本发明专利技术公开的一种玉竹总黄酮的高效循环提取方法及其纯化方法，涉及生物制药提取加工技术领域，其提取过程如下：㈠、玉竹原料预处理：⑴、烘干；⑵、粉碎；⑶、吸湿；⑷、浸泡；㈡、循环提取：⑴、装柱；⑵、一级提取；⑶、二级提取；⑷、N级提取；将收集的第一级玉竹黄酮提取液、第二级玉竹黄酮提取液、……、第N级玉竹黄酮提取液混合均匀，即得玉竹总黄酮提取液。其纯化过程如下：㈠、调制纯化液；㈡、上树脂；㈢、洗脱；㈣、干燥。具有提取溶剂用量少、生产设备和生产条件要求低、生产成本较低、且能够一次提取多种有效成份等特点，既可用于提取和纯化玉竹中的总黄酮，也可用于提取和纯化银杏叶、金银花、茶叶等植物的总黄酮。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物制药提取加工
，特别是一种玉竹总黄酮的高效循环提取方法及其纯化方法。
技术介绍
玉竹[Polygonatum odoratum(Mill.)Druce]，别名尾参，萎羹，铃挡菜，地管子，甜草根，是百合科黄精属多年生草本植物。玉竹中含有多种黄酮，现代药理学研究表明玉竹总黄酮具有明显体内外的抗氧化作用，具有降血糖、免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等药理作用。现有技术中，玉竹总黄酮的提取方法主要有回流提取法和超声波辅助提取法，这两种提取方法的提取率虽然略高，但普遍存在料液比较高，达到1：(20-36)，即提取溶剂的消耗量较大；同时，提取温度需控制在60-80℃，对生产条件和提取时所用的设备要求较高。中国专利(申请号200910067518.6)公开的“玉竹二氢高异黄酮提取物及其制备方法和用途”,所述制备方法包括以下步骤：回流提取、减压浓缩、大孔树脂吸附、洗脱、浓缩、干燥。另一中国专利(申请号201510129462.8)公开的“一种含竹叶黄酮的复方制品及其制备方法”,主要原料为竹叶、葛根、酸枣仁、黄精、茯苓、玉竹和竹荪。先利用超声辅助酶解法，分解可溶性纤维素，溶解竹叶黄酮；然后将酶灭活，并先后采用乙醇、水提取竹叶黄酮等活性物质；经膜过滤，浓缩，超临界CO2萃取，冷冻干燥等工艺制成各种剂型复方制品。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种提取溶剂用量少、生产设备和生产条件要求低、生产成本较低、且能够一次提取多种有效成份的玉竹黄酮提取和纯化方法。为实现上述专利技术目的，本专利技术所采取的技术方案是专利技术一种玉竹总黄酮的高效循环提取方法，其提取过程如下：㈠、玉竹原料预处理：⑴、烘干：将用于提取的玉竹原料置于烘箱中，在50-70℃条件下烘干至水分含量≤1％，得干燥玉竹，备用；⑵、粉碎：将备用的干燥玉竹粉碎，过30-50目筛，得玉竹粉，备用；⑶、吸湿：向备用的玉竹粉中加入占其体积0.3-0.7倍的提取溶剂浸泡0.3-0.8h，得吸湿玉竹粉，备用；⑷、浸泡：向备用的吸湿玉竹粉中加入占玉竹粉体积3-5倍的提取溶剂，继续浸泡4-6h，得浸泡玉竹粉，备用；㈡、循环提取：⑴、装柱：将浸泡玉竹粉分别装入N个高径比(H/D)为(8-12):1的玻璃层析柱中，形成N级玻璃层析柱，备用；其中：N为≥2的整数；⑵、一级提取：按照提取溶剂3-5BV/h的流加速度，将提取溶剂分M次加入第一级玻璃层析柱中，每次加入的提取溶剂体积数值(ml)为玉竹粉重量数值(g)的3-5倍；其中：M为≥2的整数；依次收集的第一级第一次提取液，作为第一级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第一级第二次提取液，作为第二级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第一级第M次提取液，作为第二级第(M-1)次提取溶剂，备用；⑶、二级提取：按照提取容剂3-5BV/h的流加速度，将第二级第一次提取溶剂、……、第二级第(M-1)次提取溶剂、玉竹粉重量数值(g)3-5倍的体积数值(ml)的第二级第M次提取溶剂依次加入第二级玻璃层析柱中；依次收集的第二级第一次提取液，作为第二级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第二级第二次提取液，作为第三级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第二级第M次提取液，作为第三级第(M-1)次提取溶剂，备用；……；⑷、N级提取：按照提取容剂3-5BV/h的流加速