烟薯25的高效脱毒育苗方法技术

本发明专利技术是烟薯25的高效脱毒育苗方法，其培育步骤为：首先选取无虫蛀、无损伤的烟薯25薯块，将其放入细沙中进行催芽，然后，当烟薯25的芽苗长至15～20cm时剪取生长旺盛的1～2cm的茎尖，切去叶片，对茎尖进行消毒，之后在解剖镜下剥取带1～2片叶原基的生长点，将其接种到MS培养基中，然后将进行培养，当幼芽长到4cm时，转移到新的MS培养基中进行培养，对植株进行病毒检测，留下健康无病毒的植株，以无毒苗1～2个叶节为一个切断，扦插入新的MS培养基中，以扩大繁殖，一个月之，分单株直接栽植于塑料大棚的土壤。本发明专利技术实现了烟薯25的脱毒育苗，可以有效地实现无毒苗的培育，防止品种退化，提高产量与质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物组织培养及脱毒领域，尤其涉及烟薯25的高效脱毒育苗方法。
技术介绍
甘薯是一种营养丰富、适应性广、抗逆性强、用途广泛的作物，富含多种维生素，俗称“土人参”。现已培育出多个甘薯品种，其中，烟薯25这一品种因具有产量高、口味好、抗病性强、适应性强的特点成为了优质的食用型品种，但是烟薯25属于块根作物，生长过程中利用营养体进行繁殖，因此容易受到病毒的侵染，病毒侵染会导致产量下降、品质恶劣，甚至失去商品价值。但是由于病毒在植物体内的分布规律是，离分生组织越远病毒密度越高，反之则越低，因此可以利用茎尖分生组织培养生产无毒烟薯25苗。
技术实现思路
本专利技术旨在解决现有技术的不足，而提供烟薯25的高效脱毒育苗方法。本专利技术为实现上述目的，采用以下技术方案：烟薯25的高效脱毒育苗方法，其特征在于，其步骤如下：(1)选取无虫蛀、无损伤的烟薯25薯块，在太阳下暴晒2～3天，然后用清水洗净，埋入经过消毒的细沙中，细沙的覆盖厚度为5cm，放入培养箱中进行催芽；(2)当芽苗长到15～20cm时，剪取生长旺盛的1～2cm的茎尖，剪去肉眼可见的叶片，先用清水冲洗，然后在超净工作台内用乙醇和升汞溶液浸泡进行表面消毒，最后用无菌水漂洗；(3)在体视解剖镜下，将消毒后的茎尖置于载玻片上，用解剖针剥取带有1～2个叶原基的茎尖，接种到添加生长调节剂的MS培养基上进行培养，培养温度30℃，湿度50％，光照强度2000～3000Lx，光照时间12～16h/d；(4)当幼芽长到4cm时，从基部切下，转移到不添加生长调节剂的MS培养基中进行培育，培养温度为25℃，光照强度2000～3000Lx，光照时间16h/d，使其发育成带有4～5个叶片的植株；(5)用血清法对植株进行病毒检测，去除仍带有病毒的植株；(6)以经过病毒检测脱除病毒的无毒苗1～2个叶节为一个切断，扦插入新的不添加生长调节剂的MS培养基中，以扩大繁殖，培养温度为25～27℃，光照强度2000～3000Lx，光照时间13h/d，；(7)无毒苗进行培育一个月之后，洗去附着在植株根部的培养基，分单株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株间距25cm，在塑料大棚两端加防虫网；(8)栽植后的植株苗，大水浇透，移栽后的两周，每天10:00～15:00搭遮阴网，两周后撤去遮阴网，中午放风，移栽三周后撒施尿素随即浇水，促进幼苗生长。特别的，所述步骤(1)中的烟薯25薯块在培养箱中进行催芽时，出芽前黑暗培养，出芽后光照13h/d，光照强度2000Lx，并根据细沙的湿度进行喷水。特别的，所述步骤(3)中的生长调节剂添加量为：萘乙酸0.2mg/L和6-苄氨基嘌呤2.0mg/L。