用于分析物同系物的测定制造技术

方法包括调节两种分析物同系物之一对在用于确定样品中的两种分析物同系物的总量的测定中得到的信号的量的贡献。采用一种非测定受体，其对所述两种分析物同系物中的任何一种具有更大结合亲和力，所述任何一种对信号的量的贡献要进行调节。非测定受体的量足以实现所述分析物同系物对所述信号的贡献的调节。进行用于确定两种分析物同系物的总量的测定，其中所述测定利用至少一种测定抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】用于分析物同系物的测定本申请要求享有于2013年4月12日提交的非临时申请美国系列号13/861,422的权益。前述申请的整体内容明确地通过引用并入本文。
技术介绍
本专利技术涉及用于准确地确定疑似含有分析物同系物的样品中的分析物同系物的总量的组合物、方法和试剂盒。许多小分子化合物或半抗原诸如，例如药物和维生素，以同系物形式存在，它们中的每一种直接地或通过它们的代谢产物中的一种或多种的中间性而为化合物的总生物学功能做出贡献。为了得到活性分析物的总量的准确测量，重要的是测量基本上等摩尔量的同系物形式，因为，在同系物形式的量不相等的情况下，在测定中得到的信号是畸变的，且不会代表同系物形式的总量。围绕基本上等摩尔量的分析物同系物的测量的一些问题包括，例如，难以得到同样地结合分析物同系物的抗体，和被内源性结合物质结合的分析物同系物的不相等释放。需要用于准确的和灵敏的确定在疑似含有这类分析物的样品中以同系物形式(它们都是有活性的)存在的分析物的总量的试剂和方法。例如，需要用于准确地和灵敏地确定维生素D的同系物形式的浓度的试剂和方法。专利技术概述 根据本文描述的原理的一些实例涉及这样的方法:其调节两种分析物同系物之一对在用于确定样品中的两种分析物同系物的总量的测定中得到的信号的量的贡献。在所述方法中，在测定介质中提供组合。所述组合包含:疑似含有两种分析物同系物的样品；用于进行测定的试剂，所述测定用于确定样品中的两种分析物同系物的总量，其中所述试剂包含至少一种结合所述两种分析物同系物的测定受体；和非测定受体，其对所述两种分析物同系物中的任何一种具有更大结合亲和力，所述任何一种对信号的量的贡献要进行调节。非测定受体的量足以实现所述分析物同系物对所述信号的贡献的调节。进行用于确定两种分析物同系物的总量的测定。根据本文描述的原理的一些实例涉及确定样品中的第一种分析物同系物和第二种分析物同系物的量的方法。在所述方法中，在测定介质中提供组合。所述组合包含:疑似含有所述第一种分析物同系物和所述第二种分析物同系物的样品；试剂，其用于进行所述第一种分析物同系物和所述第二种分析物同系物的测定；和非测定受体，其对所述第一种分析物同系物或所述第二种分析物同系物中的任何一种具有更大结合亲和力，所述任何一种对信号的量的贡献要进行调节。用于进行测定的试剂包含:测定抗体，其能够结合所述第一种分析物同系物和所述第二种分析物同系物中的每一种以形成复合物；和信号产生系统的成员，其产生与所述复合物中的所述第一种分析物同系物和所述第二种分析物同系物的量有关的信号。非测定受体的量足以实现所述第一种分析物同系物或所述第二种分析物同系物对所述信号的贡献的调节。在用于形成所述复合物的条件下温育所述测定介质。确定得自所述复合物的信号的量，并与所述样品中所述第一种分析物同系物和所述第二种分析物同系物的总量关联。根据本文描述的原理的一些实例涉及确定样品中的25-羟基维生素队和25-羟基维生素队的总量的方法。在测定介质中提供组合。所述组合包含:疑似含有25-羟基维生素队和25-羟基维生素D 3的样品，用于进行25-羟基维生素D 2和25-羟基维生素D 3的测定的试剂，和对25-羟基维生素队具有更大结合亲和力的非测定抗体。用于进行测定的试剂包含:测定抗体，其能够结合25-羟基维生素队和25-羟基维生素D 3以形成复合物；和信号产生系统的成员，其产生与25-羟基维生素队和25-羟基维生素D 3复合物的量有关的信号。非测定抗体的量足以实现25-羟基维生素D2对信号的量的贡献的调节。在用于形成所述复合物的条件下温育所述测定介质。确定得自所述复合物的信号的量，并与所述样品中25-羟基维生素队和25-羟基维生素D 3的总量关联。附图简述 图1是维生素D的同系物形式，即，25-羟基维生素队和25-羟基维生素D 3的化学式的描绘。