25cm玻璃纤维，放置在洁净板上；取25ml金标记的克伦特罗抗体溶液用喷金机在玻璃纤维上点样，设定如下参数：点样间距10mm，点样条数7条，喷量2.0ul/cm；对喷好的玻璃纤维进行干燥、切割，得到胶体金结合垫；G.对胶体金结合垫和包被膜进行组装、切条、分装，制得盐酸克伦特罗检测卡。作为优选，步骤D中，硝酸纤维膜宽为2.5cm，长为50m。作为优选，步骤F中，喷好的玻璃纤维放到恒温干燥箱内干燥。作为优选，步骤H，将制备好的盐酸克伦特罗检测卡装入检测盒；检测盒包括卡盖和底盒，卡盖和底盒密封连接，盐酸克伦特罗检测卡设置在卡盖和底盒之间；卡盖的一端设有用来滴加测试样品的漏斗状的加样孔，加样孔下侧设有透明薄膜，加样孔与盐酸克伦特罗检测卡检测线的位置相对应；卡盖的中间部位设有用来观察测试结果的条形的观测孔，观测孔设有透明窗；卡盖还设有折弯杆，折弯杆设有横向杆，横向杆一端设有台阶，台阶设在透明薄膜下侧，台阶上设有三个切割刀刃。卡盖和底盒密封连接，观测孔用于密封的透明窗，加样孔下侧设有透明薄膜，打开塑料袋后，即使不立即使用，盐酸克伦特罗检测卡也不会被污染，进而影响检测效果；解决了现有技术中塑料袋中取出检测盒后不立即使用就会影响效果的技术问题。折弯杆与具有弹性的卡盖连接，使用时，积压卡盖，卡盖发生形变带动折弯杆移动，进而带动台阶上的切割刀刃上下移动，移动过程中刀刃接触到透明薄膜，即可在透明薄膜上划出划痕，接着打开透明薄膜，进行加样。作为优选，卡盖的底面上设有至少一个用来固定卡盖和底盒的定位销，底盒上设有与定位销配合的定位槽；底盒上设有用来固定盐酸克伦特罗检测卡水平位置的卡位凸起。作为优选，步骤F中，金标记的克伦特罗抗体溶液的制作方法包括以下步骤，a.向1000ml胶体金溶液中，逐滴加入1ml0.5M碳酸钾溶液；b.取9ml浓度为1mg/ml克伦特罗单克隆抗体，迅速加入到胶体金溶液内，混匀，在室温中静置15分钟，得到胶体金标记的克伦特罗抗体胶体金溶液；c.向胶体金标记的克伦特罗抗体胶体金溶液中迅速加入20ml10％牛血清白蛋白溶液，同时搅拌，于室温中放置15分钟，离心，吸出上清液，加入40ml胶体金缓冲液将沉淀悬浮；d.步骤c得到的悬浮液离心洗涤，吸出上清液，将沉淀溶于200ml胶体金缓冲液内，即为金标记的克伦特罗抗体溶液，4℃避光保存备用。作为优选，步骤c中，离心条件为10000rpm离心30分钟。作为优选，步骤d中，离心条件为10000rpm离心30分钟。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：(1)成本低：不需特殊仪器及其他试剂，使现场检测一步到位，见效快；在达到同样灵敏度、特异性和稳定性的情况下，成本大大降低；(2)准确性高、稳定性强：采用本专利技术所的技术方案，显示条带越少，浓度越高，实现了多水平半定量式检测；(3)显色更快、更均一、更稳定；(4)使用方便，操作简单：减少了许多繁琐的程序，方便、快捷、直观，易操作，全过程只需10分钟，能够满足食品安全、饲料、屠宰企业及政府检测机构的检测需求，具有较高的社会价值和经济价值；(5)真正达到复杂原理与简易操作的有机统一，同时该试剂盒具有保存方便，有效期长的特点。卡盖和底盒密封连接，观测孔用于密封的透明窗，加样孔下侧设有透明薄膜，打开塑料袋后，即使不立即使用，盐酸克伦特罗检测卡也不会被污染，进而影响检测效果；解决了现有技术中塑料袋中取出检测盒后不立即使用就会影响效果的技术问题。折弯杆与具有弹性的卡盖连接，使用时，积压卡盖，卡盖发生形变带动折弯杆移动，进而带动台阶上的切割刀刃上下移动，移动过程中刀刃接触到透明薄膜，即可在透明薄膜上划出划痕，接着打开透明薄膜，进行加样。说明书附图图1是检测盒的结构示意图。图2是卡盖的结构示意图。图3是图2中A的局部放大图。图4是图2中卡盖的仰视图。图5是底盒的结构示意图。具体实施方式实施例1盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，包括以下步骤，A.取9mg抗原，用10mMpH值为8.2的PBS缓冲液将抗原稀释至1.5mg/ml；B.取6mg羊抗鼠igG抗体，用10mMpH值为8.2的PBS缓冲液将羊抗鼠igG抗体稀释至1mg/ml；C.打开点膜机开关，设定参数如下：将PBS缓冲液稀释后的抗原作为检测线，将PBS缓冲液稀释后的羊抗鼠igG抗体作为质控线，检测线与质控线间的距离为0.5cm，质控线和检测线距膜边缘均为1cm，喷点量为1微升/cm；D.取一卷硝酸纤维膜置于喷点仪的被动轮上，将硝酸纤维膜及垫织穿过喷点仪上的固定装置，硝酸纤维膜的另一端固定到主动轮上，开始喷检测线和质控线；E.将喷好的硝酸纤维膜取下，放入恒温干燥箱，干燥10h，即制得包被膜；将包被膜置于密封塑料袋内，干燥保存待用；F.取一张30cm×25cm玻璃纤维，放置在洁净板上；取25ml金标记的克伦特罗抗体溶液用喷金机在玻璃纤维上点样，设定如下参数：点样间距10mm，点样条数7条，喷量2.0ul/cm；对喷好的玻璃纤维进行干燥、切割，得到胶体金结合垫；G.对胶体金结合垫和包被膜进行组装、切条、分装，制得盐酸克伦特罗检测卡。实施例2盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，如图1-5所示，包括以下步骤，A.取9mg抗原，用10mMpH值为8.2的PBS缓冲液将抗原稀释至1.5mg/ml；B.取6mg羊本文档来自技高网...

