一种刺五加多糖的工业化生产方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种刺五加多糖的工业化生产方法及其应用，具体方法为：选取刺五加的根及根茎部分，粉碎后得到刺五加粉料，通过超临界萃取，得刺五加萃余物；加水进行连续逆流萃取，得到萃取液；经非极性或弱极性大孔树脂吸附，低度醇洗脱，水洗液过滤、浓缩干燥得刺五加多糖，低度醇洗脱液浓缩干燥刺五加苷E。本发明专利技术采用超临界二氧化碳对刺五加原料进行除杂，减轻了后续树脂吸附过程的压力；在提取刺五加多糖的同时，提取刺五加苷E，实现了原料的综合利用，刺五加苷E总提取率达到90%以上，多糖含量得率95%以上；本发明专利技术得到的刺五加多糖在治疗结核病方面有显著的疗效。

【技术实现步骤摘要】
一种刺五加多糖的工业化生产方法及其应用
本专利技术属于植物提取
，具体涉及一种刺五加多糖的工业化生产方法及其应用。
技术介绍
目前，对于临床上结核杆菌呈阳性患者始终贯彻和遵循直接监督化疗(DOTS)的原则，其合理的化疗方案主要包括：以异烟肼、利福平、链霉素、对氨水杨酸、乙胺丁醇等为主要用药的初治方案；以丙硫异烟胺、卡那霉素等为基础的复治方案；以环丙沙星、氧氟沙星等为基础的耐多药结核病治疗方案。上述临床常用的抗结核药物，其大部分本身均可引起机体肝功能异常，再加之长时间的联合用药，更极大的增加了肝脏损伤的机会。一旦由于肝脏功能异常，而使抗结核药物被迫降低剂量甚至停药或换药，其结核杆菌就很有可能产生耐药性，最终导致整个化疗方案的失败。因此，如何获得一种药物，能够种积极有效的辅助治疗结核杆菌呈阳性患者已成为提高抗结核药物疗效的关键和重中之重。刺五加中主要含有甙类、苷类、三萜类、黄酮类、多糖类、氨基酸、有机酸、维生素和矿质元素等多种活性成分，这些活性成分也表现出不同的药理作用。目前，在我国除了中医处方中应用刺五加外，以刺五加为原料的药物种类也相对较多，如刺五加片、刺五加注射液、脑安片、安神补脑胶囊等。刺五加多糖(Acathopanassenticosuspolysacharides,ASPS)是从刺五加的根及根茎中所提取到的生物活性多糖。迄今为止，国内、外学者已经从剌五加中分离提取出了多种由果糖、葡萄糖、阿拉伯糖组成的多糖组分。刺五加多糖是刺五加活性成分中含量最高且作用最为广泛的功能性因子之一，其具有增强免疫力、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗衰老、降血糖和降血脂等作用，但尚未见关于刺五加多糖对于结核病有治疗作用的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种刺五加多糖的工业化生产方法及其应用。该方法操作简单，得率高，适用于工业化大生产。本专利技术的目的之一是提供一种刺五加多糖的制备方法，采用下述工艺步骤：（1）预处理：选取刺五加的根及根茎部分，粉碎后得到刺五加粉料，备用；（2）除杂：所述刺五加粉料通过超临界萃取，去除小分子杂质，得到刺五加萃余物；（3）提取：所述刺五加萃余物用等质量的水浸泡，水中添加原料质量0.01-0.05%的混合酶；然后用水进行连续逆流萃取，得到萃取液；所述的萃取条件为：料液质量比1:16～20，萃取温度68～86℃，萃取时间2～4h；（4）吸附：所述萃取液粗过滤除杂后，经非极性或弱极性大孔树脂吸附，然后依次用1～2BV的水和1～3BV低度醇洗脱，得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分；所述水洗液通过0.22μm的滤膜过滤得到透过液，将透过液通过0.01μm的滤膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脱液分别浓缩至固含量15-30%，得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液；（5）干燥：所述刺五加低度醇浓缩液干燥，得到刺五加苷E；所述截留浓缩液干燥，得到刺五加多糖。本专利技术所述步骤（2）中的超临界萃取条件为CO2流量1200～1400L/h、萃取压力20～28MPa、萃取温度43～65℃、萃取时间0.5～3h，分离压力7～11MPa、分离温度22～37℃、分离时间0.5～3h。