本发明专利技术涉及一种栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法，该方法包括以下步骤：⑴将栀子果实水提后，经过滤、浓缩、干燥，即得栀子粉；⑵将栀子粉配制成水溶液；⑶将步骤⑵所得的水溶液注入处理过的聚酰胺柱，再用蒸馏水冲洗，分别得到聚酰胺柱上样流出液、水洗脱液；⑷将聚酰胺上样流出液和水洗脱液合并后注入处理过的大孔树脂柱，并经洗脱、减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子苷产物；⑸先用10~30%的乙醇溶液冲洗聚酰胺柱除杂，再用30~90%的乙醇溶液冲洗聚酰胺柱，得到30~90%的乙醇洗脱液，该洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子黄色素产物。同时，本发明专利技术该公开了该栀子黄色素的应用。本发明专利技术简单易行、操作方便，可工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中草药有效成分的富集工艺，尤其涉及栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法及其应用。
技术介绍
平原人进入高原后，由于高原地区空气稀薄、大气压低、氧分压低等环境因素，直接影响机体的体力和军事作业能力。其中，高原低氧对机体的影响最为明显，在高原缺氧环境下从事一定的体力或脑力劳动后，极易造成血乳酸及其它代谢物堆积，并且造成机体代谢性酸碱紊乱，从而肌肉张力下降而导致疲劳现象的产生，从而表现出劳动能力普遍下降，严重者丧失作业能力。随着海拔高度的提升，劳动能力明显降低。因此，积极探索具有抗疲劳作用的药是十分重要的，筛选有效的预防和缓解疲劳的产品，对于提高高原环境下机体的体力劳动能力、缓解疲劳对于改善生活质量、提高工作效率和军事作业能力都有积极的意义。栀子为茜草科植物栀子(Gardenia jasminoides Ellis)的干燥成熟果实,为临床常用中药。其性寒味苦,无毒,入心、肝、肺、三焦经,具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒之功效。药理学研究表明以栀子的药理作用广泛，具有保肝、利胆、镇痛、抗炎、抗菌、抗肿瘤、降血糖血脂等多种药理活性，是极其重要而且具有很大开发利用价值的中药材成分。其中栀子主要的活性成分西红花苷，同时也是藏药西红花的主要活性物质，具有抗氧化、抗动脉粥样硬化及调节血脂的作用，是自然界唯一的一种天然的类胡萝卜素色素，由西红花酸(crocetin)与二分子龙胆二糖结合而成，包括西红花苷-I 与西红花苷- II，具有较高的经济价值，被广泛应用于食品、医药和化妆品领域中。有研究表明，西红花苷和西红花酸具有清除自由基及显著地抗氧化作用，而类胡萝卜素的药理作用机制中 ,其抗氧化活性尤为重要，且有文献报道，具有清除活性氧、自由基和抗氧化作用的药物可提高动物的耐缺氧能力，减轻组织缺氧损伤。由于西红花产量极低，市场价格偏高，而栀子黄色素和西红花具有相同的活性成分西红花苷，因此，有必要对栀子黄色素进行科学、有效地开发。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种简单易行的栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法。本专利技术所要解决的技术问题是提供该栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的应用。为解决上述问题，本专利技术所述的栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法，包括以下步骤：⑴将干燥、粉碎至20~40目的栀子果实用蒸馏水煎煮提取后，经过滤、减压浓缩、喷雾干燥，即得栀子粉；⑵将所述栀子粉用25℃蒸馏水配制成20~40 mg/mL的水溶液；⑶将所述步骤⑵所得的水溶液按1.0~3.0倍的柱体积以1.5~15mL/min的流速注入8cm×100 cm处理过的14~30目聚酰胺柱，再按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0 mL/min的流速用蒸馏水冲洗聚酰胺柱，分别得到聚酰胺柱上样流出液、水洗脱液；⑷将聚酰胺上样流出液和水洗脱液合并后，合并液以10mL/min的流速全部注入处理过的大孔树脂柱，先按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0 