一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的用途。本发明专利技术以鲨鱼鱼肉为原料，通过超声提取鲨鱼鱼肉醇溶蛋白、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶酶解，利用的超滤分级、活性炭吸附纯化和大孔树脂精制得鲨鱼鱼肉高F值寡肽，该F值为35.2～39.6，分子量为630～720 Da；该高F值寡肽具有显著的抗疲劳效果，可以作为抗疲劳功能食品或保健食品进行开发。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程技术的应用用途，具体涉及一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的用途。
技术介绍
高F值寡肽混合物是一个由由3～7个氨基酸残氨基酸残基所组成的混合小肽（或称寡肽）体系。F值（Fischerratio）是指支链氨基酸（BCAA：Val，Ile，Leu）与芳香族氨基酸（AAA：Trp，Tyr，Phe）含量的摩尔数比值。正常人的血液中F值为3.0-3.5，而患有肝脏疾病病人的F值只有1.0或者更低，而高F值寡肽的F值应大于20，远高于人体中这两类氨基酸的比值。由于它具有独特的氨基酸组成和生理功能，已经受到食品和医药界的高度关注。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽在抗疲劳方面的用途。本专利技术为解决上述技术问题所采取的技术方案为：一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的用途，其特征在于该高F值寡肽安全、无毒副作用、具有显著的抗疲劳活性，对老年人、体弱多病者和术后病人具有良好的保健作用，可用于制备抗疲劳功能食品或保健食品。该鲨鱼鱼肉高F值寡肽的制备方法为：1）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的制备：取鲨鱼鱼肉按1g:15mL～1g:20mL固液比加入90%～95%的乙醇溶液，用高速组织捣碎机将其制成匀浆，在25～30℃、功率650～700W超声提取150min~180min；将提取液的pH值用1mol/LNaOH调至9.5～10.0，用蒸馏水将乙醇浓度调至55%～65%，室温静置45min～60min，于8000～10000rpm离心10min～15min；取上清液，并加入NaCl至浓度为5%～8%，静置8h～10h后，于8000～10000rpm离心10～15min，收集沉淀，冻干，即得鲨鱼鱼肉醇溶蛋白。2）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的酶解：取鲨鱼鱼肉醇溶蛋白，按固液比1g:5mL～1g:10mL，加入甘氨酸—氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L，pH9.5），用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH调节pH到9.0～1.0，得混合液；将混合物温度调制55～65℃，按照醇溶蛋白质量的0.5%～1.0%加入碱性蛋白酶（酶活力1.95×105），酶解时间3h～4h后，酶解液于90～95℃保温10～15min，灭酶活；将酶解液温度调至50～60℃，按照醇溶蛋白质量的0.6%～0.8%加入木瓜蛋白酶，酶解时间4h～5h，酶解液降至室温，于8000～10000rpm离心10～15min，取上清液。3）鲨鱼鱼肉高F值寡肽的酶解：将上述上清液依次经超滤、活性碳吸附纯化和大孔树脂精制，得鲨鱼鱼肉高F值寡肽。作为优选，所述的步骤1）中的鲨鱼为灰星鲨（Mustelusgriseus）。作为优选，所述步骤3）的超滤、活性碳吸附纯化和大孔树脂精制的具体过程为：超滤：将上述酶解上清液于0.1～0.15MPa的工作压力和20～30℃的工作温度下采用采用3kDa超滤膜进行超滤处理，收集分子量小于3kDa部分，得超滤酶解液；活性碳吸附纯化制：将超滤酶解液调pH值至2.5~3.5，按照物料与活性炭颗粒比为10～15:1将超滤酶解液以0.3～0.5mL/min流速缓慢加入到活性炭颗粒装载于玻璃柱中，上样完成后，采用2～3柱体积的1：1比例的1mol/L氨水和无水乙醇混合溶液洗脱色谱柱，收集洗脱液，干燥，得活性肽精制多肽大孔树脂精制：将活性碳精制多肽配成10～20mg/mL的溶液，调pH值至6.5～7.5，缓慢加入到物料与AB-8大孔树脂比为10～15:1的玻璃柱中，用2～3倍柱体积的双蒸水洗脱除去杂质，再用2～3柱体积的95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱物，喷雾干燥，即为鲨鱼鱼肉高F值寡肽。