【技术保护点】
盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，其特征在于：包括以下步骤，A.取9mg抗原，用10mM pH值为8.2的PBS缓冲液将抗原稀释至1.5mg/ml；B.取6mg羊抗鼠igG抗体，用10mM pH值为8.2的PBS缓冲液将羊抗鼠igG抗体稀释至1mg/ml；C.打开点膜机开关，设定参数如下：将PBS缓冲液稀释后的抗原作为检测线，将PBS缓冲液稀释后的羊抗鼠igG抗体作为质控线，检测线与质控线间的距离为0.5cm，质控线和检测线距膜边缘均为1cm，喷点量为1微升/cm；D.取一卷硝酸纤维膜置于喷点仪的被动轮上，将硝酸纤维膜及垫织穿过喷点仪上的固定装置，硝酸纤维膜的另一端固定到主动轮上，开始喷检测线和质控线；E.将喷好的硝酸纤维膜取下，放入恒温干燥箱，干燥10h，即制得包被膜；将包被膜置于密封塑料袋内，干燥保存待用；F.取一张30cm×25cm玻璃纤维，放置在洁净板上；取25ml金标记的克伦特罗抗体溶液用喷金机在玻璃纤维上点样，设定如下参数：点样间距10mm，点样条数7条，喷量2.0ul/cm；对喷好的玻璃纤维进行干燥、切割，得到胶体金结合垫；G.对胶体金结合垫和包被膜进行组装、切条、分装，制得盐酸克伦特罗检测卡。...

【技术特征摘要】
1.盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，其特征在于：包括以下步骤，A.取9mg抗原，用10mMpH值为8.2的PBS缓冲液将抗原稀释至1.5mg/ml；B.取6mg羊抗鼠igG抗体，用10mMpH值为8.2的PBS缓冲液将羊抗鼠igG抗体稀释至1mg/ml；C.打开点膜机开关，设定参数如下：将PBS缓冲液稀释后的抗原作为检测线，将PBS缓冲液稀释后的羊抗鼠igG抗体作为质控线，检测线与质控线间的距离为0.5cm，质控线和检测线距膜边缘均为1cm，喷点量为1微升/cm；D.取一卷硝酸纤维膜置于喷点仪的被动轮上，将硝酸纤维膜及垫织穿过喷点仪上的固定装置，硝酸纤维膜的另一端固定到主动轮上，开始喷检测线和质控线；E.将喷好的硝酸纤维膜取下，放入恒温干燥箱，干燥10h，即制得包被膜；将包被膜置于密封塑料袋内，干燥保存待用；F.取一张30cm×25cm玻璃纤维，放置在洁净板上；取25ml金标记的克伦特罗抗体溶液用喷金机在玻璃纤维上点样，设定如下参数：点样间距10mm，点样条数7条，喷量2.0ul/cm；对喷好的玻璃纤维进行干燥、切割，得到胶体金结合垫；G.对胶体金结合垫和包被膜进行组装、切条、分装，制得盐酸克伦特罗检测卡。2.根据权利要求1所述的盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，其特征在于：步骤D中，硝酸纤维膜宽为2.5cm，长为50m。3.根据权利要求1所述的盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，其特征在于：步骤F中，喷好的玻璃纤维放到恒温干燥箱内干燥。4.根据权利要求1所述的盐酸克伦特罗检测盒的制作方法，其特征在于：步骤H，将制备好的盐酸克伦特罗检测卡装入检测盒(1)；检测盒(1)包括卡盖(11)和底盒(12)，卡盖(11)和底盒(12)密封连接，盐酸克伦特罗检测卡设置在卡盖(11)和底盒(12)之间；卡盖(11)的一端设有用来滴加测试样品...

【专利技术属性】
技术研发人员：周斌，
申请(专利权)人：杭州泰熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33