具有抗微生物活性的细菌菌株以及包含所述菌株的生物控制组合物制造技术

在此提供了用于治疗和预防由微生物病原体造成的感染的方法、用于治疗或预防由一种微生物病原体造成的、或与该微生物病原体相关联的病害的方法、以及用于抑制微生物生长的方法，这些方法包括给予或施用组合物，这些组合物包含帕氏乳酸杆菌、布赫纳氏乳酸杆菌、瑞氏乳酸杆菌、玉米乳酸杆菌、干酪乳酸杆菌、类干酪乳酸杆菌、NMI检索号V12/022850指定的细菌菌株以及NMI检索号V12/022849指定的细菌菌株中的一种或多种菌株。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本披露整体涉及具有抗微生物活性的细菌菌株及其作为生物控制剂的用途。还提供了包含所述细菌菌株的生物控制组合物，具体地用于抑制微生物植物病原体。
技术介绍
所有植物易受微生物如细菌和真菌的侵袭。就果实、蔬菜以及农业和园艺作物而言，微生物病原体以及由它们造成的病害能够导致显著的作物损害、产量损失以及收获前后的经济损失。由微生物病原体造成的病害还能够导致农产品的存放期的减少，并且导致消费者的消费成本更高。许多真菌是已知的引起许多危害或破坏世界范围作物的病害的植物病原体。大多数植物病原真菌是子囊菌(ascomycetes)(包括镰孢属物种(Fusariumspp.)、根串珠霉属物种(Thielaviopsisspp.)、葡萄孢属物种(Botrytisspp.)、轮枝孢属物种(Verticilliumspp.)以及稻瘟病菌属物种(Magnaporthespp.))和担子菌(basidiomycetes)(包括丝核菌属物种(Rhizoctoniaspp.)、柄锈菌属物种(Pucciniaspp.)以及蜜环菌属物种(Armillariaspp.))。特别关注的是镰孢属的真菌，广泛分布在土壤中的丝状真菌。例如，数种镰孢菌物种如尖孢镰孢菌使植物包括番茄、甜瓜、姜、香蕉以及豆类感染萎蔫病(镰孢菌萎蔫病)，从而导致如维管萎蔫病、黑斑症、叶片过早掉落以及生长迟缓的症状。若干镰孢属物种造成马铃薯的镰孢菌干腐病(Fusariumdryrot)。镰孢菌干腐r>病在马铃薯中无论是在大田中还是在贮藏中都是一个经济上的重要问题，并且是收获后马铃薯损失的主要原因之一。在香蕉中，镰孢菌是具有高度破坏性的巴拿马病的致病原。种植园一旦被感染，就不能治愈。尖孢镰孢菌是一种不完全型无性真菌(imperfectasexualfungus)，其借助以下三种类型的孢子传播：小分生孢子、大分生孢子、以及厚垣孢子类。因为厚垣孢子类能够保持休眠并且感染土壤多年，所以一旦尖孢镰孢菌定植在土壤中，就知道极难根除。由于杀真菌剂的无效性，目前仅可使用的应对是土壤消毒，这不是成本有效的。植物病原性细菌也对植物造成许多损害性的和经济上显著的病害。例子包括以下各项的物种：欧文氏菌属(Erwinia)、果胶杆菌属(Pectobacterium)、泛菌属(Pantoea)、农杆菌属(Agrobacterium)、假单孢菌属(Pseudomonas)、罗尔斯通氏菌属(Ralstonia)、伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia)、食酸菌属(Acidovorax)、黄单胞菌属(Xanthomonas)、棒形杆菌属(Clavibacter)、链霉菌属(Streptomyces)、木杆菌属(Xylella)、螺原体属(Spiroplasma)以及植原体属(Phytoplasma)。植物病原性细菌造成一系列症状，包括菌瘿和过度生长、萎蔫病、叶斑病、斑枯病、软腐病以及疮痂病和溃疡病。马铃薯疮痂病是感染马铃薯块茎以及其他根作物如小红萝卜、甜菜、胡萝卜以及欧洲防风草的一种病害。它在块茎表面造成难看的枯斑损伤，从而导致巨大的经济损失。