经测定，所得鲨鱼鱼肉高F值寡肽的蛋白含量为95.1～96.4%，氨基酸总量为83.7～85.4%，支链氨基酸的含量为16.8～17.1%，芳香族氨基酸的含量为0.43～0.48%，F值为35.2～39.6，分子量为630～720Da，支链氨基酸中Val：Ile：Leu为1：1～1.5：3～4，芳香族氨基酸中Trp：Tyr：Phe为1：1～1.2：1～1.5。与现有技术相比，本专利技术提供的一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的优点在于：本专利技术工艺科学合理，操作简单，选用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶作为酶解用酶，酶解过程易监控；利用的超滤分级、活性炭吸附纯化和大孔树脂精制方法简单，易于产业化应用；同时，本专利技术所制备的鲨鱼鱼肉高F值寡肽是鲨鱼鱼肉经酶水解制得，安全、无毒副作用，并且抗疲劳显著，对老年人、体弱多病者和术后病人具有良好的保健作用，鲨鱼鱼肉高F值寡肽可以作为抗疲劳功能食品进行开发。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述。实施例：一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽及其制备方法和用途，制备工艺流程如下：鲨鱼鱼肉→超声提取醇溶蛋白→碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解→超滤→活性肽吸附纯化→大孔树脂精制→鲨鱼鱼肉高F值寡肽。1）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的制备：取灰星鲨鲨鱼鱼肉按1g:18mL固液比加入95%的乙醇溶液，用高速组织捣碎机将其制成匀浆，在30℃、功率680W超声提取150min；将提取液的pH值用1mol/LNaOH调至9.5，用蒸馏水将乙醇浓度调至60%，室温静置50min，于9000rpm离心12min；取上清液，并加入NaCl至浓度为6%，静置9h后，于9000rpm离心15min，收集沉淀，冻干，即得鲨鱼鱼肉醇溶蛋白。2）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的酶解：取鲨鱼鱼肉醇溶蛋白，按固液比1g:8mL，加入甘氨酸—氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L，pH9.5），用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH调节pH到9.5，得混合液；将混合物温度调制60℃，按照醇溶蛋白质量的0.6%加入碱性蛋白酶（酶活力1.95×105），酶解时间3h后，酶解液于95℃保温15min，灭酶活；将酶解液温度调至55℃，按照醇溶蛋白质量的0.8%加入木瓜蛋白酶，酶解时间4h，酶解液降至室温，于9000rpm离心12min，取上清液。3）鲨鱼鱼肉高F值寡肽的酶解：将上述上清液依次经超滤、活性碳吸附纯化和大孔树脂精制，得鲨鱼鱼肉高F值寡肽。具体过程为：①超滤：将上述酶解上清液于0.2MPa的工作压力和25℃的工作温度下采用采用3kDa超滤膜进行超滤处理，收集分子量小于3kDa部分，得超滤酶解液；②活性碳吸附纯化制：将超滤酶解液调pH值至2.8，按照物料与活性炭颗粒比为12:1将超滤酶解液以0.4mL/min流速缓慢加入到活性炭颗粒装载于玻璃柱中，上样完成后，采用3柱体积的1：1比例的1mol/L氨水和无水乙醇混合溶液洗脱色谱柱，收集洗脱液，干燥，得活性肽精制多肽③大孔树脂精制：将活性碳精制多肽配成15mg/mL的溶液，调pH值至7.0，缓慢加入到物料与AB-8大孔树脂比为15:1的玻璃柱中，用2倍柱体积的双蒸水洗脱除去杂质，再用3柱体积的95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱物，喷雾干燥，即为鲨鱼鱼肉高F值寡肽。经测定，所得鲨鱼鱼肉高F值寡肽的蛋白含量为96.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的用途，其特征在于：该高F值寡肽安全、无毒副作用、具有显著的抗疲劳活性，对老年人、体弱多病者和术后病人具有良好的保健作用，可用于制备抗疲劳功能食品或保健食品。

【技术特征摘要】
1.一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽的用途，其特征在于：该高F值寡肽安全、无毒副作用、具有显著的抗疲劳活性，对老年人、体弱多病者和术后病人具有良好的保健作用，可用于制备抗疲劳功能食品或保健食品。
2.根据权利要求1所述的一种鲨鱼鱼肉F值寡肽的用途，其特征在于：该高F值寡肽的蛋白含量为95.1～96.4%，氨基...

【专利技术属性】
技术研发人员：王斌，赵玉勤，孙坤来，
申请(专利权)人：浙江海洋学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33