mL/min的流速用蒸馏水冲洗大孔树脂柱，再按2.0~10.0倍的柱体积以1.5~10.0 mL/min的流速用体积浓度为10~70%的乙醇溶液冲洗大孔树脂柱，得到10~70%的乙醇洗脱液，该10~70%的乙醇洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子苷产物；⑸先按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0mL mL/min的流速用体积浓度为10~30%的乙醇溶液冲洗聚酰胺柱除杂，再按2.0~10.0倍的柱体积以1.5~10.0 mL/min的流速用体积浓度为30~90%的乙醇溶液冲洗所述聚酰胺柱，得到30~90%的乙醇洗脱液，该30~90%的乙醇洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子黄色素产物。所述步骤⑴中煎煮提取条件是指料液质量比为1:8~10，温度为90~100℃，次数为2~3次，每次时间为1小时。所述步骤⑴、所述步骤⑷和所述步骤⑸中减压浓缩的条件均是指温度为50℃~80℃。所述步骤⑴中喷雾干燥的条件是指温度为120~140℃，单位时间进风量20~30 m3，喷雾压力0.1~0.4MPa。所述步骤⑷和所述步骤⑸中冷冻干燥的条件均是指温度为-55℃~20℃，真空度为0.2MPa~0.5 MPa。所述步骤⑷中大孔树脂柱是指D-101、HPD100、XDA-6、 DM-130、DA201型大孔树脂中的任意一种。所述步骤⑶中的处理过的聚酰胺柱和所述步骤⑷中处理过的大孔树脂柱均是指先用体积浓度为95%的乙醇洗脱，直至乙醇洗脱液加蒸馏水不出现浑浊为止，再以蒸馏水洗脱柱子至无醇味，即得。所述步骤⑶中的处理过的聚酰胺柱的尺寸为8cm×100 cm。如上所述的栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法所得到的栀子黄色素作为抗缺氧活性成分在医药上的应用，其特征在于：以栀子黄色素为活性成分，配以药用铺料制备成药剂学上的任何一种剂型；或以栀子黄色素为活性成分，添加抗氧化和/或抗疲劳活性成分组成复方，并配以药用辅料制备成药剂学上的任何一种剂型。所述剂型是指硬胶囊、软胶囊、普通片、糖衣片、薄膜衣片、异型片、咀嚼片、泡腾片、分散片、颗粒剂、丸剂、溶液剂、糖浆剂中的任意一种。如上所述的栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法所得到的栀子黄色素作为抗氧化、抗疲劳功能的活性成分在制备抗氧化或抗疲劳保健品方面的应用。本专利技术与现有技术相比具有以下优点：1、本专利技术提取的栀子黄色素作为抗缺氧活性成分的药效可以从以下4个实验中体现：实验1 栀子有效部位急性毒性实验⑴实验目的：筛选栀子有效部位毒性成分。⑵实验条件：三级动物实验室，室温20~25℃，空调恒温。⑶实验对象：动物 BalB/C小鼠90只，雌雄各半，体重20±2g，由兰州军区兰州总医院动物实验科提供，合格证号：甘肃省医动字第1402-0201号。⑷药材与仪器：栀子水提取物，栀子多糖，栀子黄色素，栀子苷由实验室自制，临用前制成0.1g/mL水溶液；4%多聚甲醛(批号：20150727北京索莱宝科技有限公司)灭菌注射用水（四川科伦药业股份有限公司，批号：M15111005）。光学显微镜(日本Nikon公司，E200)；组织切片机(德国美康公司，HM340E)；TB-718E型生物组织自动包埋机(湖北泰雅电子技术有限公司)。⑸实验方法①将50只BALB/C小鼠（雌雄各半）随机分为空白对照组（0.1mL/10g灭菌注射用水），栀子水提取物（1.0g.kg-1.d-1），栀子黄色素组（1.0g.kg-1.d-1）,栀子多组（1.0g.kg-1.d-1），栀子苷（1.0g.kg-1.d-1），灌胃给药，连续5天。观察小鼠生理现象、体重变化。②将40只BALB/C小鼠（雌雄各半）随机分为空白对照组（0.1mL/10g灭菌注射用水），栀子苷低剂量组（0.5g.kg-1.d-1），栀子苷中剂量组（1.0g.kg-1.d-1），栀子苷高剂量组（2.0g.kg-1.d-1），连续5天，灌胃给药。观察小鼠生理现象、体重变化。解剖小鼠取半截小肠，用生理盐水冲洗干净后，于5mL EP管中加入4mL 4%多聚甲醛固定小肠，常温放置24h后做病理切片，进行HE染色。⑹实验结果给药栀子黄色素组小鼠表现正常，没有任何中毒现象，具有安全性。给药后栀子苷组小鼠精神萎靡，行动缓慢本文档来自技高网...
