本发明专利技术公开了一种从南极磷虾中提取2,6‑二叔丁基对甲酚的方法及检测方法，将新鲜的南极磷虾和甲醇按1g：(3‑6)ml混合，超声提取，过滤提取液，滤液蒸干，即得2,6‑二叔丁基对甲酚提取物。将提取物和标准品分别用甲醇溶解，制成样品液和标准品液，点样于同一薄层硅胶板中，以石油醚：乙酸乙酯：正己烷＝4‑5:1‑2:0.5‑1为展开剂，薄层展开；展开结束后，晾干，染色；薄层扫描仪扫描，通过检测样品液和标准品液的薄层扫描峰面积积分值，计算得到南极磷虾中2,6‑二叔丁基对甲酚的含量。本发明专利技术首次建立了南极磷虾中2，6‑二叔丁基对甲酚的提取方法和检测方法，采用薄层扫描法对南极磷虾中2，6‑二叔丁基对甲酚进行定量和定性检测，检测方法简单、准确、可靠，稳定性高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从南极磷虾中提取2,6-二叔丁基对甲酚的方法及高效薄层层析扫描检测方法，属食品和化工领域。
技术介绍
南极磷虾(Euphausia superba)是生活于南极生态系统中的一种重要的生物资源，是鸟类和鱼类等南极生物主要的食物来源。南极磷虾资源丰富，根据2011年的统计，生活在南极海域的磷虾数目达到了1×109-2×109吨，其中可捕捞的数量达到了5×106到7×106吨。由于南极磷虾所具有的生物量大，分布广的特点，越来越多的研究者将其作为一种重要的渔业资源，开始了对南极磷虾的研究。2，6-二叔丁基对甲酚，缩写为BHT，简称防老剂“264”，是一种常见的抗氧化剂和通用型的防老剂。主要可以用于油脂等食品添加中，防止其酸败，维持食品的颜色和气味等，还可以用于橡胶、塑料等工业生产中。目前尚未有关于从南极磷虾中提取2，6-二叔丁基对甲酚的报道。因此，有必要开发一种从南极磷虾中提取2，6-二叔丁基对甲酚的方法，以及对2，6-二叔丁基对甲酚进行检测的方法，以便于对南极磷虾资源的开发利用。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术的目的是提供一种从南极磷虾中提取2,6-二叔丁基对甲酚的方法。本专利技术的另一目的是提供一种南极磷虾中2,6-二叔丁基对甲酚的检测方法。为实现上述目的，本专利技术采用下述技术方案：本专利技术的第一方面，提供一种从南极磷虾中提取2,6-二叔丁基对甲酚的方法，步骤如下：将新鲜的南极磷虾和甲醇按1g：(3-6)ml混合，超声提取，过滤提取液，滤液蒸干，即得2,6-二叔丁基对甲酚提取物；所述超声提取的条件为：300-400w、20或40kHz，超声提取时间10-20分钟优选的，所述超声提取的条件为：350w、40kHz，超声提取时间15分钟本专利技术的第二方面，提供一种南极磷虾中2,6-二叔丁基对甲酚的检测方法，步骤如下：(1)将上述2,6-二叔丁基对甲酚提取物用甲醇溶解，制成样品液，将2,6-二叔丁基对甲酚标准品溶于甲醇中，制成标准品液；(2)将样品液和标准品液点样于同一薄层硅胶板中，以石油醚：乙酸乙酯：正己烷＝4-5:1-2:0.5-1为展开剂，预平衡20-30min，薄层展开；(3)展开结束后，取出薄层硅胶板，晾干，染色；(4)薄层扫描仪扫描，通过检测样品液和标准品液的薄层扫描峰面积积分值，计算得到南极磷虾中2,6-二叔丁基对甲酚的含量。步骤(1)中，所述标准品液的浓度为6mg/ml。步骤(2)中，薄层展开的展距为9.0cm。步骤(3)中，用5％氯化铁水溶液染色，然后置于100±5℃下烘烤5～10分钟。步骤(4)中，薄层扫描仪扫描的波长为600nm。步骤(4)中，以2,6-二叔丁基对甲酚标准品的质量(μg)为横坐标(X)，峰面积积分值(AU)为纵坐标(Y)，得到回归方程为Y＝32.7339+163.2936X，相关系数r＝0.99946；在3-30μg间线性关系良好；以上述回归方程对样品液中2,6-二叔丁基对甲酚的含量进行检测。需要说明的是，采用薄层扫描法对2,6-二叔丁基对甲酚进行分析检测虽然是一种常用的分析方法，但是，本专利技术的2,6-二叔丁基对甲酚是从南极磷虾中提取得到的，由于检测对象的特殊性，这就极大的增加了对2,6-二叔丁基对甲酚进行分析检测的难度。对于南极磷虾中2,6-二叔丁基对甲酚的检测而言，目前并没有相关的文献报道，属于一个全新的领域。南极磷虾是地球上极为特殊的动物，其含有丰富的脂类物质、挥发油和其他成分，由于南极磷虾成分复杂，从南极磷虾中分离提取2,6-二叔丁基对甲酚并进行检测的过程中很可能会引入其他的干扰成分，影响2,6-二叔丁基对甲酚的定量测定。本专利技术的检测对象为新鲜的南极磷虾，未经预处理的南极磷虾的成分更为复杂，本专利技术以新鲜的南极磷虾为提取对象，甲醇为提取溶剂，采用超声工艺直接进行提取，并对超声工艺条件进行了优化，在保证在高的提取率的前提下，又降低了能耗。在薄层扫描检测中，展开剂的选择是非常关键的因素，如前所述，由于南极磷虾成分复杂，在提取2,6-二叔丁基对甲酚的过程中很可能会引入干扰成分，在薄层展开的过程中，若展开剂的选择不当，就会在薄层展板上形成干扰样品点，影响检测的结果。