乌拉尔甘草、光果甘草、胀果甘草及其杂交品种的快速分子鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种乌拉尔甘草、胀果甘草、光果甘草及其杂交品种的快速鉴定方法，包括如下步骤：1）提取样品DNA；2）用甘草ITS特异性引物扩增样品ITS序列；3）确定ITS序列5’端起第159位和第383-385位的碱基：如果159位为C，383-385位为TGC，则鉴定为乌拉尔甘草；如果159位为C和T共存，383-385位为TGC和CAA共存，则鉴定为杂交品种；如果159位为T，383-385位为CAA，则进行步骤4）；4）PCR扩增样品的ndhC-trnV转录间隔区序列；5）确定ndhC-trnV转录间隔区序列5’端起第487位的碱基：如果487位为A，则鉴定为光果甘草；如果487位碱基为T，则鉴定为胀果甘草。本发明专利技术能够对甘草的原植物、药材、种子和种苗等进行准确鉴定，有效解决甘草的品种鉴定、育种栽培以及种质资源开发利用等问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药材品种鉴定
，具体设及用特异的单核巧酸多态性 (single nucleotide polymorphism,SNP)位点对乌拉尔甘草、胀果甘草、光果甘草W及乌 拉尔甘草与胀果甘草或光果甘草杂交后产生的样本进行准确鉴定和区分。
技术介绍
甘草作为最广泛使用的药用植物之一，在中国、美国、英国、欧洲、日本药典中均有 收载。2015版《中国药典》同时收载乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、光果甘 草(G. glabra L.)、胀果甘草(G. inflata Bat.)的干燥根和根茎作为甘草药材的来源，我 国主产品种为乌拉尔甘草。但不同品种的甘草在不同国家和地区的分布具有差异，例如，在 美国和欧洲部分地区，光果甘草是最主要的药用品种。 甘草的传统形态学鉴定方法主要依赖于植物的地上部分特征，难W对甘草药材、 饮片W及各种加工品进行品种鉴定。显微鉴定方面，药材横切面的射线形态虽可作为甘草 品种区分的依据之一，但存在样品前处理困难、判别标准难W量化等问题，也无法对深加工 的药材饮片或粉末进行鉴定。化学成分方面，甘草的成分十本文档来自技高网...

【技术保护点】
乌拉尔甘草、胀果甘草和光果甘草的鉴定用SNP（single nucleotide polymorphism，单核苷酸多态性）位点，其所在的核苷酸序列如SEQ ID No.1/2（ITS序列）和SEQ ID No.3/4（ndhC‑trnV转录间隔区序列）所示，其特征在于：自SEQ ID No.1/2的5’端起第159位为C（No.1）或T（No.2），第383‑385位为TGC（No.1）或CAA（No.2）；自SEQ ID No.3/4的5’端起第487位为A（No.3）或T（No.4）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：叶敏，宋玮，冯金，季帅，乔雪，王瑛，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京;11