本发明专利技术公开了SFI1基因或SFI1蛋白可以作为诊断冠心病的工具。通过检测受试者血液中的SFI1基因或SFI1蛋白的表达水平即可判断受试者是否患有冠心病。另外，SFI1基因或SFI1蛋白还可以作为预测冠心病患者预后的工具，通过检测受试者血液中的SFI1基因或SFI1蛋白的表达水平即可判断冠心病患者的预后情况。本发明专利技术的研究成果为临床上提供了一种新的冠心病的诊断方法和预测预后的方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及冠心病诊断、预测预后领域，更具体地，本专利技术涉及以检测SFI1异常为手段的冠心病诊断、预测预后方法。
技术介绍
动脉粥样硬化性心脑血管病已成为世界范围关注的主要健康问题。2004年的世界卫生组织(WHO)报告显示，全世界每年心血管疾病以冠心病和脑卒中为主导致的死亡人数达高达1720万，占所有死亡人数的三分之一。预计2020年这一数字将进一步增加50％，高达2500万，心血管疾病是全球人类的“头号杀手”。在中国进行的一项大规模前瞻性研究也显示，心脏疾病已经成为中国人群的主要死亡原因，分列男、女性死亡原因的第2位和第1位。我国每年新发心肌梗死50万人，随着生活方式的改变以及动脉粥样硬化相关的危险因素持续增加，冠心病与心肌梗死发病也还将呈持续上升趋势。大量的研究资料表明，冠心病是一种复杂疾病，是由多个微效基因与环境因素长期相互作用所致。因此鉴定出与冠心病相关的易感基因或致病基因，在人群中进一步筛选增加疾病风险的易感基因确定易感个体，将有助于冠心病的发病风险预测、新药开发、诊断和个体化治疗。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种通过检测SFI1基因或蛋白表达差异来诊断冠心病的方法。本专利技术的目的之二在于提供一种通过检测SFI1基因或蛋白表达差异来预测冠心病预后的方法。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：本专利技术提供了检测SFI1基因或SFI1蛋白的产品在制备冠心病诊断工具中的用途。本专利技术还提供了检测SFI1基因或SFI1蛋白的产品在制备预测冠心病预后工具中的用途。进一步，所述检测SFI1基因或SFI1蛋白的产品包括检测SFI1基因或SFI1蛋白的表达水平的产品。所述产品包括能够结合SFI1基因的核酸或者能够结合SFI1蛋白的物质(例如抗体)。所述核酸能够检测SFI1基因的表达水平；所述物质能够检测SFI1蛋白的表达水平。本专利技术的检测SFI1基因的产品可基于使用核酸分子的已知方法来发挥其功能：如PCR、如Southern杂交、Northern杂交、点杂交、荧光原位杂交(FISH)、DNA微阵列、ASO法、高通量测序平台等。使用该产品可以定性地、定量地、或半定量地实施分析。包含在上述产品中的核酸可以通过化学合成来获得，或通过从生物材料制备含有期望核酸的基因，然后使用设计用于扩增期望核酸的引物扩增它来获得。进一步，所述PCR方法为已知方法，例如，ARMS(Amplification Refractory Mutation System，扩增不应突变系统)法、RT-PCR(逆转录酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。扩增的核酸可以通过使用点印迹杂交法、表面等离子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可扩增片段长度多态性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(单链构象多态性)法来检测。上面所述的核酸包括扩增SFI1基因的引物，产品中包括的引物可以通过通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。在本专利技术的具体实施方案中，所述核酸为QPCR实验中使用的扩增引物，所述引物的序列如SEQ ID NO.1(正向序列)和SEQ ID NO.2(反向序列)所示。上面所述的核酸还可包括探针，所述探针可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来恰当设计，并通过化学合成来制备，
