本发明专利技术公开一种鸡冠滇丁香的组培快繁方法，将种子接入初代培养基中培养出无菌苗，之后将无菌苗切成带腋芽的茎段接种于增殖培养基中培养出丛生芽，将丛生芽剪下，接种于生根培养基中，培养出生根苗，经炼苗得移栽苗。本发明专利技术不仅野外取材容易、方便，在短期内能用较少的材料繁殖大量优质种苗，而且不受季节和地区的限制，重复性好，移栽后成活率达90%以上，完全能够满足市场对鸡冠滇丁香的需求量。
【技术实现步骤摘要】
鸡冠滇丁香的组培快繁方法
本专利技术涉及一种植物的组培快繁方法，尤其是一种鸡冠滇丁香的组培快繁方法，属于植物组织培养
技术介绍
鸡冠滇丁香(Luculiayunnanensis)系茜草科(Rubiaceae)滇丁香属(Luculia)，以小枝顶端、萼管及果密被柔毛而显著区别于本属其它的无毛种类。此外，鸡冠滇丁香为滇丁香属中唯一的我国特有植物，主要分布于云南的怒江、临沧和思茅等地。该植物叶片翠绿、株型优美，枝顶簇生伞房状聚伞花序，气味芬芳且花期较长，具有极高的观赏价值和广阔的应用前景，为极具云南特色的珍贵野生花卉资源，然而鸡冠滇丁香分布区域十分有限，加之分布地遭到人为干扰和破坏严重，其野生资源现已稀少。因此，亟需对鸡冠滇丁香的繁殖技术进行研究总结，但目前国内外未见相关的报道。
技术实现思路
为实现鸡冠滇丁香的快速繁殖，本专利技术提供一种鸡冠滇丁香的组培快繁方法，该方法取材容易、繁殖系数高，容易获得大量无病鸡冠滇丁香植株。本专利技术通过以下技术方案实现：一种鸡冠滇丁香的组培快繁方法，其特征在于经过下列步骤：A、将消毒灭菌的种子接入下列初代培养基中：MS蔗糖25～35g/L，在温度为20～30℃、光照时间为8～12h/d、光照强度为35～45μmol/m2·s的条件下进行培养直至小苗高2～3㎝；在此条件下培育至10天左右种子开始萌发，至50～60天小苗即可长高2～3㎝；B、将步骤A培养出的小苗剪下，切成带腋芽的茎段接种于下列增殖培养基中：在温度为20～30℃、光照时间为8～12h/d、光照强度为35～45μmol/m2·s的条件下进行增殖培养30～40天，再转入新的与上述增殖培养基相同的培养基中，按相同培养条件继续培养一次，得丛生芽；C、将步骤B所得丛生芽剪下，接种于下列生根培养基中：1/4MSIBA0.4～1.2mg/L蔗糖15～25g/L，在温度为20～30℃、光照时间为8～12h/d、光照强度为35～45μmo/m2·s的条件下进行培养15～25天，得生根苗；D、将步骤C所得生根苗移至湿度为70～85％的条件下进行炼苗3～5天，取出生根苗，洗去根部培养基，移栽到经800～900倍甲基托布津消毒的营养袋中，于湿度为70～85％的同样条件下培养，1周后逐步降低湿度，即得鸡冠滇丁香的移栽苗。所述步骤A的消毒灭菌的种子是将野生的鸡冠滇丁香蒴果用水洗净后，在无菌条件下用体积浓度为75％酒精浸泡30s，迅速用无菌水冲洗3～5次，再用质量浓度为0.1～1.0％的升汞溶液浸泡10～20分钟，以无菌水冲洗5～8次，然后用无菌滤纸吸干表面水分，用解剖刀切开蒴果取种子。所述步骤D中1周后逐步降低湿度是1周后分多次逐步增加光照强度用以降低湿度，到1个月时完全裸露于阳光下。本专利技术具有下列优点和效果：本专利技术以鸡冠滇丁香的种子为扩繁材料，不仅在短期内能用较少的材料繁殖大量优质种苗，具有用材少、取材容易、周期短、速度快、繁殖系数高等特点，而且不受季节和地区的限制，重复性好。将所得鸡冠滇丁香的移栽苗移栽后成活率达90％以上，完全能够满足市场对鸡冠滇丁香的需求量。