本专利技术所述步骤（1）中的粉碎指20目筛通过率90%以上、80目筛通过率10%以下；刺五加的根及根茎的含水量在8-16wt%。本专利技术所述步骤（3）中刺五加萃余物浸泡温度20～35℃，时间2～4h；所述混合酶中各组分比例为蛋白酶：纤维素酶：果胶酶=2～4:1～2:0～0.5。本专利技术所述步骤（3）中连续逆流萃取用水pH值为4～7，料液质量比为1:16～18,萃取温度72～81℃。本专利技术所述步骤（4）中的粗过滤是指萃取液降温后加入萃取液重量0.5～3%的硅藻土或珍珠岩，搅拌均匀后，将萃取液通过300～500目的板式过滤机过滤，得到澄清透明的萃取液。本专利技术所述步骤（4）中的树脂为D130、D101和AB-8中的一种或几种；低度醇为浓度5～10wt%的乙醇溶液。本专利技术所述步骤（5）中干燥方法为喷雾干燥或冷冻干燥中的任意一种。本专利技术所述刺五加多糖平均分子量为10～30KD；阿拉伯糖：木糖：葡萄糖：甘露糖=6～9:20～25:6～9:0.5～2。本专利技术的另一目的是提供刺五加多糖用于制备治疗结核病药物方面的应用，尤其是刺五加多糖用于制备治疗结核病口服药物方面的应用。本专利技术所述刺五加多糖含量检测方法为苯酚-硫酸法，刺五加苷E检测方法参考胡广东在《黑龙江医药科学》（2009年第5期）期刊上发表的《刺五加中刺五加苷E的含量测定》中的方法。采用上述技术方案所产生的有益效果在于：1、本专利技术采用超临界二氧化碳对刺五加原料进行除杂，去除了黄酮类、香豆素类等小分子非极性或弱极性物质，避免了有效成分提取环节后的除杂工序，减轻了后续树脂吸附过程的压力，延长了树脂的使用寿命，提高了生产效率；2、本专利技术同时得到刺五加苷E，实现了原料的综合利用，有效的避免了资源的浪费，刺五加苷E总提取率达到90%以上；3、本专利技术运用连续逆流提取，选用较大的料液比，保证了提取率，同时选用树脂吸附，摒弃了传统工艺浓缩醇沉的步骤，极大的降低了能耗；4、选用膜过滤方式，截留目标平均分子量的刺五加多糖，无需使用昂贵的凝胶树脂，得率高，能耗低，成本小，适合工业化规模生产，多糖含量得率95%以上；5、本专利技术生产的刺五加多糖，经实验证明，在治疗结核病方面有显著的疗效，具有较好的药用前景。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详细的说明。实施例1本刺五加多糖的工业化生产方法采用下述具体工艺。（1）预处理：选取刺五加的根及根茎部分，含水量在8wt%，粉碎至20目筛通过率90%以上、80目筛通过率10%以下，得到刺五加粉料，备用。（2）除杂：所述刺五加粉料通过超临界萃取，去除小分子杂质，得到刺五加萃余物；超临界萃取条件为CO2流量1200L/h、萃取压力28MPa、萃取温度43℃、萃取时间0.5h，分离压力7MPa、分离温度22℃、分离时间0.5h。（3）提取：所述刺五加萃余物用等质量的水35℃浸泡2h，水中添加原料质量0.01%的混合酶；混合酶中各组分比例为蛋白酶：纤维素酶：果胶酶=3:1.5:0.2。然后用pH值为6.2的水进行连续逆流萃取，料液质量比为1:16,萃取温度86℃，萃取时间3h。（4）吸附：所述萃取液粗过滤除杂后，经D130树脂吸附，然后依次用1BV的水和3BV浓度5wt%的乙醇溶液洗脱，得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分；所述水洗液通过0.22μm的滤膜过滤得到透过液，将透过液通过0.01μm的滤膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脱液分别浓缩至固含量15%，得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液；粗过滤是指萃取液降温后加入萃取液重量0.5%的硅藻土，搅拌均匀后，将萃取液通过300目的板式过滤机过滤，得到澄清透明的萃取液。（5）干燥：所述刺五加低度醇浓缩液喷雾干燥，得到刺五加苷E；所述截留浓缩液喷雾干燥，得到刺五加多糖。本方法所述刺五加苷E得率为90.7%；刺五加多糖得率为96.1%，平均分子量为20KD；阿拉伯糖：木糖：葡萄糖：甘露糖=7.1:22.3:7.6:1.0。实施例2本刺五加多糖的工业化生产方法采用下述具体工艺。（1）预处理：选取刺五加的根及根茎部分，含水量在16wt%，粉碎至本文档来自技高网...

