HSV1-H129-BAC及其变体的构建方法与应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体而言，涉及HSV1-H129-BAC及其变体，该病毒及其突变体带有细菌人工染色体BAC，能在特定的细菌内保持低拷贝的自我复制，解决了因疱疹病毒基因组过大而不能长时间保存、不能自我复制、不方便进行分子生物学突变改造的缺点。且该病毒及其突变体还带有GFP报告基因，大大拓展了疱疹病毒作为工具病毒的应用前景。本发明专利技术还提供了H129-BAC及其变体的构建方法，通过该方法可使对H129进行改造获得H129-BAC，并赋予H129-BAC更多的变体种类；构建方法和H129及其变体组成了一个遗传改造平台,具有更多的应用可能。

【技术实现步骤摘要】

[00011本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及HSV1-H129-BAC及其变体的构建方法与 应用。
技术介绍
单纯疱疼病毒(Human Herpesvirus，HSV)属于α疱疼病毒亚科，该型病毒共分为两 种类型，I型单纯疱疹病毒和Π 型单纯疱疹病毒，即HSV1和HSV2ASV1和HSV2都是DNA病毒， 其中HSV1基因组全长为152kb，共编码超过80种不同的病毒蛋白，病毒质粒大小约180nm。 HSV1对动物感染宿主范围较广。常用实验动物为家兔、豚鼠及小鼠等。HSV1可以在多种细胞 中增殖，常用非洲绿猴肾细胞(Vero细胞）、人胚肾细胞以及地鼠肾细胞等传代细胞培养分 呙病毒。 HSV1-H129是一个典型的顺行标记神经环路的工具病毒，其具有严格顺向跨突触 的特性，适合标记多级神经输出环路的结构；其可携带多种标示物，跨突触后可复制，信号 不衰减，这种未改造的原始株可被直接用于中枢及外周感觉神经环路的研究。在灵长类动 物的大脑中，HSV1-H129也具有同样的顺向跨突触特性，使其成为极具潜力的示踪工具。然 而，在顺行标记神经环路的应用中，对HSV1-H129的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Ⅰ型单纯疱疹病毒感染性克隆H129‑BAC，其特征在于，所述感染性克隆H129‑BAC通过在H129的第46616与46617位碱基之间插入BAC序列得到；所述BAC序列为pUS‑F5质粒使用HindIII酶切所得，所述pUS‑F5质粒序列为SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：罗敏华，曾文波，江海飞，赵非，谌章舟，徐富强，
申请(专利权)人：中国科学院武汉病毒研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42