度，将第N级第一次提取溶剂、……、第N级第(M-1)次提取溶剂、玉竹粉重量数值(g)3-5倍的体积数值(ml)的第N级第M次提取溶剂依次加入第N级玻璃层析柱中；依次收集的第N级第一次提取液，作为第N级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第N级第二次提取液，作为下一个提取循环的第一级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第N级第M次提取液，作为下一个提取循环的第一级第(M-1)次提取溶剂，备用；将收集的第一级玉竹黄酮提取液、第二级玉竹黄酮提取液、……、第N级玉竹黄酮提取液混合均匀，即得玉竹总黄酮提取液。所述的N数和M数均为3,也可为2或4或5或其它正整数。N数值越大，所用的料液比就越小，即：单位原料提取所消耗的提取溶剂就越少。M数值越大，玉竹黄酮的总提取率就越高，但所用的料液比也就越大。所述的提取溶剂是体积浓度为30-50％的乙醇溶液、体积浓度为50-60％的甲醇、体积浓度为30-50％正丁醇中的一种或多种，当为两种以上时，各组分的配比为等份或其它比例。所述的循环提取是在常温状态下进行。与此同时，还提供一种玉竹总黄酮的纯化方法，其纯化过程如下：㈠、调制纯化液：将所收集的玉竹总黄酮提取液，减压浓缩后，测定其总黄酮质量浓度，然后直接用提取溶剂将其调制成玉竹总黄酮质量浓度为1.375-1.650mg/ml的溶液，成为玉竹总黄酮调制提取液，备用；㈡、上树脂：将备用的玉竹总黄酮调制提取液以0.5-1.5ml/min的速度，上HPD-100大孔吸附树脂，吸附20-40min，收集吸附树脂，备用；㈢、洗脱：将备用的吸附树脂用所用干树脂重量80倍、体积浓度为60-80％的乙
醇，以0.5-1.5ml/min的速度洗脱，收集乙醇洗脱液，备用；㈣、干燥：将备用的乙醇洗脱液采用旋转蒸发仪干燥，即得纯化的玉竹总黄酮产品。根据实际试验，在室温下，本专利技术的玉竹总黄酮的高效循环提取方法及其纯化方法，其玉竹黄酮总提取率为98.05％(9.25mg/g)，消耗的提取溶剂体积(ml)为玉竹粉重量(g)的11.2倍。而采用微波辅助提取法对玉竹中的黄酮进行提取，优化后的提取条件为：微波功率600W、控制微波温度60℃、提取时间3h、料液比1:12，在提取次数3次的情况下，共耗费36倍体积的提取溶剂，玉竹黄酮总提取率为99.7％(9.41mg/g)，其中第一次的提取率为78.2％，第二次提取率为18.4％，第三次提取率为3.1％。可见，本专利技术的提取率仅比微波辅助提取法低1.65％，但是，其提取溶剂的消耗量仅为微波辅助提取法的32％。若相比微波辅助提取第一次玉竹黄酮的提取率，则本专利技术的提取率高19.85％。本专利技术的玉竹总黄酮的高效循环提取方法及其纯化方法，由于采用多级循环的方式，包括吸湿所用的提取溶剂在内，其料液比仅为1：11.2，是现有方法的31-56％，因而，其单位原料提取所消耗的提取溶剂量较少。同时，采用玻璃层析柱提取方式，对生产设备的要求比较低，可节省投资成本。此外，其生产可在常温下进行，故其生产的条件要求低，可进一步降低设备投资，减少固定成本支出。提取过程中，对于相同极性的成分，可用一种溶剂一次性提取出来，因此，能够一次提取多种有效成份。附图说明图1是本专利技术的提取流程示意图。图中：Ⅰ是第一个提取循环，Ⅱ是第二个提取循环；1柱是第一个提取循环的第一级玻璃层析柱，2柱是第一个提取循环的第二级玻璃层析柱，3柱是第一个提取循环的第三级玻璃层析柱；R1是第一个提取循环的第一级第一次提取溶剂，R2是第一个提取循环的第一级第二次提取溶剂，R3是第一个提取循环的第一级第三次提取溶
剂，R3`是第一个提取循环的第二级第三次提取溶剂，R3``是第一个提取循环的第三级第三次提取溶剂；L1是收集的第一个提取循环的第一级第一次提取液，L2是第一个提取循环的第二级第一次提取溶剂，L3是第一个提取循环的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种玉竹总黄酮的高效循环提取方法，其特征在于提取过程如下：㈠、玉竹原料预处理：⑴、烘干：将用于提取的玉竹原料置于烘箱中，在50‑70℃条件下烘干至水分含量≤1％，得干燥玉竹，备用；⑵、粉碎：将备用的干燥玉竹粉碎，过30‑50目筛，得玉竹粉，备用；⑶、吸湿：向备用的玉竹粉中加入占其体积0.3‑0.7倍的提取溶剂浸泡0.3‑0.8h，得吸湿玉竹粉，备用；⑷、浸泡：向备用的吸湿玉竹粉中加入占玉竹粉体积3‑5倍的提取溶剂，继续浸泡4