本发明专利技术提供尤其是在用于评价肾损伤时具有提高的临床性能的TIMP2免疫测定。所述免疫测定依赖于当用于复杂的临床样本诸如生物流体时，且尤其是用于快速测定模式诸如侧流测试装置时展现出提高的测定性能的抗体和抗体对的选择和使用。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】用于生物样品中的具有提高的性能的ΤIMP2测定 本申请要求2013年8月7日提交的美国临时专利申请61/863,073的优先权，所述申 请整体并入本文，包括所有表格、附图和权利要求。 专利技术背景 W下专利技术背景论述仅提供来帮助读者理解本专利技术，并且并非承认描述或构成本发 明的现有技术。 金属蛋白酶抑制剂2(Swiss-Prot P16035，又称为"金属蛋白酶组织抑制剂2"和 "TIMP2")是与金属蛋白酶复合并且通过结合至其催化锋辅助因子而使其不可逆地失活的 分泌蛋白。T IMP 2 已知会对 MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-13、MMP-14、匪P-15、匪P-16W及MMP-19起作用。TIMP2据报道会压制内皮细胞的增殖。因此，已表明 编码蛋白会通过W下方式对组织动态平衡的维持产生一定的作用：响应于血管生成因子而 压制静态组织的增殖，并且抑制经受重建的组织的蛋白酶活性。 此外，W02010/048346和W02011/075744(各自W引用的方式整体并入本文，包括所 有表格、附图和权利要求)描述了将TIMP2单独地且W多标志物组方式用于评价受试者的肾 状况。具体而言，通过免疫测定测量的TIMP2水平显示与肾状况的风险分级、诊断、分期、预 后、分类W及监控相关。 从特异性结合测定诸如免疫测定获得的信号是一种或多种结合物质（例如，抗体） 与祀生物分子（即，分析物)和含有抗体所结合的必要表位的多肤之间形成复合物的直接结 果。免疫测定往往能够"检测"分析物;但由于抗体表位大约是8个氨基酸，所W被配置来检 测相关标志物的免疫测定还将检测与标志物序列相关的多肤，只要那些多肤含有结合至测 定中所使用的一个或多个抗体所需的表位即可。虽然运类测定可W检测全长生物标志物并 且将测定结果表述为相关生物标志物的浓度，但是来自测定的信号实际上是源于样品中存 在的所有运类"免疫反应性"多肤。运类结合测定还可W检测生物样品中存在的与另外的物 质诸如结合蛋白质、受体、肝素、脂质、糖等复合的免疫反应性多肤，前提是那些另外的物质 不干扰结合物质与祀生物分子之间的结合。然而，通常，特异性结合测定是使用纯化分析物 来配制，而不考虑复杂的形成和断裂模式。运在运类另外的结合物质的身份未知的情况下 尤其如此。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供尤其是在用于评价肾损伤时具有提高的临床性能的TIMP2免 疫测定。确切地说，我们描述了当用于复杂的临床样本诸如生物流体时，且尤其是用于快速 测定模式时展现出提高的测定性能的抗体和抗体对的选择和使用。[000引在第一方面，本专利技术设及一种或多种特异地结合人TIMP-2的分离的单克隆抗体， 其中每一种分离的单克隆抗体W至少i08m-i的亲和力结合至多肤，所述多肤的序列由选自 由W下组成的组的序列组成： QAFCNADWIRAKAVS邸EVD(SEQ ID N0:1)、 lYGNPIKRIQYEIKQI(沈Q ID N0:2)、 YEIKQIKMFKGP邸DIEFIYTAPSSAVCGVSLDVGGKKEYLIAGKAEGDG(SEQ ID N0:3)、 YEIKQIKMFKGP邸DIEFIYTAPSSAV(SEQ ID NO:4)、 EFIYTAPSSAVCGVS(SEQ ID N0:5)、 TAPSSAVCGVSLDVGGKKEYLIAGKA(SEQ ID N0:6)、 SLDVGGKKEYLIAGKAEGDGK(SEQ ID N0:7)、 SSPDE化WMDWVT邸NING册（SEQ ID N0:8)W及 CAWYRGAAPPKQEFLDIEDP(SEQ ID N0:9)〇 用于要求保护的方法的抗体可W获自多种物种。例如，本专利技术的抗体可W包含免 疫球蛋白序列，所述免疫球蛋白序列是兔、小鼠、大鼠、豚鼠、鸡、山羊、绵羊、驴、人、美洲驼 或骆驼科动物序列、或运类序列的组合(所谓的嵌合抗体）。运类抗体也可W是单克隆的或 多克隆的。用于本专利技术的抗体可W通过其在免疫测定中的性能来鉴别，并且之后进一步通 过表位定位来表征W便理解与所述性能有关的表位。 