本专利技术的有益效果是：本专利技术中的无毒烟薯25苗培育过程简单，可操作性强，培育步骤合理，可以获得成活率较高的无毒烟薯25苗，提高了无毒苗的产量与质量，并且在培育过程中，选用了MS培养基，MS培养基中含有的甘氨酸、烟酸、VB1、VB6和肌醇五种物质对于烟薯25茎尖生长是必须的，保证了烟薯25茎尖培养的成活率，并且在茎尖培育的初期添加了植物生长剂，益于烟薯25茎尖的生长和分化。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明：实施例1烟薯25的高效脱毒育苗方法，其特征在于，其步骤如下：(1)选取无虫蛀、无损伤的烟薯25薯块，在太阳下暴晒2天，然后用清水洗净，埋入经过消毒的细沙中，细沙的覆盖厚度为5cm，放入培养箱中进行催芽，出芽前黑暗培养，出芽后光照13h/d，光照强度2000Lx，并根据细沙的湿度进行喷水；(2)当芽苗长到15cm时，剪取生长旺盛的1cm的茎尖，剪去肉眼可见的叶片，先用清水冲洗，然后在超净工作台内用70％的乙醇浸泡10s，再用0.1％的升汞溶液浸泡5min进行表面消毒，最后用无菌水漂洗3遍；(3)在体视解剖镜下，将消毒后的茎尖置于载玻片上，用解剖针剥取带有1个叶原基的茎尖，接种到添加生长调节剂的MS培养基上进行培养，生长调节剂添加量为：萘乙酸0.2mg/L和6-苄氨基嘌呤2.0mg/L，培养温度30℃，湿度50％，光照强度2000Lx，光照时间12h/d；(4)当幼芽长到4cm时，从基部切下，转移到不添加生长调节剂的MS培养基中进行培育，培养温度为25℃，光照强度2000LX，光照时间16h/d，使其发育成带有4个叶片的植株；(5)用血清法对小植株进行病毒检测，去除仍带有病毒的植株；(6)以经过病毒检测脱除病毒的无毒苗1个叶节为一个切断，扦插入新的不添加生长调节剂的MS培养基中，以扩大繁殖，培养温度为25℃，光照强度2000LX，光照时间13h/d，；(7)无毒苗进行培育一个月之后，洗去附着在植株根部的培养基，分单株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株间距25cm，在塑料大棚两端加防虫网；(8)栽植后的植株苗，大水浇透，移栽后的两周，每天10:00～15:00搭遮阴网，两周后撤去遮阴网，中午放风，移栽三周后撒施尿素随即浇水，促进幼苗生长。实施例2烟薯25的高效脱毒育苗方法，其特征在于，其步骤如下：(1)选取无虫蛀、无损伤的烟薯25薯块，在太阳下暴晒3天，然后用清水洗净，埋入经过消毒的细沙中，细沙的覆盖厚度为5cm，放入培养箱中进行催芽，出芽前黑暗培养，出芽后光照13h/d，光照强度2000Lx，并根据细沙的湿度进行喷水；(2)当芽苗长到20cm时，剪取生长旺盛的2侧面的茎尖，剪去肉眼可见的叶片，先用清水冲洗，然后在超净工作台内用70％的乙醇浸泡20s，再用0.1％的升汞溶液浸泡7min进行表面消毒，最后用无菌水漂洗5遍；(3)在体视解剖镜下，将消毒后的茎尖置于载玻片上，用解剖针剥取带有2个叶原基的茎尖，接种到添加生长调节剂的MS培养基上进行培养，生长调节剂添加量为：萘乙酸0.2mg/L和6-苄氨基嘌呤2.0mg/L，培养温度30℃，湿度50％，光照强度3000Lx，光照时间16h/d；(4)当幼芽长到4cm时，从基部切下，转移到不添加生长调节剂的MS培养基中进行培育，培养温度为25℃，光照强度3000LX，光照时间16h/d，使其发育成带有5个叶片的植株；(5)用血清法对小植株进行病毒检测，去除仍带有病毒的植株；(6)以经过病毒检测脱除病毒的无毒苗2个叶节为一个切断，扦插入新的不添加生长调节剂的MS培养基中，以扩大繁殖，培养温度为27℃，光照强度3000LX，光照时间13h/d，；(7)无毒苗进行培育一个月之后，洗去附着在植株根部的培养基，分单株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株间距25cm，在塑料大棚两端加防虫网；(8)栽植后的植株苗，大水浇透，移栽后的两周，每天10:00～15:00搭遮阴网，两周后撤去遮阴网，中午放风，移栽三周后撒施尿素随即浇水，促进幼苗生长。