一种稳定型维生素K2亚微乳及其制备方法技术

一种维生素K2亚微乳，包括具有按所述维生素K2亚微乳的总重量计的重量百分数的如下各组分：维生素K2 0.0005％～1％，油1.0％～10％，磷脂0.1％～1.2％，乳化剂0.5％～2.3％，防冻剂0.5％～3.0％及水，其中乳化剂为磷脂以外的其他乳化剂。所述维生素K2亚微乳灭菌稳定性和冻融稳定性良好，且具有甚至高达2年以上的预期有效期。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及药物制剂领域，具体涉及一种稳定型维生素K2亚微乳及其制备方法以及上述亚微乳的制药用途。
技术介绍
骨质疏松是一种慢性、渐进性的骨代谢障碍疾病，其主要疾病反应为部分甚至全部骨骼的骨质量降低，并伴随更大的骨折风险。绝大多数老年人、绝经后妇女都会患有骨质疏松症，面临慢性疼痛、骨折甚至残疾的威胁，导致生活质量降低，同时也需要承担巨大的花销。钙是骨质的重要组成物质，为了能够预防骨质疏松，越来越多的人开始重视补钙。然而，欧美国家的科研机构曾经进行过多次补钙与健康的大型临床试验，发现单纯补钙并不能降低骨质疏松和骨折的发生率，反而会造成便秘、结石、关节软骨钙化、骨刺增生、骨性关节炎和心脑血管阻塞等不良反应。已有研究表明，钙离子进入体内后有两种不同的去向：一是沉积在正确的部位，比如骨骼、牙齿等；二是沉积在错误的部位，如关节软骨、心脑动脉血管、胆囊和肾脏等。错误沉积的钙质会进一步造成所在部位组织和器官的钙化。关节软骨的钙化会造成脊椎、腰椎、肘、膝等大小关节的损伤，引起严重的骨性关节炎、肩周炎等疾病，严重者可造成骨刺和关节腔的破坏。动脉血管的钙化会导致动脉狭窄、栓塞、心肌梗塞和脑中风。胆囊和肾脏的钙化则会影响脏器的正常生理功能，而且还会引起其他继发性疾病。许多老年人往往同时面临骨质疏松、动脉硬化和老年性骨关节炎等多重健康问题，需要有一个理想的治疗方法，既能改善骨质疏松症状，又不会导致或加重动脉硬化和关节炎等疾病，而维生素K正好可以解决这些问题。多年来，人类一直把维生素K的作用局限于维持正常的凝血机制方面，但随着1960年有学者发现维生素K2还参与人体骨代谢的作用，特别是“维生素K依赖蛋白”被发现后，这种认识才得以改变(Nelsestuen,G.L.,et al.(2000).Vitamin K-dependent proteins.Vitamins&Hormones 58:355-389.)。维生素K是γ-谷氨酸羧化酶的辅酶，能将凝血酶原等蛋白的谷氨酸残基羧化成γ-羧化谷氨酸(γ-carboxyglutamate，Gla)，生成Gla包含蛋白，即维生素K依赖蛋白。机体中有多种Gla包含蛋白，它们分布在不同的器官、组织，目前已发现的有以下几种：(1)凝固因子(II，VII，IX，X)以及抗凝血蛋白(C，S，Z)，它们由肝脏合成，在血液凝固过程中起着重要作用。(2)骨钙素(Osteocalcin)，是由成骨细胞分泌的非胶原蛋白，并在骨形成过程中发挥重要作用。(3)基质GLA蛋白(Matrix Gla protein，MGP)，这种蛋白存在于多种身体组织中，主要发挥抑制钙化的作用，这种作用在软骨和在动脉血管壁尤为明显。(4)生长抑制特异性蛋白6(Growth-arrest-specific gene-6 protein，GAS6)，由白细胞和内皮细胞对损伤响应而分泌，能够帮助细胞存活、增殖、迁移和粘附。(5)除此之外还有富含脯氨酸的Gla蛋白(PRGP)，跨膜Gla蛋白(TMG)等，它们的确切功能仍然未知。由于维生素K和机体的Gla包含蛋白息息相关，而这些蛋白质都发挥着重要的生理功能，因此维生素K具有多种药理作用。预防和治疗出血性疾病肝脏最初合成的凝血因子为无活性的前体，必须经过翻译和加工修饰才具有活性。