通过调节微RNAmiR-130a、miR-130b、miR-204或miR-1236治疗肝炎病毒感染制造技术

本发明专利技术涉及用于调节肝炎病毒复制的方法和医药组合物，其涉及miR‑130a RNA、miR‑130b RNA、miR‑204 RNA、miR‑1236 RNA或其组合。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请案依据35U.S.C.§119(e)要求2013年9月20日提出的美国临时专利申请案第61/880,508号的优先权，所述临时专利申请案以全文引用的方式并入本文中。
技术介绍
微RNA(miRNA)在分化和发育中起着重要的调节作用(阿姆博斯,遗传学与发育新见21:511-517(2011)(Ambros,V.Curr Opin Genet Dev 21:511-517(2011)))。细胞微RNA可以正面或负面方式影响病毒复制(斯卡斯基等人,微生物学年评64:123-141(2010)(Skalsky,et al.Annu Rev Microbiol 64:123-141(2010))；乔普林等人,科学309:1577-1581(2005)(Jopling,et al.Science 309:1577-1581(2005)))。迄今，完全根除慢性B型肝炎患者的B型肝炎病毒(HBV)仍然是一项挑战。HBV慢性感染导致肝细胞癌(HCC)的发展。已经报导了许多HCC相关微RNA(刘等人,生物化学与生物物理学报1809:678-685(2011)(Liu,et al.Biochimica et biophysica acta1809:678-685(2011)))；但是，HBV相关微RNA领域仍然有待探索和阐明。亲肝性HBV存在于在葡萄糖和脂质代谢中作用活跃的肝中。已经研究肝富含的转录因子和共活化剂对包括HNF1、HNF4、C/EBPα、PPARα和PGC1α在内的HBV增强子/启动子的作用(奎斯多夫等人,17:527-536(2010)(Quasdorff,et al.17:527-536(2010))；巴-伊萨等人,肝国际31:282-290(2011)(Bar-Yishay,et al.Liver International 31:282-290(2011)))。尤其关注PGC1α，已知其共活化许多搭配物(弗因克等人,临床调查杂志116:615-622(2006)(Finck,et al.The Journal of Clinical Investigation 116:615-622(2006)))。除肝葡糖新生外(尹等人,自然413:131-138(2001)(Yoon,et al.Nature 413:131-138(2001)))，已知PGC1α参与棕色脂肪适应性产热(普索维等人,细胞92:829-839(1998)(Puigserver,et al.Cell92:829-839(1998)))、线粒体生体合成和呼吸(霍腾等人,细胞119:5-7(2004)(Houten,etal.Cell 119:5-7(2004)))和神经变性病(圣-皮尔等人,细胞127:397-408(2006)(St-Pierre,et al.,Cell 127:397-408(2006)))。PGC1α可活化肝细胞中HBV转录和复制(休罗麦等人,
美国国家科学院院刊103:16003-16008(2006)(Shlomai,et al.Proceedings of the NationalAcademy of Sciences of the United States of America 103:16003-16008(2006))；和奥曲克等人,病毒学杂志83:12535-12544(2009)(Ondracek,et al.Journal of Virology 83:12535-12544(2009)))。近来，微RNA已经显现为代谢的一种重要转录后调节因子(罗替尔等人,自然评论：分子细胞生物学13:239-250(2012)(Rottiers,et al.Nat Rev Mol Cell Biol 13:239-250(2012)))。仍然要研究代谢相关的微RNA是否可对肝炎病毒复制起作用，并且肝炎病毒感染是否可经由微RNA对肝代谢起作用。
技术实现思路
本公开是基于四种细胞微RNA，即miR-130a、mir-130b、miR-204和miR-1236展示抗HBV活性的意外发现。更具体来说，miR-1236直接靶向HBV特异性RNA，从而遏制翻译；miR-130a减少HBV RNA转录和DNA复制；并且miR-204通过干扰衣壳装配和前基因组RNA(pgRNA)衣壳化而减少HBV复制。因此，本公开的一个方面涉及一种调节肝炎病毒(例如B型肝炎病毒)复制的方法，其包含使肝细胞与有效量的(a)miR-130a RNA、miR-130b RNA、miR-204RNA、miR-1236RNA或其组合接触的至少一个步骤。肝炎病毒可为B型肝炎病毒(HBV)。在一些实施例中，所述方法包含使肝细胞与有效抑制HBV复制的量的miR-130aRNA、miR-130b RNA、miR-204RNA、miR-1236RNA或其组合接触。在一些实例中，所有四种微RNA分子之组合用于此方法。在一些实施例中，miR-130a RNA、miR-130b RNA、miR-204RNA和/或miR-1236RNA为双螺旋RNA分子或单股RNA分子。