上面对本专利技术进行了示例性描述，显然本专利技术具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本专利技术的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进直接应用于其它场合的，均在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
烟薯25的高效脱毒育苗方法，其特征在于，其步骤如下：(1)选取无虫蛀、无损伤的烟薯25薯块，在太阳下暴晒2～3天，然后用清水洗净，埋入经过消毒的细沙中，细沙的覆盖厚度为5cm，放入培养箱中进行催芽；(2)当芽苗长到15～20cm时，剪取生长旺盛的1～2cm的茎尖，剪去肉眼可见的叶片，先用清水冲洗，然后在超净工作台内用乙醇和升汞溶液浸泡进行表面消毒，最后用无菌水漂洗；(3)在体视解剖镜下，将消毒后的茎尖置于载玻片上，用解剖针剥取带有1～2个叶原基的茎尖，接种到添加生长调节剂的MS培养基上进行培养，培养温度30℃，湿度50％，光照强度2000～3000Lx，光照时间12～16h/d；(4)当幼芽长到4cm时，从基部切下，转移到不添加生长调节剂的MS培养基中进行培育，培养温度为25℃，光照强度2000～3000Lx，光照时间16h/d，使其发育成带有4～5个叶片的植株；(5)用血清法对植株进行病毒检测，去除仍带有病毒的植株；(6)以经过病毒检测脱除病毒的无毒苗1～2个叶节为一个切断，扦插入新的不添加生长调节剂的MS培养基中，以扩大繁殖，培养温度为25～27℃，光照强度2000～3000Lx，光照时间13h/d，；(7)无毒苗进行培育一个月之后，洗去附着在植株根部的培养基，分单株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株间距25cm，在塑料大棚两端加防虫网；(8)栽植后的植株苗，大水浇透，移栽后的两周，每天10:00～15:00搭遮阴网，两周后撤去遮阴网，中午放风，移栽三周后撒施尿素随即浇水，促进幼苗生长。...

【技术特征摘要】
1.烟薯25的高效脱毒育苗方法，其特征在于，其步骤如下：(1)选取无虫蛀、无损伤的烟薯25薯块，在太阳下暴晒2～3天，然后用清水洗净，埋入经过消毒的细沙中，细沙的覆盖厚度为5cm，放入培养箱中进行催芽；(2)当芽苗长到15～20cm时，剪取生长旺盛的1～2cm的茎尖，剪去肉眼可见的叶片，先用清水冲洗，然后在超净工作台内用乙醇和升汞溶液浸泡进行表面消毒，最后用无菌水漂洗；(3)在体视解剖镜下，将消毒后的茎尖置于载玻片上，用解剖针剥取带有1～2个叶原基的茎尖，接种到添加生长调节剂的MS培养基上进行培养，培养温度30℃，湿度50％，光照强度2000～3000Lx，光照时间12～16h/d；(4)当幼芽长到4cm时，从基部切下，转移到不添加生长调节剂的MS培养基中进行培育，培养温度为25℃，光照强度2000～3000Lx，光照时间16h/d，使其发育成带有4～5个叶片的植株；(5)用血清法对植株进行病毒检测，去除仍带有病毒的植株；(...

【专利技术属性】
技术研发人员：王立国，郭子江，张嘉，李建军，朱永伶，芮淑会，王鸿鸣，李彦阳，
申请(专利权)人：天津丰华裕隆农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12