表位通常由分子的化学活性表面基团（诸如氨基酸或糖侧链)组成，并且通常具有 特定Ξ维结构特征，W及特定电荷特征。构型性W及非构型性表位差别在于:在变性溶剂存 在下，对构型性表位的结合丧失，而不是非构型性表位。优选地，表位选自SEQ ID N0:l-9当 中，所述表位各自是获自人TIMP2序列的序列。用于本专利技术的优选的抗体特异地结合至运些 肤中的一个或多个。 运类单克隆抗体可W缀合至信号发生成分（signal development element)或固 定在固体支持物上。此外，运类抗体可W用于许多竞争测定和夹屯、测定模式。 通过举例，在竞争模式中，运些优选抗体中的一种或多种可W缀合至信号发生成 分W提供可检测标记抗体。生物样品中的TIMP2可W与固定在测试装置的预定区处的TIMP2 竞争结合至所述抗体，并且预定区处获得的信号的量将与样品中的TIMP2的量成反比。可替 代地，TIMP2可W缀合至信号发生成分W提供可检测标记分析物。生物样品中的TIMP2可W 竞争结合至固定在测试装置的预定区处的抗体，并且预定区处获得的信号的量将再次与样 品中的TIMP2的量成反比。 在夹屯、测定的实例中，第一抗体(可检测标记的）和第二抗体（固定在测试装置的 预定区处)在测试装置的预定区处与样品中的TIMP2形成夹屯、复合物。在夹屯、测定中，第一 抗体和第二抗体可W是相同的（尤其是在使用多克隆抗体时)或不同的。因此，本专利技术的抗 体可W用于夹屯、对，或可W单独地与非为单克隆抗体诸如多克隆单体或适体的另一种结合 实体一起使用。 本专利技术的抗体可W用作测试试剂盒中用于检测生物样品中的TIMP-2的试剂。运种 测试试剂盒可W例如包括一次性测试装置，所述一次性测试装置被配置来产生与生物样品 中的人TIMP-2的存在或量有关的可检测信号。可替代地，运种测试试剂盒可W被配制用于 在未利用一次性测试装置的临床分析器中执行测定。优选地，测试试剂盒是体外诊断。如本 文所使用的术语"体外诊断的"指代无论是单独使用还是组合使用生产商都意图体外使用 来检测来源于人体的试样(包括血液和组织捐赠品）的医疗装置，所述医疗装置为试剂、试 剂产品、校准器、控制材料、试剂盒、仪器、设备、器材或系统，所述医疗装置仅仅或主要是为 了提供与生理学或病理学状态有关的、或与先天性异常有关的信息，或者确定潜在接受体 的安全和相容性，或监控治疗性措施。 在某些实施方案中，免疫测定W侧流模式执行。侧流测试是免疫测定的一种形式， 其中测试样品W色谱方式沿吸水性或非吸水性多孔固体衬底流动。侧流测试可W操作为竞 争或夹屯、模式测定。优选的侧流装置是一次性的、单次使用测试装置。在涂覆区将样品涂覆 到测试装置上并且使所述样品经过衬底，在所述衬底处，所述样品与已用抗体或抗原预处 理的线或区接触。如本文所使用的术语"测试区"指代侧流测试条上接受询查W便于产生与 相关分析物的存在或量有关的信号的离散位置。可检测信号可W通过将一次性测试装置插 入到分析仪器诸如反射计、巧光计或透射光度本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种特异地结合人TIMP‑2的分离的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体以至少108M‑1的亲和力结合至多肽，所述多肽的序列由选自由以下组成的组的序列组成：QAFCNADVVIRAKAVSEKEVD(SEQ ID NO:1)、IYGNPIKRIQYEIKQI(SEQ ID NO:2)、YEIKQIKMFKGPEKDIEFIYTAPSSAVCGVSLDVGGKKEYLIAGKAEGDG(SEQ ID NO:3)、YEIKQIKMFKGPEKDIEFIYTAPSSAV(SEQ ID NO:4)、EFIYTAPSSAVCGVS(SEQ ID NO:5)、TAPSSAVCGVSLDVGGKKEYLIAGKA(SEQ ID NO:6)、SLDVGGKKEYLIAGKAEGDGK(SEQ ID NO:7)、SSPDECLWMDWVTEKNINGHQ(SEQ ID NO:8)以及CAWYRGAAPPKQEFLDIEDP(SEQ ID NO:9)。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：R·A·维贾延德兰，S·万卡塔苏巴劳，
申请(专利权)人：阿斯图特医药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。