【技术保护点】
栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法，包括以下步骤：⑴将干燥、粉碎至20~40目的栀子果实用蒸馏水煎煮提取后，经过滤、减压浓缩、喷雾干燥，即得栀子粉；⑵将所述栀子粉用25℃蒸馏水配制成20~40 mg/mL的水溶液；⑶将所述步骤⑵所得的水溶液按1.0~3.0倍的柱体积以1.5~15mL/min的流速注入8cm×100 cm处理过的14~30目聚酰胺柱，再按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0 mL/min的流速用蒸馏水冲洗聚酰胺柱，分别得到聚酰胺柱上样流出液、水洗脱液；⑷将聚酰胺上样流出液和水洗脱液合并后，合并液以10mL/min的流速全部注入处理过的大孔树脂柱，先按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0 mL/min的流速用蒸馏水冲洗大孔树脂柱，再按2.0~10.0倍的柱体积以1.5~10.0 mL/min的流速用体积浓度为10~70%的乙醇溶液冲洗大孔树脂柱，得到10~70%的乙醇洗脱液，该10~70%的乙醇洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子苷产物；⑸先按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0mL mL/min的流速用体积浓度为10~30%的乙醇溶液冲洗聚酰胺柱除杂，再按2.0~10.0倍的柱体积以1.5~10.0 mL/min的流速用体积浓度为30~90%的乙醇溶液冲洗所述聚酰胺柱，得到30~90%的乙醇洗脱液，该30~90%的乙醇洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子黄色素产物。...
【技术特征摘要】
1.栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法，包括以下步骤：⑴将干燥、粉碎至20~40目的栀子果实用蒸馏水煎煮提取后，经过滤、减压浓缩、喷雾干燥，即得栀子粉；⑵将所述栀子粉用25℃蒸馏水配制成20~40 mg/mL的水溶液；⑶将所述步骤⑵所得的水溶液按1.0~3.0倍的柱体积以1.5~15mL/min的流速注入8cm×100 cm处理过的14~30目聚酰胺柱，再按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0 mL/min的流速用蒸馏水冲洗聚酰胺柱，分别得到聚酰胺柱上样流出液、水洗脱液；⑷将聚酰胺上样流出液和水洗脱液合并后，合并液以10mL/min的流速全部注入处理过的大孔树脂柱，先按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0 mL/min的流速用蒸馏水冲洗大孔树脂柱，再按2.0~10.0倍的柱体积以1.5~10.0 mL/min的流速用体积浓度为10~70%的乙醇溶液冲洗大孔树脂柱，得到10~70%的乙醇洗脱液，该10~70%的乙醇洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子苷产物；⑸先按1.0~3.0倍的柱体积以5.0~10.0mL mL/min的流速用体积浓度为10~30%的乙醇溶液冲洗聚酰胺柱除杂，再按2.0~10.0倍的柱体积以1.5~10.0 mL/min的流速用体积浓度为30~90%的乙醇溶液冲洗所述聚酰胺柱，得到30~90%的乙醇洗脱液，该30~90%的乙醇洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥后，即得栀子黄色素产物。2.如权利要求1所述的栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法，其特征在于：所述步骤⑴中煎煮提取条件是指料液质量比为1:8~10，温度为90~100℃，次数为2~3次，每次时间为1小时。3.如权利要求1所述的栀子中抗高原缺氧疲劳活性成分的分离方法，其特征在于：所述步骤⑴、所述步骤⑷和所述步骤⑸中减压...
【专利技术属性】
技术研发人员：李茂星，王先敏，毛婷，曹馨元，马幸福，
申请(专利权)人：李茂星，
类型：发明
国别省市：甘肃;62
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