颈康胶囊的质量控制方法技术

本发明专利技术公开了颈康胶囊的质量控制方法，是一种通过控制颈康胶囊中活性成分进而控制成药质量的分析方法。本发明专利技术提供的化合物(Ⅰ)为首次报道，具有促进颈椎病康复作用，可能是颈康胶囊发挥治疗作用的物质基础之一。该化合物可以从钩藤的带钩茎枝中分离得到，且分离制备方法得率高，可以进行大规模制备。本发明专利技术提供的液相分析方法可以将颈康胶囊中的化合物(Ⅰ)与其他化合物分开，达到基线分离(分离度＞2.0)，化合物(Ⅰ)峰纯度检测合格。本发明专利技术提供的化合物(Ⅰ)在颈康胶囊的质量控制过程中可以作为化学对照品用于化合物(Ⅰ)的定性或定量分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物
，涉及药物制剂质量分析，具体涉及颈康胶囊的质量控制方法。
技术介绍
颈康胶囊由熟地黄、何首乌、杜仲、鹿衔草、骨碎补(烫)、钩藤、葛根、三七、莱菔子(炒)9味中药精制而成，具有补肾、活血、止痛的功效，用于肾虚血瘀所致的颈椎病。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种从颈康胶囊中分离得到的新化合物；本专利技术的第二目的在于提供上述新化合物的制备方法；本专利技术的第三目的在于提供一种基于上述新化合物的液相分析方法，用于控制颈康胶囊的质量，提高颈康胶囊的质量控制水平；本专利技术的第四目的在于提供上述新化合物在颈康胶囊质量控制中用作对照品的用途。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：一种具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制备方法包括如下操作步骤：步骤S1，将钩藤的带钩茎枝粉碎，用65～75％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；步骤S2，将步骤S1中正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用8～12％乙醇洗脱6～10个柱体积，再用60～70％乙醇洗脱10～14个柱体积，收集60～70％乙醇洗脱液，减压浓缩得60～70％乙醇洗脱浓缩物；步骤S3，将步骤S2中60～70％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；步骤S4，将步骤S3中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为30:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；步骤S5，将步骤S4中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为60～70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～12个柱体积洗脱液，减压浓缩得到化合物(Ⅰ)。进一步地，步骤S1中用70％乙醇热回流提取。进一步地，步骤S2中所述大孔树脂为D101型大孔吸附树脂。进一步地，步骤S2中，先用10％乙醇洗脱8个柱体积。更进一步地，步骤S2中，再用65％乙醇洗脱12个柱体积，收集65％乙醇洗脱液，减压浓缩得65％乙醇洗脱浓缩物。进一步地，步骤S5中用体积百分浓度为65％的甲醇水溶液等度洗脱。上述化合物(Ⅰ)在颈康胶囊质量控制方法中用作化学对照品的用途。所述颈康胶囊质量控制方法为高效液相色谱法，参数如下：色谱柱：C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：A为乙腈，B为0.1％甲酸溶液(三乙胺调节pH值至6.0)；梯度洗脱程序：0～5min，A35％；5～10min，A35％→70％；10～15min，A70％→35％；15～20min，A35％；流动相流速：1.0mL·min-1；检测波长：255nm；柱温：30℃；进样量10μL。进一步地，所述的C18柱为WatersXBridgeC18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)。本专利技术的优点：1、本专利技术提供的化合物(Ⅰ)为首次报道，具有促进颈椎病康复作用，可能是颈康胶囊发挥治疗作用的物质基础之一；2、化合物(Ⅰ)可以从钩藤的带钩茎枝中分离得到，本专利技术提供的制备方法得率高，可以进行大规模制备；3、本专利技术提供的液相分析方法可以将颈康胶囊中的化合物(Ⅰ)与其他化合物分开，达到基线分离(分离度＞2.0)，化合物(Ⅰ)峰纯度检测合格；4、本专利技术制备的化合物(Ⅰ)纯度高，在颈康胶囊的质量控制过程中可以用于化合物(Ⅰ)的定性或定量。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和保护范围。实施例1：化合物(Ⅰ)的制备和结构确证分离制备方法：步骤S1，将2kg钩藤的带钩茎枝粉碎，用70％乙醇热回流提取(10L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；步骤S2，将步骤S1中正丁醇萃取物用D101型大孔树脂富集，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用65％乙醇洗脱12个柱体积，收集65％乙醇洗脱液，减压浓缩得65％乙醇洗脱浓缩物；步骤S3，将步骤S2中65％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(5个柱体积)、40:1(6个柱体积)、20:1(8个柱体积)和10:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；步骤S4，将步骤S3中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为30:1(5个柱体积)、20:1(5个柱体积)和10:1(4个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；步骤S5，将步骤S4中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为65％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～12个柱体积洗脱液，减压浓缩得到化合物(Ⅰ)(585mg，HPLC归一化纯度大于98％)。结构确证：淡黄色粉末，HRAPCIMS显示[M+H]+为m/z241.0822，结合核磁特征可得分子式为C15H12O3，不饱和度为10。核磁共振氢谱数据δH(ppm，CDCl3，500MHz)：H-1(7.62，d，J＝8.5Hz)，H-2(7.28，dd，J＝8.5，7.9Hz)，H-3(6.98，d，J＝7.9Hz)，H-8(8.12，s)，H-12(7.71，s)，H-13(4.87，d，J＝4.8Hz，2H)，H-14(9.98，s)，H-15(2.94，s)，13-OH(1.76，t，J＝5.0Hz)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，CDCl3，125MHz)：127.2(CH，1-C)，118.5(CH，2-C)，127.9(CH，3-C)，135.4(C，4-C)，112.5(C，5-C)，156.8(C，6-C)，128.6(C，7-C)，130.3(CH，8-C)，126.2(C，9-C)，120.8(C，10-C)，121.9(C，11-C)，142.7(CH，12-C)，55.9(CH2，13-C)，194.2(CH，14-C)，17.2(CH3，15-C)。红外波谱表明该化合物含有羟基(3382cm-1)，羰基(1715cm-1)，烯烃(1655cm-1)和芳香环(1612cm-1，1574m-1，1462cm-1)基团。13C-NMR、DEPT和HSQC谱中显示有15个碳信号，包括一个甲基δC17.2，一个连氧亚甲基δC55.9本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

【技术特征摘要】
1.一种具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，
2.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于，包括如下操作步骤：
步骤S1，将钩藤的带钩茎枝粉碎，用65～75％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无
醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯
萃取物和正丁醇萃取物；
步骤S2，将步骤S1中正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用8～12％乙醇洗脱6～10个柱
体积，再用60～70％乙醇洗脱10～14个柱体积，收集60～70％乙醇洗脱液，减压浓缩得60～
70％乙醇洗脱浓缩物；
步骤S3，将步骤S2中60～70％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、
40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；
步骤S4，将步骤S3中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为30:1、20:1和10:1
的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；
步骤S5，将步骤S4中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为60
～70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～12个柱体积洗脱液，减压浓缩得到化合物(Ⅰ)。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤S1中用70％乙醇热回流提取。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：武爱玲，丁震，孙实，赵新杰，江海肖，刘运涛，
申请(专利权)人：河南省洛正制药厂，
类型：发明
国别省市：河南;41