主要的致病病原体是发现于世界范围的马铃薯生长区的土壤中的疮痂病链霉菌(Streptomycesscabies)，一种在大多数固体介质上产生灰色菌丝的革兰氏阳性、需氧的丝状细菌。这些营养丝状体断开以便形成孢子，这些孢子使得细菌能够存活很长一段时间并且通过水、风和土壤传播。它能够依靠腐烂的植物材料存活以及通过动物消化道存活而在土壤中存活很长一段时间、甚至数年。已经使用各种方法来降低病害严重性，然而，目前不可获得对马铃薯疮痂病的有效控制。施用于植物以抵抗病原微生物并治疗或预防由此类病原体造成的病害的杀真菌剂和其他杀虫剂典型地本质上是化学性的(通常是合成的和非天然存在的)。这些杀真菌剂和杀虫剂可能制造昂贵，并且带来不希望的副作用，包括对动物的毒性和环境问题。对开发替代方法有明确且持续的需要。生物控制剂和组合物是一种具有吸引力的替代物，它更安全、更加能够生物降解，并且开发成本更低。本披露的概述本披露的一个第一方面提供一种用于治疗或预防一种微生物病原体对一种受试者的感染的方法，该方法包括向该受试者给予、或以其他方式将该受试者暴露于一个有效量的一种组合物，该组合物包含选自帕氏乳酸杆菌(Lactobacillusparafarraginis)、布赫纳氏乳酸杆菌(Lactobacillusbuchneri)、瑞氏乳酸杆菌(Lactobacillusrapi)以及玉米乳酸杆菌(Lactobacilluszeae)的乳酸杆菌的至少一种菌株，或源自其中已培养所述菌株的培养基的培养上清液或无细胞滤液。一个第二方面提供一种用于在一种受试者中治疗或预防由一种微生物病原体造成、或与该微生物病原体相关联的一种病害的方法，该方法包括向该受试者给予、或以其他方式将该受试者暴露于一个有效量的一种组合物，该组合物包含选自帕氏乳酸杆菌、布赫纳氏乳酸杆菌、瑞氏乳酸杆菌以及玉米乳酸杆菌的乳酸杆菌的至少一种菌株，或源自其中已培养所述菌株的培养基的培养上清液或无细胞滤液。根据以上方面，将受试者暴露于组合物可包括直接或间接地将受试者暴露于组合物。作为举例，在受试者为一种植物的情况下，可通过将该组合物施用于该植物的一部分、或该植物生长或待种植的土壤中来将该植物暴露于该组合物。另外作为举例，在受试者为一种动物的情况下，可通过将该组合物施用于在其上饲养该动物的牧场或其他草地(或牧场或其他草地在其上生长的土壤)来将该动物暴露于该组合物。该方法可进一步包括向该受试者给予、或以其他方式将该受试者暴露于有效量的一种或多种抗微生物剂。一个第三方面提供一种用于抑制一种微生物的生长的方法，该方法包括将该微生物、或被该微生物定居的或能够被该微生物定居的一种环境暴露于一个有效量的一种组合物，该组合物包含选自帕氏乳酸杆菌、布赫纳氏乳酸杆菌、瑞氏乳酸杆菌以及玉米乳酸杆菌的乳酸杆菌的至少一种菌株，或源自其中已培养所述菌株的培养基的培养上清液或无细胞滤液。在示例性实施例中，该受试者是一种植物。在另外的示例性实施例中，该受试者是一种植物，并且该环境是土壤、植物根和/或植物叶。可在该植物的种植之前、种植时或种植之后使用该组合物处理土壤。类似地，可在该植物的种植之前、种植时或种植之后使用该组合物处理植物根。该方法可包括使用该组合物对该环境或该受试者进行一次处理或多次处理。该方法可进一步包括将该微生物暴露于一个有效量的一种或多种抗微生物剂。一个第四方面提供一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于治疗或预防一种微生物病原体对一种受试者的感染的方法，该方法包括向该受试者给予、或以其他方式将该受试者暴露于一个有效量的一种组合物，该组合物包含选自帕氏乳酸杆菌、布赫纳氏乳酸杆菌、瑞氏乳酸杆菌以及玉米乳酸杆菌的乳酸杆菌的至少一种菌株，或源自其中已培养所述菌株的培养基的培养上清液或无细胞滤液。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.04.23 US 61/815,0381.一种用于治疗或预防一种微生物病原体对一种受试者的感染的方法，该方法包括向
