一种萱草种质脱毒复壮方法技术

本发明专利技术提供了一种萱草种质脱毒复壮方法，该种质脱毒复壮方法详细步骤包括：（1）选材待接种萱草花蕾；（2）配制萱草花药诱导培养基；（3）花药消毒与接种；（4）花药诱导培养；（5）花药愈伤组织分化与生根培养；（6）萱草幼苗的炼苗与移栽；（7）非二倍体萱草植株的剔除。本发明专利技术的萱草种质脱毒复壮方法通过萱草花药培养途径获得了萱草花粉植株，进而剔除花培群体中的非二倍体萱草杂株获得萱草二倍体植株，该种质脱毒复壮方法脱毒效果显著，可以将萱草种质复壮，极大提高萱草的品质和产量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及园林科学领域，尤其涉及一种通过花药培养途径高效脱除萱草病毒从而大大提升萱草种质的品质和产量的萱草种质脱毒复壮方法。
技术介绍
萱草（Hemerocallis fulva）是百合科、萱草属的多年生宿根草本，别名萱花菜、忘忧草、宜男草等，原产中国，被称为中国的“母亲花”。萱草品种繁多，花色鲜艳，花型优美，广为人民所喜爱。《本草纲目》曰：“萱草本作谖。谖，忘也。”古人以为萱草可以使人忘忧，故谓之忘忧草。《风土记》中记载：“‘妊妇佩其草则生男’，故称为宜男”。我国的萱草种植历史久远、种质资源丰富，自古以来被人们视为传统的名花、名菜，亦为名药。有关萱草的一句俗语称其“观为花、食为菜、用为药”。可见萱草其身价值颇多、功用颇广。萱草生长强健，适应性强，喜湿润也耐旱，喜阳光又耐半荫，被广泛应用于园林中的花丛、花境、地被、花坛等配植。近年来，随着生态节约型绿化理念的推广，宿根花卉在园林绿化中广泛应用，人们对萱草新品种的需求也越来越大，我国萱草的生产面积逐年增大，因此萱草栽培有着广泛的应用前景和很高的经济价值。目前，商业上萱草主要采用茎芽扦插繁殖法、分株繁殖法、组织培养法等无性繁殖为主，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种萱草种质脱毒复壮方法，其特征在于：该种质脱毒复壮方法的详细步骤如下：（1）选材待接种萱草花蕾在萱草正常现蕾开花季节，选择大部分花药处于单核晚期的花蕾，用冰壶带回实验室，用湿润的纱布包裹后置于4℃冰箱中低温预处理3‑5d；（2）配制萱草花药诱导培养基萱草花药诱导培养基按每升蒸馏水中由以下物质配制而成：大量元素：KNO3 2500～2700mg/L，NH4NO3 1600～1800mg/L，KH2PO4 440～480mg/L，MgSO4∙7H2O 350～390mg/L，CaCl2∙2H2O 820～860mg/L；微量元素：MnSO4∙4H2O 20～25mg/L，ZnSO4∙7H2O 8...

【技术特征摘要】
1.一种萱草种质脱毒复壮方法，其特征在于：该种质脱毒复壮方法的详细步骤如下：（1）选材待接种萱草花蕾在萱草正常现蕾开花季节，选择大部分花药处于单核晚期的花蕾，用冰壶带回实验室，用湿润的纱布包裹后置于4℃冰箱中低温预处理3-5d；（2）配制萱草花药诱导培养基萱草花药诱导培养基按每升蒸馏水中由以下物质配制而成：大量元素：KNO3 2500～2700mg/L，NH4NO3 1600～1800mg/L，KH2PO4 440～480mg/L，MgSO4∙7H2O 350～390mg/L，CaCl2∙2H2O 820～860mg/L；微量元素：MnSO4∙4H2O 20～25mg/L，ZnSO4∙7H2O 8.0～9.0mg/L，H3BO3 6.0～6.5mg/L，KI 0.8～0.85mg/L，CuSO4∙5H2O 0.02～0.03mg/L，CoCl∙6H2O 0.02～0.03mg/L，NaMoO4∙2H2O 0.2～0.3mg/L；铁盐：Na2-EDTA∙2H2O 35～40mg/L，FeSO4∙7H2O 25～30mg/L；有机成分：肌醇 90～110mg/L，维生素B1 0.09～0.11mg/L，维生素B6 0.45～0.55mg/L，烟酸 0.45～0.55mg/L，甘氨酸 1.8～2.2mg/L，丝氨酸 0.75～0.85mg/L，谷氨酞胺 0.75～0.85mg/L；激素：2，4-D 3.2～3.6mg/L，KT 2.0～2.4mg/L；凝固剂：植物凝胶 6.0～6.5g/L；活性添加剂：椰乳14～16g/L，甘露醇20～24g/L，水解蛋白 0.8～1.0g/L，活性炭 0.35～0.45g/L；碳源：蔗糖27～33g/L，麦芽糖13～17g/L；将大量元素、微量元素、铁盐、有机成分和激素分别配制成一定浓度倍数的母液贮备，配制时，预先量出配制培养基总量一半体积的蒸馏水，分别加入一定体积或质量的大量元素、微量元素、铁盐、有机成分、活性添加剂，定容，加热至60-80℃，然后加入碳源、凝固剂和激素，搅拌至沸腾后，培养基完全融解，停止加热，调节pH为5.8-6.0，然后将培养基分装于500ml的三角瓶中，每瓶盛120ml～150ml的培养基，密封后置于温度为121℃、压力为15kPa高压蒸汽条件下灭菌20min，自然冷却凝固；（3）花药消毒与接种萱草花蕾低温预处理后，将花蕾用自来水冲洗10～20min，在超净工作台无菌条件下，先用75%酒精消毒2min，再用0.1%升汞+2-3滴吐温-80消毒15min，无菌水冲洗3～4次后，从花蕾中取出带有花丝的花药，接种到步骤（2）的萱草花药诱导培养基上；（4）花药诱导培养将接种花药后的培养基进行花药诱导培养，45-60d后诱导出萱草花药愈伤组织；（5）花药愈伤组织分化与生根培养无菌条件下将诱导成功的萱草花药愈伤组织...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋晓燕，张瑞明，潭江，
申请(专利权)人：连云港秀景园林绿化工程有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32