此过程需要维生素K家族成员作为辅助因子。当人体或动物缺乏维生素K或摄入维生素K拮抗剂如香豆素或华法林时，血浆中凝血因子会相应减少，促进凝血的能力大幅度下降，凝血时间就会明显延长，甚至出现出血症状。虽然维生素K会促进凝血，但是并不会影响血液的正常流动。研究发现，维生素K的凝血机制作用只是在人体发生出血的状况下才会发挥，即当损伤的组织或被刺激的细胞所包含的细胞因子暴露于血浆时，才开始进入正常的凝血过程，发挥止血作用。可以改善儿童的“生长痛”儿童在生长发育期有时会出现反复发作的双下肢间歇性疼痛，称为“生长痛”。日本儿童因为从小食用富含维生素K2的纳豆，遭受“生长痛”的几率远远小于其他国家的儿童。研究表明，“生长痛”儿童疼痛部位的骨密度显著低于正常儿童，补充维生素K2可以使儿童的骨密度更高，骨骼更强壮，从而防止“生长痛”的出现。预防动脉硬化、器官钙化和关节炎食物中的钙进入人体后不会完全沉积到骨骼和牙齿，会有一部分沉积到动脉血管、心脏瓣膜、关节软骨或其他部位的软组织，导致动脉血管硬化、器官钙化、关节炎等疾病。补充维生素K2后，它可以提高骨钙素的含量，增强其与Ca2+的结合能力，降低在血管、关节腔等错误部位沉积的钙质含量，防止血管、关节和其他器官钙化，预防动脉硬化、器官钙化和关节炎。辅助治疗及预防癌症体外研究均表明，维生素K能表现出抗癌作用(K1和K2均是)，细胞试验结果显示，维生素K对多种癌细胞具有抑制作用，而且维生素K2的ID50低于K1，对肿瘤细胞的抑制作用更强，但对正常的骨髓细胞几乎没有作用。研究者给肝癌患者服用维生素K2，显著提高了生存率，相比于对照组，服用维生素K2组的癌症转移率更低。另外，患有早幼粒细胞性白血病的患者服用维生素K2，结合其他治疗，两个月后早幼粒细胞完全消失；患有骨髓增生异常综合征(MDS，易演变为急性髓系白血病)的病人服用维生素K2后髓原始细胞数目减少，血小板数量增加，在停止骨髓抑制治疗后仍表现出很好的疗效。现已有专利技术将维生素K和其他维生素添加至饮料中(CN 1073826)或制备成粉状组合物(CN 1212080C)用于营养补充，但这些专利技术仅能给人体补充维生素K，并不能起到治疗骨质疏松症的作用。塞斯·弗美尔等公开了一种用于治疗和预防骨、软骨和心血管系统相关疾病的维生素K2药品和类药剂营养品，但其设计的剂型为片剂或胶囊剂(CN 101534807A)。由于维生素K2比维生素K1的治疗效果更好，且机体摄取的维生素K1需转化为K2后才能发挥作用(Okano T,Shimomura Y,Yamane M,et al.Conversion of phylloquinone(vitamin K1)into menaquinone-4(vitamin K2)in mice:two possible routes for menaquinone-4accumulation incerebra of mice.J Biol Chem.2008；283:11270-11279)，因此直接使用维生素K2可以有更快更好的治疗效果。目前，国内外已有用于预防或治疗骨质疏松的维生素K2药品(四烯甲萘醌软胶囊)及保健品上市，剂型均为软胶囊或片剂。由于维生素K2是脂溶性药物，其在水中的溶解度很小，口服给药后胃肠道吸收较差，生物利用度低。因此，即使维生素K2有很好的药理作用，其在临床上的疗效也很难达到期望值。此外，维生素K2主要是从纳豆中提取或由微生物发酵制得的，人工合成非常困难。因此亟需开发一种生物利用度更高的剂型，既能保证药物在体内能够达到所需浓度，又能节约原料，降低成本。为了增加亲脂性化合物的临床疗效，研究者们尝试了多种增加胃肠道吸收和提高生物利用度的方法。