该受试者给予、或以其他方式将该受试者暴露于一个有效量的一种组合物，该组合物包含
选自帕氏乳酸杆菌、布赫纳氏乳酸杆菌、瑞氏乳酸杆菌以及玉米乳酸杆菌的乳酸杆菌的至
少一种菌株，或源自其中已培养所述菌株的培养基的培养上清液或无细胞滤液。
2.一种用于在一种受试者中治疗或预防由一种微生物病原体造成的、或与该微生物病
原体相关联的一种病害的方法，该方法包括向该受试者给予、或以其他方式将该受试者暴
露于一个有效量的一种组合物，该组合物包含选自帕氏乳酸杆菌、布赫纳氏乳酸杆菌、瑞氏
乳酸杆菌以及玉米乳酸杆菌的乳酸杆菌的至少一种菌株，或源自其中已培养所述菌株的培
养基的培养上清液或无细胞滤液。
3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，进一步包括向该受试者给予、或以其他方式
将该受试者暴露于一个有效量的一种或多种抗微生物剂。
4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中该帕氏乳酸杆菌菌株是帕氏乳酸杆菌
Lp18。
5.如权利要求4所述的方法，其中该帕氏乳酸杆菌菌株是于2011年10月27日以检索号
V11/022945保藏在澳大利亚国家计量研究院的帕氏乳酸杆菌Lp18。
6.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中该布赫纳氏乳酸杆菌菌株是布赫纳氏乳
酸杆菌Lb23。
7.如权利要求6所述的方法，其中该布赫纳氏乳酸杆菌菌株是于2011年10月27日以检
索号V11/022946保藏在澳大利亚国家计量研究院的布赫纳氏乳酸杆菌Lb23。
8.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中该瑞氏乳酸杆菌菌株是瑞氏乳酸杆菌
Lr24。
9.如权利要求8所述的方法，其中该瑞氏乳酸杆菌菌株是于2011年10月27日以检索号
V11/022947保藏在澳大利亚国家计量研究院的瑞氏乳酸杆菌Lr24。
10.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中该玉米乳酸杆菌菌株是玉米乳酸杆菌
Lz26。
11.如权利要求10所述的方法，其中该玉米乳酸杆菌菌株是于2011年10月27日以检索
号V11/022948保藏在澳大利亚国家计量研究院的玉米乳酸杆菌Lz26。
12.如权利要求1至11中任一项所述的方法，其中该组合物进一步包含法伯尔醋酸菌
和/或嗜酒假丝酵母的一种菌株。
13.如权利要求12所述的方法，其中该法伯尔醋酸菌菌株是法伯尔醋酸菌Af15。
14.如权利要求13所述的方法，其中该法伯尔醋酸菌菌株是于2011年10月27日以检索
号V11/022943保藏在澳大利亚国家计量研究院的法伯尔醋酸菌Af15。
15.如权利要求12所述的方法，其中该嗜酒假丝酵母菌株是嗜酒假丝酵母Ce31。
16.如权利要求15所述的方法，其中该嗜酒假丝酵母菌株是于2011年10月27日以检索
号V11/022944保藏在澳大利亚国家计量研究院的嗜酒假丝酵母Ce31。
17.如权利要求1至16中任一项所述的方法，其中该组合物中的这些菌株中的一种或多
种被胶囊化。
18.如权利要求1至17中任一项所述的方法，其中该受试者是一种植物。
19.如权利要求18所述的方法，其中该植物是一种作物物种。
20.如权利要求1至17中任一项所述的方法，其中该受试者是一种动物。
21.如权利要求20所述的方法，其中该动物是一种牲畜或其他农畜。
22.如权利要求1至21中任一项所述的方法，其中该微生物病原体是一种植物病害或动
物病害的一种致病物。
