用于控制叶甲属的组合物和方法技术

本文公开了控制侵扰作物的害虫，尤其是叶甲属种类的方法，以及提供对此类害虫有抗性的植物的方法。还公开了用于此类方法中的多核苷酸和重组DNA分子和构建体，含有杀虫双链RNA的杀虫组合物如局部喷雾剂和对受叶甲属种类侵扰具有提高的抗性的茄科植物。进一步公开了选择RNAi介导的沉默和叶甲属种类控制的靶基因的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用和序列表的并入本申请要求2013年7月19日提交的美国临时专利申请第61/856,137号，2013年11月1日提交的美国临时专利申请第61/899,000号和2014年4月17日提交的美国临时专利申请第61/980,800号的优先权，所述申请通过引用整体并入本文。文件中所含的序列表“40-21_60191_A.txt”(2,291千字节，创建于2013年7月19日，随美国临时专利申请第61/856,137号一起于2013年7月19日提交)、“40-21_60191_0001US_ST25.txt”(2,322千字节，创建于2013年10月30日，随美国临时专利申请第61/899,000号一起于2013年11月1日提交)和“40-21_60191_0002_US_ST25.txt”(2,338千字节，创建于2014年4月17日，随美国临时专利申请第61/980,800号一起于2014年4月17日提交)通过引用整体并入本文。文件中所含的序列表“40-21_60191_0003_ST25_new.txt”(2,532,856字节，创建于2014年7月17日)随函提交并且通本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于控制植物受叶甲属种类侵扰的方法，其包括：(a)使所述叶甲属种类与多核苷酸接触，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1‑725、SEQ ID NO:726‑729、SEQ ID NO:731‑806、SEQ ID NO:808‑830和SEQ ID NO:1087‑1094；或(b)在所述叶甲属种类的食物中提供多核苷酸，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列，所述靶基因具有选...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.07.19 US 61/856,137;2013.11.01 US 61/899,000;1.一种用于控制植物受叶甲属种类侵扰的方法，其包括：(a)使所述叶甲属种类与多核苷酸接触，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(b)在所述叶甲属种类的食物中提供多核苷酸，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(c)通过在所述叶甲属种类的幼虫的食物中提供包含至少一个沉默元件的至少一种多核苷酸而在所述幼虫中引起死亡或生长受阻，所述沉默元件包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的21个连续核苷酸，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(d)向所述植物局部施用包含至少一种多核苷酸的组合物，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(e)以使得有效量的至少一种多核苷酸被以所述植物为食的叶甲属种类摄取的方式向所述植物局部施用包含所述多核苷酸的组合物，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的至少21个连续核苷酸，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(f)在所述植物中表达至少一种多核苷酸，所述多核苷酸包含与具有选自以下的序列的DNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(g)向所述植物提供至少一种多核苷酸，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段，其中所述靶基因选自：在靶基因序列组中标识的基因或由所述靶基因转录的RNA；或(h)使所述叶甲属种类与有效量的双链RNA接触，其中一条链与编码核糖体蛋白的基因的至少21个连续核苷酸互补，其中RNA干扰被诱导并且发生死亡；或(i)使所述叶甲属种类与多核苷酸接触，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段，所述靶基因选自：在靶基因序列组中标识的基因。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述多核苷酸为双链RNA。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述双链RNA经化学合成或通过在微生物中表达或在植物细胞中表达而生成。4.根据权利要求2所述的方法，其中所述双链RNA包含含有选自以下的序列的链：SEQ ID NO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括向所述植物局部施用包含至少一种多核苷酸的组合物，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列，其中所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；并且其中所述组合物还包含选自载体剂、表面活性剂、阳离子脂质、有机硅、有机硅表面活性剂、多核苷酸除草分子、非多核苷酸除草分子、非多核苷酸杀虫剂、安全剂和昆虫生长调节剂的一种或多种组分。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括使所述叶甲属种类与有效量的包含双链RNA的溶液接触，其中所述双链RNA的至少一条链与编码核糖体蛋白的基因或由所述基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补，其中所述叶甲属种类为马铃薯叶甲，并且其中RNA干扰被诱导并且发生马铃薯叶甲死亡，并且其中所述核糖体蛋白为核糖体L7蛋白或由SEQ ID NO:730编码的蛋白或其中所述双链RNA包含选自SEQ ID NO:989、988、1104或1105的序列。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述溶液还包含选自有机硅表面活性剂或阳离子脂质的一种或多种组分。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括以使得有效量的至少一种多核苷酸被以所述植物为食的叶甲属种类摄取的方式向所述植物局部施用包含所述多核苷酸的组合物，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；其中所述叶甲属种类为马铃薯叶甲；并且其中所述靶基因具有SEQ ID NO:730的序列或其中所述多核苷酸为双链RNA，其具有有选自SEQ ID NO:989、988、1104或1105的序列的链。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述叶甲属种类选自：Leptinotarsa behrensi、Leptinotarsa collinsi、马铃薯叶甲(科罗拉多马铃薯甲虫)、Leptinotarsa defecta、Leptinotarsa haldemani(Haldeman绿色马铃薯甲虫)、Leptinotarsa heydeni、Leptinotarsa juncta(伪马铃薯甲虫)、膜苞菊叶甲(菊科灌木甲虫)、蒺藜叶甲、柔毛茄叶甲、胡颓子叶茄叶甲、蒺藜四条叶甲、Leptinotarsa tumamoca和Leptinotarsa typographica。10.一种植物，其对叶甲属种类侵扰具有提高的抗性，通过根据权利要求1所述的方法提供，或所述植物的果实、种子或可繁殖部分。11.根据权利要求10所述的植物，其中所述植物选自马铃薯、番茄和茄子。12.一种用于控制叶甲属种类的杀虫组合物，其包含：(a)杀虫有效量的多核苷酸，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的至少21个连续核苷酸，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(b)杀虫有效量的至少一种多核苷酸，所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的至少一个沉默元件，其中所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(c)杀虫有效量的至少一种RNA，所述RNA包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(d)当被叶甲属种类摄取或接触时在所述叶甲属种类中引起死亡或生长受阻的RNA分子，其中所述RNA分子包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的至少21个连续核苷酸，所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(e)当被叶甲属种类摄取或接触时在所述叶甲属种类中引起死亡或生长受阻的杀虫双链RNA分子，其中所述杀虫双链RNA分子的至少一条链包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的21个连续核苷酸，其中所述靶基因具有选自以下的序列：SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:807、SEQ ID NO:1-725、SEQ ID NO:726-729、SEQ ID NO:731-806、SEQ ID NO:808-830和SEQ ID NO:1087-1094；或(f)杀虫有效量的包含选自以下的序列的至少一种双链RNA：SEQ ID NO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、98...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·L·贝蒂，M·J·克劳福德，B·D·伊兹，L·E·弗拉格尔，M·卡普尔，C·M·泰勒，
申请(专利权)人：孟山都技术有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US