‑6h，得浸泡玉竹粉，备用；㈡、循环提取：⑴、装柱：将浸泡玉竹粉分别装入N个高径比(H/D)为(8‑12):1的玻璃层析柱中，形成N级玻璃层析柱，备用；其中：N为≥2的整数；⑵、一级提取：按照提取溶剂3‑5BV/h的流加速度，将提取溶剂分M次加入第一级玻璃层析柱中，每次加入的提取溶剂体积数值(ml)为玉竹粉重量数值(g)的3‑5倍；其中：M为≥2的整数；依次收集的第一级第一次提取液，作为第一级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第一级第二次提取液，作为第二级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第一级第M次提取液，作为第二级第(M‑1)次提取溶剂，备用；⑶、二级提取：按照提取容剂3‑5BV/h的流加速度，将第二级第一次提取溶剂、……、第二级第(M‑1)次提取溶剂、玉竹粉重量数值(g)3‑5倍的体积数值(ml)的第二级第M次提取溶剂依次加入第二级玻璃层析柱中；依次收集的第二级第一次提取液，作为第二级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第二级第二次提取液，作为第三级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第二级第M次提取液，作为第三级第(M‑1)次提取溶剂，备用；……；⑷、N级提取：按照提取容剂3‑5BV/h的流加速度，将第N级第一次提取溶剂、……、第N级第(M‑1)次提取溶剂、玉竹粉重量数值(g)3‑5倍的体积数值(ml)的第N级第M次提取溶剂依次加入第N级玻璃层析柱中；依次收集的第N级第一次提取液，作为第N级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第N级第二次提取液，作为下一个提取循环的第一级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第N级第M次提取液，作为下一个提取循环的第一级第(M‑1)次提取溶剂，备用；将收集的第一级玉竹黄酮提取液、第二级玉竹黄酮提取液、……、第N级玉竹黄酮提取液混合均匀，即得玉竹总黄酮提取液。...
【技术特征摘要】
1.一种玉竹总黄酮的高效循环提取方法，其特征在于提取过程如下：㈠、玉竹原料预处理：⑴、烘干：将用于提取的玉竹原料置于烘箱中，在50-70℃条件下烘干至水分含量≤1％，得干燥玉竹，备用；⑵、粉碎：将备用的干燥玉竹粉碎，过30-50目筛，得玉竹粉，备用；⑶、吸湿：向备用的玉竹粉中加入占其体积0.3-0.7倍的提取溶剂浸泡0.3-0.8h，得吸湿玉竹粉，备用；⑷、浸泡：向备用的吸湿玉竹粉中加入占玉竹粉体积3-5倍的提取溶剂，继续浸泡4-6h，得浸泡玉竹粉，备用；㈡、循环提取：⑴、装柱：将浸泡玉竹粉分别装入N个高径比(H/D)为(8-12):1的玻璃层析柱中，形成N级玻璃层析柱，备用；其中：N为≥2的整数；⑵、一级提取：按照提取溶剂3-5BV/h的流加速度，将提取溶剂分M次加入第一级玻璃层析柱中，每次加入的提取溶剂体积数值(ml)为玉竹粉重量数值(g)的3-5倍；其中：M为≥2的整数；依次收集的第一级第一次提取液，作为第一级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第一级第二次提取液，作为第二级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第一级第M次提取液，作为第二级第(M-1)次提取溶剂，备用；⑶、二级提取：按照提取容剂3-5BV/h的流加速度，将第二级第一次提取溶剂、……、第二级第(M-1)次提取溶剂、玉竹粉重量数值(g)3-5倍的体积数值(ml)的第二级第M次提取溶剂依次加入第二级玻璃层析柱中；依次收集的第二级第一次提取液，作为第二级玉竹黄酮提取液，备用；依次收集的第二级第二次提取液，作为第三级第一次提取溶剂，备用；……；依次收集的第二级第M次提取液，作为第三级第(M-1)次提取溶剂，备用；……；⑷、N级提取：按照提取容剂3-5BV/h的流加速度，将第N级第一次提取溶剂、……、第N级第(M-1)次提取溶剂、...
【专利技术属性】
技术研发人员：沈玉平，张祖姣，黄光文，胡克坚，
申请(专利权)人：湖南科技学院，沈玉平，
类型：发明
国别省市：湖南;43
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