【技术保护点】
刺五加多糖的工业化生产方法，其特征在于，其采用下述工艺步骤：（1）预处理：选取刺五加的根及根茎部分，粉碎后得到刺五加粉料，备用；（2）除杂：所述刺五加粉料通过超临界萃取，去除小分子杂质，得到刺五加萃余物；（3）提取：所述刺五加萃余物用等质量的水浸泡，水中添加原料质量0.01‑0.05%的混合酶；然后用水进行连续逆流萃取，得到萃取液；所述的萃取条件为：料液质量比1:16～20，萃取温度68～86℃，萃取时间2～4h；（4）吸附：所述萃取液粗过滤除杂后，经非极性或弱极性大孔树脂吸附，然后依次用1～2BV的水和1～3BV低度醇洗脱，得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分；所述水洗液通过0.22μm的滤膜过滤得到透过液，将透过液通过0.01μm的滤膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脱液分别浓缩至固含量15‑30%，得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液；（5）干燥：所述刺五加低度醇浓缩液干燥，得到刺五加苷E；所述截留浓缩液干燥，得到刺五加多糖。

【技术特征摘要】
1.刺五加多糖的工业化生产方法，其特征在于，其采用下述工艺步骤：（1）预处理：选取刺五加的根及根茎部分，粉碎后得到刺五加粉料，备用；（2）除杂：所述刺五加粉料通过超临界萃取，去除小分子杂质，得到刺五加萃余物；（3）提取：所述刺五加萃余物用等质量的水浸泡，水中添加原料质量0.01-0.05%的混合酶；然后用水进行连续逆流萃取，得到萃取液；所述的萃取条件为：料液质量比1:16～20，萃取温度68～86℃，萃取时间2～4h；（4）吸附：所述萃取液粗过滤除杂后，经非极性或弱极性大孔树脂吸附，然后依次用1～2BV的水和1～3BV低度醇洗脱，得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分；所述水洗液通过0.22μm的滤膜过滤得到透过液，将透过液通过0.01μm的滤膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脱液分别浓缩至固含量15-30%，得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液；（5）干燥：所述刺五加低度醇浓缩液干燥，得到刺五加苷E；所述截留浓缩液干燥，得到刺五加多糖。2.根据权利要求１所述的刺五加多糖的工业化生产方法，其特征在于：所述步骤（2）中的超临界萃取条件为CO2流量1200～1400L/h、萃取压力20～28MPa、萃取温度43～65℃、萃取时间0.5～3h，分离压力7～11MPa、分离温度22～37℃、分离时间0.5～3h。3.根据权利要求１所述的刺五加多糖的工业化生产方法，其特征在于：所述步骤（1）中的粉碎指20目筛通过率90%以上、80目筛通过率10%以下；刺五加的根...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘景芝，孟庆龙，刘雅静，陈丽，任跃英，崔文玉，张健，
申请(专利权)人：长春市传染病医院，
类型：发明
国别省市：吉林;22