本专利技术在展开剂的选取过程中，尝试了多种组合，如：(氯仿：甲醇：乙酸)、(氯仿：乙酸乙酯)、(氯仿：乙酸乙酯：乙酸)、(乙酸乙酯：丙酮：石油醚)等，但是上述展开体系的2,6-二叔丁基对甲酚的Rf值偏高，且拖尾严重。因此，专利技术人选取极性较低的展开剂组合，通过尝试各溶剂间组合和体积的配比，最终确定了石油醚：乙酸乙酯：正己烷＝4-5:1-2:0.5-1(V/V/V)为最适展开剂，2,6-二叔丁基对甲酚得到了很好的分离，且Rf值(0.79)合适，有利于进行定量测定。本专利技术的有益效果：(1)本专利技术首次从南极磷虾中提取得到了2，6-二叔丁基对甲酚，提取方法简单，以新鲜南极磷虾为提取对象，无需对南极磷虾进行预处理，简化了提取工艺，有利于南极磷虾资源的开发利用。(2)本专利技术首次建立了南极磷虾中2，6-二叔丁基对甲酚的检测方法，采用薄层扫描法对南极磷虾中2，6-二叔丁基对甲酚进行定量和定性检测，检测方法简单、准确、可靠，稳定性高。附图说明图1：实施例1中样品液和标准液的薄层展开图；图2：实施例2中样品液和标准液的薄层展开图；图3：实施例3中样品液和标准液的薄层展开图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，应该说明的是，下述实施例仅是为了解释本专利技术，并不对其内容进行限定。实施例1：取新鲜的南极磷虾10g，加入甲醇30mL，在400w、40kHz的条件下超声提取20分钟，过滤提取液。将上述滤液置于旋蒸仪中蒸干，得到2，6-二叔丁基对甲酚的粗提物。将得到的2，6-二叔丁基对甲酚的粗提物溶于2ml甲醇制成样品液；精密称取6mg 2，6-二叔丁基对甲酚标准品溶于1.0mL甲醇，得浓度为6mg/ml的标准液。定性分析：将样品液和标准液点于同一块GF254高效薄层硅胶板(10×10cm2)上。展开剂为石油醚：乙酸乙酯：正己烷＝4:1:0.5。将展开剂加入展开缸(10×12×15cm3)，在室温下预平衡20分钟。再放入高效薄层硅胶板，继续在室温下展开，展距9.0cm。展开结束后，取出板晾干。用5％氯化铁水溶液染色，然后置于105℃下烘烤约5分钟。染色后，样品液和标准品对应的点染成紫红色，Rf值为0.79，如图1所示，说明样品液中含有2,6-二叔丁基对甲酚。定量测定：用10μL移液器精确吸取0.5，1.5，2，3，5μL 2,6-二叔丁基对甲酚标准液以及2μL样品液，点样于同一块高效薄层板H板(10×10cm2)上，展开剂为石油醚：乙酸乙酯：正己烷＝4:1:0.5。将展开剂加入展开缸(10×12×15cm3)，在室温下预平衡20分钟。再放入高效薄层硅胶板，继续在室温下展开，展距9.0cm。展开结束后，取出板晾干。用5％氯化铁水溶液染色，然后置于105℃下烘烤约5分钟。用camag薄层扫描仪3，以600nm的吸收波长扫描，记录薄层扫描峰面积积分值，以2,6-二叔丁基对甲酚标准品的质量(μg)为横坐标(X)，峰面积积分值(AU)为纵坐标(Y)，由薄层色谱扫描仪自带软件WINCATS 1.41直接得到回归方程，为Y本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从南极磷虾中提取2,6‑二叔丁基对甲酚的方法，其特征在于，步骤如下：将新鲜的南极磷虾和甲醇按1g：(3‑6)ml混合，超声提取，过滤提取液，滤液蒸干，即得2,6‑二叔丁基对甲酚提取物；所述超声提取的条件为：300‑400w、20或40kHz，超声提取时间10‑20分钟。
【技术特征摘要】
1.一种从南极磷虾中提取2,6-二叔丁基对甲酚的方法，其特征在于，步骤如下：将新鲜的南极磷虾和甲醇按1g：(3-6)ml混合，超声提取，过滤提取液，滤液蒸干，即得2,6-二叔丁基对甲酚提取物；所述超声提取的条件为：300-400w、20或40kHz，超声提取时间10-20分钟。2.如权利要求1所述的从南极磷虾中提取2,6-二叔丁基对甲酚的方法，其特征在于，所述超声提取的条件为：350w、40kHz，超声提取时间15分钟。3.一种南极磷虾中2,6-二叔丁基对甲酚的检测方法，其特征在于，步骤如下：(1)将权利要求1或2所述方法提取的2,6-二叔丁基对甲酚提取物用甲醇溶解，制成样品液，将2,6-二叔丁基对甲酚标准品溶于甲醇中，制成标准品液；(2)将样品液和标准品液点样于同一薄层硅胶板中，以石油醚：乙酸乙酯：正己烷＝4-5:1-2:0.5-1为展开剂，预平衡20-30min，薄层展开；(3)展开结束后，取出薄层硅胶板，晾干，染...
【专利技术属性】
技术研发人员：马善利，刘代成，
申请(专利权)人：山东师范大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
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