特定实施方案详述一般讨论 根据本文描述的原理的方法涉及调节两种或更多种分析物同系物对在用于确定样品中分析物同系物的总量的测定中得到的信号的量的贡献。为何分析物同系物对在测定中得到的信号的贡献可能导致样品中分析物同系物的总量的不准确确定，存在许多原因。这些原因包括，但不限于:测定抗体没有同样地结合存在于样品中的不同分析物同系物，和/或分析物同系物之一可以被置换试剂从内源性结合物质置换的事实，所述置换试剂的量大于另一种分析物同系物的量。以上两种情形引起在以下情况下产生的不等量信号的产生:分析物同系物之一对信号的量的贡献会提供错误地反映原始样品中的分析物同系物的总量的总信号量。例如，作为例证和不进行限制，存在2个为25-羟基维生素D2的较高测定信号做出贡献的潜在因素。第一个因素是，25-羟基维生素队与维生素D结合蛋白的结合强度低于25-羟基维生素D3，所以25-羟基维生素队更容易从维生素D结合蛋白释放并造成可被测定抗体接近的游离25-羟基维生素D2分子的较高浓度。第二个因素是，在一些情况下，测定抗体对25-羟基维生素D2类似物的亲和力大于25-羟基维生素D 3o两个因素一起起作用可以导致来自25-羟基维生素D2的信号远高于来自25-羟基维生素D3的信号，这是非等摩尔浓度的根本原因。通过监测针对校准器(其跨越分析物的疑似目标浓度范围)得到的信号的量的差异，可以监测特定测定形式在医学决策范围的低端处的性能。例如，校准器(诸如，例如，校准器LI和校准器L2，或校准器L2和校准器L3，或校准器LI和校准器L4)的信号之间的大差异或分离是期望的。在一些实例中，可以采用5个校准器，其任意命名为L1-L5。通过如下确定信号的量，可以评价信噪比:使用不含有分析物的校准器，即任意命名的校准器LI(背景);和针对含有高于零的第一种已知量的分析物的校准器(任意命名的校准器L2)得到的信号的量。该评价还可以包括，使用校准器LI和含有高于零的第二种已知量的分析物的校准器(任意命名的L3)的信号的量，确定信号的量。这样的评价也可以包括使用校准器L4和L5的这类确定，其中每个校准器含有已知增加量的分析物。取决于测定形式，信号的差异可以是信号的增加或信号的减小。例如，对于竞争性测定，在大多数情况下，将存在与分析物的浓度有关的信号的减小；和，对于夹心测定，在大多数情况下，将存在与分析物的浓度有关的信号的增加。将在从使用已知分析物浓度的校准器上测定得到的信号的量相对于每个校准器中的分析物浓度绘图，以形成校正曲线或标准曲线。将在含有未知量的信号的样品上在测定中得到的结果与校正曲线进行对比，以基于在分析物测定中得到的信号的量确定未知样品中分析物的量。在分析物同系物或它们各自的代谢产物是有效的情况下，根据本文描述的原理的方法测量两种或更多种分析物同系物的总量。短语“分析物同系物”或“分析物的同系物形式”表示这样的分析物形式:其在结构和功能上相关，且彼此相差一个或多个化学部分，诸如，例如，亚甲基、甲基、氢、酮基和例如差向异构体。术语“有效”表示就特别的功能而言分析物的活性程度，其可以是例如生物学功能，诸如，例如骨代谢。例如，物质的生物学活性涉及物质的增强或抑制生物学功能的能力，诸如，例如，维持主体中的适当的矿物质和盐水平、细胞功能。作为例证和不进行限制，维生素D维持主体中的适当的钙和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种调节两种分析物同系物之一对在用于确定样品中的两种分析物同系物的总量的测定中得到的信号的量的贡献的方法，所述方法包括：(a) 提供在测定介质中的组合：　　(i) 疑似含有两种分析物同系物的样品；　　(ii) 用于进行测定的试剂，所述测定用于确定样品中的两种分析物同系物的总量，其中所述试剂包含至少一种结合所述两种分析物同系物的测定受体，和　　(iii) 非测定受体，其对所述两种分析物同系物中的任何一种具有更大结合亲和力，所述任何一种对信号的量的贡献要进行调节，其中非测定受体的量足以实现所述分析物同系物对所述信号的贡献的调节；和(b) 进行用于确定两种分析物同系物的总量的测定。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏铁全，W贝兹克，E加西亚，
申请(专利权)人：西门子医疗保健诊断公司，
类型：发明
国别省市：美国;US