在一些实例中，miR-130a RNA、miR-130b RNA或两者可包含AGUGCAA的核苷酸序列(例如对于miR-130a RNA，为CAGUGCAAUGUUAAAAGGGCAU(SEQ IDNO:1))，和/或对于miR-130b RNA，为CAGUGCAAUGAUGAAAGGGCAU(SEQ IDNO:2))；miR-204RNA可包含UUCCCUUUGUCAUCCUAUGCCU(SEQ ID NO:3)的核苷酸序列；和/或miR-1236RNA可包含CCUCUUCCCCUUGUCUCUCCAG(SEQ ID NO:4)的核苷酸序列。在一些实施例中，接触步骤通过向有需要的个体(例如人类个体，例如罹患或怀疑患有HBV感染的人类患者)投与有效量的可为裸露核酸或由质粒编码的miR-130a RNA、miR-130b RNA、miR-204RNA、miR-1236RNA或其组合进行。举例来说，个体可投与
如本文所述的miR-130a RNA、miR-130b RNA、miR-204RNA和miR-1236RNA的组合。在一些实例中，个体投与有效调节PGC1α、PGC1β、PPARγ或其组合的量的miR-130aRNA、miR-130b RNA或其组合。在其它实例中，个体投与有效降低编码HBV的RNA水平的量的miR-1236RNA。在又其它实例中，个体投与有效抑制HBV前基因组RNA衣壳化、衣壳装配或两者的量的miR-204RNA。本文所述之任一微RNA分子可与另一抗HBV药剂共用。以下也在本公开的范围内：(a)用于调节肝炎病毒复制(例如抑制或增强HBV复制)或用于治疗肝炎病毒感染(例如HBV感染)的医药组合物，所述组合物包含医药学上可接受的载剂和一或多种如本文所述的miR-130a RNA、miR-130b RNA、miR-204RNA、miR-1236RNA；以及(b)任一本文所述的医药组合物或微RNA分子的用途，其用于制造供治疗例如HBV感染本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于治疗B型肝炎病毒HBV感染的医药组合物，所述医药组合物包含∶(i)miR‑130a RNA、miR‑130b RNA、miR‑204RNA、miR‑1236RNA或其组合，和(ii)医药学上可接受的载剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.09.20 US 61/880,5081.一种用于治疗B型肝炎病毒HBV感染的医药组合物，所述医药组合物包含∶(i)miR-130a RNA、miR-130b RNA、miR-204RNA、miR-1236RNA或其组合，和(ii)医药学上可接受的载剂。2.根据权利要求1所述使用的医药组合物，其中所述miR-130a RNA、所述miR-130bRNA、所述miR-204RNA、所述miR-1236RNA或其组合的量有效抑制所述HBV复制。3.根据权利要求1或权利要求2所述使用的医药组合物，其中所述miR-130a RNA、所述miR-130b、所述miR-204RNA或所述miR-1236RNA为双螺旋RNA分子或单股RNA分子。4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述使用的医药组合物，其中所述miR-130aRNA、所述miR-130b RNA或两者包含AGUGCAA的核苷酸序列。5.根据权利要求4所述使用的医药组合物，其中所述miR-130a RNA包含CAGUGCAAUGUUAAAAGGGCAU的核苷酸序列(SEQ ID NO:l)。6.根据权利要求4所述使用的医药组合物，其中所述miR-130b RNA包含CAGUGCAAUGAUGAAAGGGCAU的核苷酸序列(SEQ ID NO:2)。7.根据权利要求1至6中任一权利要求所述使用的医药组合物，其中所述miR-204RNA包含UUCCCUUUGUCAUCCUAUGCCU的核苷酸序列(SEQ ID NO:3)。8.根据权利要求1至7中任一权利要求所述使用的医药组合物，其中所述miR-1236RNA包含CCUCUUCCCCUUGUCUCUCCAG的核苷酸序列(SEQ ID NO:4)。9.根据权利要求1至8中任一权利要求所述使用的医药组合物，其中所述医药组合物包含有效降低编码HBV的RNA的水平的量的所述miR-1236RNA。10.根据权利要求1至9中任一权利要求所述使用的医药组合物，其中所述医药组合物包含有效抑制HBV前基因组RNA衣壳化、衣壳装配或两者的量的所述miR-204RNA。11.根据权利要求1至10中任一权利要求所述使用的医药组合物，其中所述医药组合物包含有效降低PGC1α、PGC1β或PPARγ的量的所述miR-130a RNA或所述miR-130b RNA。12.根据权利要求1至11中任一权利要求所述使用的医药组合物，其中所述医药进一步包含另一抗HBV剂。13.一种用于调节B型肝炎病毒HBV复制的方法，所述方法包含：使肝细胞与有效量的miR-130a RNA、miR-130b RNA、miR-204RN...

【专利技术属性】
技术研发人员：施嘉和，黄钧源，
申请(专利权)人：中央研究院，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71