23.如权利要求2或权利要求22所述的方法，其中该病害是腐烂症、萎蔫病、锈病、斑病、
枯萎病、溃疡病、白粉病、霉病、菌瘿、疮痂病或乳腺炎。
24.如权利要求1至23中任一项所述的方法，其中该微生物病原体是一种真菌。
25.如权利要求24所述的方法，其中该真菌是一种镰孢属物种。
26.如权利要求25所述的方法，其中该镰孢属物种是尖孢镰孢菌。
27.如权利要求26所述的方法，其中该尖孢镰孢菌是姜专化型尖孢镰孢菌或西瓜专化
型尖孢镰孢菌。
28.如权利要求24所述的方法，其中该真菌选自马卡假尾孢、两型孢瓶霉属真菌、灰葡
萄孢菌以及立枯丝核菌。
29.如权利要求1至23中任一项所述的方法，其中该微生物病原体是一种细菌。
30.如权利要求29所述的方法，其中该病原性细菌是疮痂病链霉菌、乳房链球菌、金黄
色葡萄球菌、大肠杆菌或油橄榄假单胞菌。
31.如权利要求1至30中任一项所述的方法，其中该受试者是一种植物，并且将该植物
暴露于该组合物包括用该组合物处理该植物在其中生长的土壤。
32.如权利要求31所述的方法，其中在该植物、幼苗或植物种子的种植之前、种植时或
种植之后处理该土壤。
33.如权利要求1至32中任一项所述的方法，其中该受试者是一种植物，并且将该植物
暴露于该组合物包括在种植之前处理植物根。
34.一种用于抑制一种微生物的生长的方法，该方法包括将该微生物、或被该微生物定
居的或能够被该微生物定居的一种环境暴露于一个有效量的如权利要求1至17中任一项所
定义的组合物。
35.如权利要求34所述的方法，进一步包括将该微生物暴露于一个有效量的一种或多
种抗微生物剂。
36.如权利要求1至34中任一项所述的方法，其中该方法包括随着时间多次给予或施用
该组合物。
37.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中该组合物包含法伯尔醋酸菌Af15、帕氏
乳酸杆菌Lp18、布赫纳氏乳酸杆菌Lb23、瑞氏乳酸杆菌Lr24、玉米乳酸杆菌Lz26、以及嗜酒
假丝酵母Ce31。
38.如权利要求37所述的方法，其中该组合物包含的这些菌株的终浓度为：对于每种乳
酸杆菌菌株为2.5×105cfu/ml、对于嗜酒假丝酵母Ce31为1.0×105、并且对于法伯尔醋酸菌
Af15为1.0×106。
39.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中该组合物包含玉米乳酸杆菌Lz26、NMI
检索号V12/022850指定的细菌菌株以及NMI检索号V12/022849指定的细菌菌株。
40.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中该组合物包含玉米乳酸杆菌Lz26、布赫
纳氏乳酸杆菌Lb23、帕氏乳酸杆菌Lp18、嗜酒假丝酵母Ce31、以及法伯尔醋酸菌Af15。
41.如权利要求39或权利要求40所述的方法，其中该病原体是一种镰孢属物种并且该
受试者是一种西瓜种子或植株。
42.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中该组合物包含玉米乳酸杆菌Lz26、帕氏
乳酸杆菌Lp18、布赫纳氏乳酸杆菌Lb23、瑞氏乳酸杆菌Lr24、以及法伯尔醋酸菌Af15。
43.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中该组合物包含玉米乳酸杆菌Lz26、帕氏
乳酸杆菌Lp18、布赫纳氏乳酸杆菌Lb23以及瑞氏乳酸杆菌Lr24。
44.如权利要求42或权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦恩·芬利森，凯伦·朱里，
申请(专利权)人：特雷根控股有限公司，
类型：发明
国别省市：澳大利亚;AU