本发明专利技术公开了一种金线莲组培苗的培育方法，涉及组培苗的培育技术领域，包括以下步骤：A、将金线莲蒴果的种子均匀洒在诱导培养基表面培养25天～35天，种子萌发形成原球茎；B、将原球茎转接到增殖培养基进行培养，2个月后发育成小苗，小苗转接到增殖培养基上进行继代培养，每隔30天～35天继代1次，得到丛生芽；C、丛生芽长高至2.5厘米～3.5厘米时，将丛生芽分割成单株并转接在生根培养基上，一个月后单株长出1厘米～3厘米的根，即得本金线莲组培苗。与现有技术相比，本发明专利技术促进种子萌发，提高种子的发芽率，小苗经过继代培养得到大量的丛生芽，将丛生芽分割成单株并接种在生根培养基上诱导生根，生根率可达99%以上。
【技术实现步骤摘要】
金线莲组培苗的培育方法
本专利技术涉及组培苗的培育
，尤其是一种金线莲组培苗的培育方法。
技术介绍
金线莲别名金线兰、金丝草等，为兰科开唇兰属多年生草本植物，是一种珍稀名贵的中草药。金线莲以全草入药，具有清凉解毒，滋阴降火和消炎止痛的功效，对无名肿痛，发烧、止泻及蛇咬伤等均有显著的疗效，近年来治疗高血压、糖尿病等广泛运用。人们长期大量无节制的挖掘，野生的金线莲资源日渐枯竭，金线莲的人工栽培日趋广泛，需要大量的金线莲种苗；由于金线莲的种子细小，一枚蒴果含有成千上万粒种子，种子由球形胚与单层细胞构成的种皮组成，在自然条件下需与真菌共生才能萌芽生长，但其发芽率极低；而且金线莲种苗的生根率低，金线莲种苗生长繁殖慢，满足不了大规模种植的需要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种金线莲组培苗的培育方法，以解决金线莲种子的发芽率极低，种苗生根率低的问题，加快金线莲种苗的生长繁殖，满足大规模种植金线莲的需要。为了解决上述问题，本专利技术采用的技术方案是：这种金线莲组培苗的培育方法，包括以下步骤：A、将金线莲蒴果的种子均匀洒在诱导培养基表面进行培养25天～35天，种子萌发形成原球茎；所述诱导培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，pH5.4～5.6；B、将原球茎转接到增殖培养基进行培养，2个月后发育成小苗，小苗转接到增殖培养基上进行继代培养，每隔30天～35天继代1次，得到丛生芽；所述增殖培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入2.0mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、100g/L的土豆汁、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，pH5.4～5.6；C、丛生芽长高至2.5厘米～3.5厘米时，将丛生芽分割成单株并转接在生根培养基上诱导生根，一个月后单株长出1厘米～3厘米的根，即得金线莲组培苗；所述生根培养基的配方是：在1/2MS培养基的基础上，加入0.8mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、0.5mg/L的活性炭、15g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，pH5.4～5.6。上述金线莲组培苗的培育方法技术方案中，更具体的技术方案还可以是：步骤A、步骤B和步骤C的培养环境为：培养温度（23±2）℃，光照强度1500勒克斯～2000勒克斯，光照时间为12小时/天。进一步的，所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基的制备步骤包括：（1）按所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基的配方分别配制所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基，调节pH5.4～5.6；（2）分别将配制好的所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基进行加热，至琼脂完全溶解，趁热分装于干净的培养瓶中，稍凉后加盖；（3）将分装有各种培养基的培养瓶及时放入高压灭菌锅中，在温度121℃、压力105KPa下灭菌21分钟。进一步的，步骤A中先将金线莲蒴果进行消毒处理后，再取用种子；所述消毒处理是在超净工作台上将金线莲蒴果放置于75%的酒精中消毒30秒，然后用0.1%HgCl2水溶液浸泡8分钟～10分钟，再用无菌水冲洗5次～6次。由于采用了上述技术方案，本专利技术与现有技术相比具有如下有益效果：1、本专利技术将种子均匀洒在诱导培养基表面进行培养，促进种子萌发形成原球茎，大幅度提高种子的发芽率；原球茎转接到增殖培养基进行培养成小苗，小苗经过继代培养得到大量的丛生芽；将丛生芽分割成单株并转接在生根培养基上诱导生根，生根率可达99%以上；加快金线莲种苗的生长繁殖，满足大规模种植金线莲的需要。2、提供适宜的温度和光照，促进金线莲种子的萌芽和小苗的生长繁殖。3、配制提高种子萌芽的诱导培养基，小苗生长繁殖的增殖培养基以及生根培养基，促进金线莲种苗的生长繁殖。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详述：实施例1一种金线莲组培苗的培育方法，具体步骤如下：A、将野生的金线莲蒴果进行消毒处理后，再取用金线莲蒴果内的种子；消毒处理是在超净工作台上将金线莲蒴果放置于75%的酒精中消毒30秒，然后用0.1%HgCl2水溶液浸泡8分钟，再用无菌水冲洗5次；将种子均匀洒在诱导培养基表面进行培养，培养温度21℃，光照强度1500勒克斯，光照时间为12小时/天，培养25天，种子萌发形成白色的原球茎；诱导培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，调节pH5.4；B、将原球茎转接到增殖培养基进行培养，2个月后发育成小苗，小苗转接到增殖培养基上进行继代培养，培养温度21℃，光照强度1500勒克斯，光照时间为12小时/天，每隔30天继代1次，即可不断地得到