或者可以通过从生物材料制备含有期望核酸序列的基因，并使用设计用于扩增期望核酸序列的引物扩增它来制备。本专利技术的检测SFI1蛋白的产品可基于使用抗体的已知方法来发挥其功能：例如，可以包括ELISA、放射免疫测定法、免疫组织化学法、Western印迹等。本专利技术的检测SFI1蛋白的产品包括特异性结合SFI1蛋白的抗体或其片段。可以使用任何结构、尺寸、免疫球蛋白类别、起源等的抗体或其片段，只要它结合靶蛋白质即可。本专利技术的检测产品中包括的抗体或其片段可以是单克隆的或多克隆的。抗体片段指保留抗体对抗原的结合活性的抗体一部分(部分片段)或含有抗体一部分的肽。抗体片段可以包括F(ab′)2、Fab′、Fab、单链Fv(scFv)、二硫化物键合的Fv(dsFv)或其聚合物、二聚化V区(双抗体)、或含有CDR的肽。本专利技术的检测SFI1蛋白的产品可以包括编码抗体或编码抗体片段的氨基酸序列的分离的核酸，包含该核酸的载体，和携带该载体的细胞。抗体可以通过本领域技术人员公知的方法来获得。例如，制备保留整个或部分靶蛋白质的多肽或整合编码它们的多核苷酸的哺乳动物细胞表达载体作为抗原。使用抗原免疫动物后，从经过免疫的动物获得免疫细胞并融合骨髓瘤细胞以获得杂交瘤。然后从杂交瘤培养物收集抗体。最后可以通过使用被用作抗原的SFI1蛋白或其部分对获得的抗体实施抗原特异性纯化来获得针对SFI1蛋白的单克隆抗体。可以如下制备多克隆抗体：用与上文相同的抗原免疫动物，从经过免疫的动物收集血液样品，从血液中分离出血清，然后使用上述抗原对血清实施抗原特异性纯化。可以通过用酶处理获得的抗体或通过使用获得的抗体的序列信息来获得抗体片段。标记物与抗体或其片段的结合可以通过本领域普遍知道的方法来实施。例如，可以如下荧光标记蛋白质或肽：用磷酸盐缓冲液清洗蛋白质或肽，添加用DMSO、缓冲剂、等准备的染料，然后混合溶液，再于室温放置10分钟。另外，标记可使用商品化的标记试剂盒，诸如生物素标记试剂盒，如生物素标记试剂盒-NH2、生物素标记试剂盒-SH(DojindoLaboratories)；碱性磷酸酶标记试剂盒诸如碱性磷酸酶标记试剂盒-NH2、碱性磷酸酶标记试剂盒-SH(Dojindo Laboratories)；过氧化物酶标记试剂盒诸如过氧化物酶标记试剂盒-NH2、过氧化物酶标记试剂盒-NH2(Dojindo Laboratories)；藻胆蛋白标记试剂盒诸如藻胆蛋白标记试剂盒
-NH2、藻胆蛋白标记试剂盒-SH、B-藻红蛋白标记试剂盒-NH2，B-藻红蛋白标记试剂盒-SH、R-藻红蛋白标记试剂盒-NH2、R-藻红蛋白标记试剂盒SH(DojindoLaboratories)；荧光标记试剂盒诸如荧光素标记试剂盒-NH2、HiLyte Fluor(TM)555标记试剂盒-NH2、HiLyte Fluor(TM)647标记试剂盒-NH2(Dojindo Laboratories)；及DyLight 547和DyLight647(Techno Chemical Corp.)、Zenon(TM)、Alexa Fluor(TM)抗体标记试剂盒、Qdot(TM)抗体标记试剂盒(Invitrogen Corporation)和EZ-标记物蛋白质标记试剂盒(Funakoshi Corporation)。为了正确标记，可以使用适宜的仪器来检测经过标记的抗体或其片段。在本专利技术中，“预后”是指冠心病患者在通过手术处理等抑制或缓解冠心病后的过程或结果。在本说明书中，预后可以是通过手术处理抑制或缓解冠心病后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20年或更久时的生机状态。预后可以通过检查生物标志物即SFI1蛋白或编码SFI1蛋白本文档来自技高网...
【技术保护点】
检测SFI1基因或SFI1蛋白的产品在制备诊断冠心病或预测冠心病预后的工具中的应用。
【技术特征摘要】
1.检测SFI1基因或SFI1蛋白的产品在制备诊断冠心病或预测冠心病预后的工具中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测SFI1基因或SFI1蛋白的产品包括检测SFI1基因或SFI1蛋白的表达水平的产品。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，利用所述产品检测受试者样本中的SFI1基因或SFI1蛋白的表达水平，与正常人相比，受试者样本中的SFI1基因或SFI1蛋白的表达水平降低，则诊断该受试者为冠心病患者或该受试者的预后差。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述受试者样本的来源是血液。5.根据权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于，所述产品包括能够结合SFI1基因的核酸或者能够结合SFI1蛋白的物质；所述核酸能够检测SFI1基因的表达水平；所述物质能够检测SFI1蛋白的表达水...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖武，任静，杨承刚，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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