亚微乳(submicron emulsion)可以从以下几个方面提高药物的口服生物利用度：(1)将难溶于水的药物溶解或增溶于油相中然后制备成O/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种维生素K2亚微乳，包括按所述维生素K2亚微乳的总重量计的如下重量百分数的各组分：维生素K2 0.0005％～1％，油 1.0％～10％磷脂 0.1％～1.2％，乳化剂 0.5％～2.3％，防冻剂 0.5％～3.0％，及水；其中乳化剂为磷脂以外的其他乳化剂；优选地，按所述维生素K2亚微乳的总重量计，磷脂的重量百分数为0.3％～0.8％，乳化剂的重量百分数为1.0％～1.6％，防冻剂的重量百分数为0.5％～2.0％。

【技术特征摘要】
1.一种维生素K2亚微乳，包括按所述维生素K2亚微乳的总重量计的如下重量百分数的各组分：维生素K2 0.0005％～1％，油 1.0％～10％磷脂 0.1％～1.2％，乳化剂 0.5％～2.3％，防冻剂 0.5％～3.0％，及水；其中乳化剂为磷脂以外的其他乳化剂；优选地，按所述维生素K2亚微乳的总重量计，磷脂的重量百分数为0.3％～0.8％，乳化剂的重量百分数为1.0％～1.6％，防冻剂的重量百分数为0.5％～2.0％。2.如权利要求1所述的维生素K2亚微乳，还包括按所述维生素K2亚微乳的总重量计的重量百分数为0.02％～5.0％的矫味剂。3.如权利要求1或2所述的维生素K2亚微乳，还包括按所述维生素K2亚微乳的总重量计的重量百分数为0.001％～1％，优选0.001％～0.015％的稳定剂。4.如权利要求1所述的维生素K2亚微乳，其中，所述维生素K2选自MK-4、MK-5、MK-6、MK-7、MK-8和MK-9中的一种或更多种；所述油选自大豆油、玉米油、茶油、橄榄油、椰子油、鱼油、红花油、芝麻油和中链甘油三酯中的一种或更多种，优选地，所述油为大豆油和中链甘油三酯的混合物，更优选地，所述油是重量比为1:0.8～1:1.5的大豆油和中链甘油三酯的混合物；所述磷脂选自大豆卵磷脂(SPC)、蛋黄卵磷脂(EPC)、氢化大豆磷脂(HSPC)、二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二月桂酰磷脂酰胆碱(DLPC)和二月桂酰磷脂酰乙醇胺(DLPE)中的一种或更多种；所述乳化剂选自普郎尼克F87、普朗尼克F108、普朗尼克F127、普朗尼克P124、泊洛沙姆188、泊洛沙姆237、泊洛沙姆338、泊洛沙姆407、聚氧乙烯35蓖麻油、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯60氢化蓖麻油、聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80、聚乙二醇12羟基硬脂酸酯和聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯中的一种或更多种；所述防冻剂选自葡萄糖、木糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖、海藻糖、甘露醇、木糖醇、麦芽醇、丙二醇、甘油、PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG1000、PEG2000、PEG4000和PEG6...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈杰鹏，段丽丽，邱雪莲，洪琳，陈鸿锐，纪烨瑜，蔡桂珠，陈煜藩，胡留松，许志锴，叶红林，黄晓莹，
申请(专利权)人：广东双骏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44