大量丛生芽；增殖培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入2.0mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、100g/L的土豆汁、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，调节pH5.4；C、丛生芽长高至2.5厘米时，将健壮的丛生芽分割成单株并转接在生根培养基上诱导生根，培养温度21℃，光照强度1500勒克斯，光照时间为12小时/天；一个月后单株长出1厘米的根，即得金线莲组培苗；生根培养基的配方是：在1/2MS培养基的基础上，加入0.8mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、0.5mg/L的活性炭、15g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，调节pH5.4。诱导培养基的制备步骤：（1）按诱导培养基的配方，在MS培养基的基础上，每升加入1.5mg的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg的a-萘乙酸（NAA）、200mg的水解酪蛋白（CH）、30g的蔗糖、4.5g的琼脂，混合后调节pH5.4；（2）将配制好的诱导培养基进行加热，至琼脂完全溶解，趁热分装于干净的培养瓶中，稍凉后加盖；（3）将装有诱导培养基的培养瓶及时放入高压灭菌锅中，在温度121℃、压力105KPa下灭菌21分钟。增殖培养基的制备步骤：（1）按增殖培养基的配方，在MS培养基的基础上，每升加入2.0mg的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg的a-萘乙酸（NAA）、200mg的水解酪蛋白（CH）、100g的土豆汁、30g的蔗糖、4.5g的琼脂，混合后调节pH5.4；（2）将配制好的增殖培养基进行加热，至琼脂完全溶解，趁热分装于干净的培养瓶中，稍凉后加盖；（3）将装有增殖培养基的培养瓶及时放入高压灭菌锅中，在温度121℃、压力105KPa下灭菌21分钟。生根培养基的制备步骤：（1）按生根培养基的配方，在1/2MS培养基的基础上，每升加入0.8mg的a-萘乙酸（NAA）、200mg的水解酪蛋白（CH）、0.5mg的活性炭、15g的蔗糖、4.5g的琼脂，混合后调节pH5.4；（2）将配制好的生根培养基进行加热，至琼脂完全溶解，趁热分装于干净的培养瓶中，稍凉后加盖；（3）将装本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种金线莲组培苗的培育方法，其特征在于包括以下步骤：A、将金线莲蒴果的种子均匀洒在诱导培养基表面进行培养25天～35天，种子萌发形成原球茎；所述诱导培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入1.5mg/L的6‑苄氨基嘌呤（6‑BA）、 0.1mg/L的 a‑萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，PH5.4～5.6； B、将原球茎转接到增殖培养基进行培养，2个月后发育成小苗，小苗转接到增殖培养基上进行继代培养，每隔30天～35天继代1次，得到丛生芽；所述增殖培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入2.0mg/L的6‑苄氨基嘌呤（6‑BA）、0.1mg/L 的a‑萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、100g/L的土豆汁、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，PH5.4～5.6；C、丛生芽长高至2.5厘米～3.5厘米时，将丛生芽分割成单株并转接在生根培养基上诱导生根，一个月后单株长出1厘米～3厘米的根，即得本金线莲组培苗；所述生根培养基的配方是：在1/2MS培养基的基础上，加入0.8mg/L 的a‑萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、0.5mg/L的活性炭、15g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，PH5.4～5.6。...
【技术特征摘要】
1.一种金线莲组培苗的培育方法，其特征在于包括以下步骤：A、先将金线莲蒴果进行消毒处理后，再取用种子；所述消毒处理是在超净工作台上将金线莲蒴果放置于75%的酒精中消毒30秒，然后用0.1%HgCl2水溶液浸泡8分钟～10分钟，再用无菌水冲洗5次～6次；将金线莲蒴果的种子均匀洒在诱导培养基表面进行培养25天～35天，种子萌发形成原球茎；所述诱导培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，pH5.4～5.6；B、将原球茎转接到增殖培养基进行培养，2个月后发育成小苗，小苗转接到增殖培养基上进行继代培养，每隔30天～35天继代1次，得到丛生芽；所述增殖培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入2.0mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、100g/L的土豆汁、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，pH5.4～5.6；C、丛生芽长高至2.5厘米～3.5厘米时，将丛...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐庆乐，
申请(专利权)人：河池乐康生态农业科技有限公司，唐庆乐，
类型：发明
国别省市：广西;45
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