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步描述。实施例1A、将野生的鸡冠滇丁香蒴果用水洗净后，移至超净工作台中，在无菌条件下用体积浓度为75％酒精浸泡30s，迅速用无菌水冲洗3次，再用质量浓度为0.1％的升汞溶液浸泡20分钟，以无菌水冲洗5次，然后用无菌滤纸吸干表面水分，用解剖刀切开蒴果取种子，再将种子接入下列初代培养基中：MS蔗糖30g/L，在温度为25℃、光照时间为12h/d、光照强度为40μmol/m2·s的条件下进行培养；在此条件下培育至10天左右种子开始萌发，至50天小苗平均高2.25㎝；B、将步骤A培养出的小苗剪下，切成带腋芽的茎段接种于下列增殖培养基中：在温度为25℃、光照时间为12h/d、光照强度为40μmol/m2·s的条件下进行增殖培养30天，再转入新的与上述增殖培养基相同的培养基中，按相同培养条件继续培养一次，得丛生芽；平均每个外植体得丛生芽4.3个，芽长3.07cm；C、将步骤B所得丛生芽剪下，接种于下列生根培养基中：1/4MSIBA0.4mg/L蔗糖15g/L，在温度为25℃、光照时间为12h/d、光照强度为40μmo/m2·s的条件下进行培养20天，得生根苗；20天生根率达93.33％，平均生根7.8条，根长0.89㎝；D、将步骤C所得生根苗移至湿度为75％的炼苗棚中，揭盖炼苗3天，取出生根苗，洗去根部培养基，移栽到经800倍甲基托布津消毒的营养袋中，于湿度为75％的同样条件下培养，1周后分多次除去遮阴物逐步增加光照强度用以降低湿度，到1个月时完全去除遮阴物裸露于阳光下，即得鸡冠滇丁香的移栽苗。实施例2A、将野生的鸡冠滇丁香蒴果用水洗净后，移至超净工作台中，在无菌条件下用体积浓度为75％酒精浸泡30s，迅速用无菌水冲洗5次，再用质量浓度为1.0％的升汞溶液浸泡10分钟，以无菌水冲洗8次，然后用无菌滤纸吸干表面水分，用解剖刀切开蒴果取种子，再将种子接入下列初代培养基中：MS蔗糖25g/L，在温度为20℃、光照时间为8h/d、光照强度为35μmol/m2·s的条件下进行培养；在此条件下培育至10天左右种子开始萌发，至60天小苗长高至2.96㎝；B、将步骤A培养出的小苗剪下，切成带腋芽的茎段接种于下列增殖培养基中：在温度为20℃、光照时间为8h/d、光照强度为35μmol/m2·s的条件下进行增殖培养35天，再转入新的与上述增殖培养基相同的培养基中，按相同培养条件继续培养一次，得丛生芽；平均每个外植体得丛生芽3.6个，芽长3.25cm；C、将步骤B所得丛生芽剪下，接种于下列生根培养基中：1/4MSIBA0.8mg/L蔗糖25g/L，在温度为20℃、光照时间为8h/d、光照强度为35μmo/m2·s的条件下进行培养15天，得生根苗；生根率达100％，平均生根10.9条，根长0.79㎝；D、将步骤C所得生根苗移至湿度为85％的炼苗棚中，揭盖炼苗5天，取出生根苗，洗去根部培养基，移栽到经850倍甲基托布津消毒的营养袋中，于湿度为85％的同样条件下培养，1周后分多次除去遮阴物逐步增加光照强度用以降低湿度，到1个月时完全去除遮阴物裸露于阳光下，即得鸡冠滇丁香的移栽苗。实施例3A、将野生的鸡冠滇丁香蒴果用水洗净后，移至超净工作台中，在无菌条件下用体积浓度为75％酒精浸泡30s，迅速用无菌水冲洗4次，再用质量浓度为0.5％的升汞溶液浸泡15分钟，以无菌水冲洗6次，然后用无菌滤纸吸干表面水分，用解剖刀切开蒴果取种子，再将种子接入下列初代培养基中：MS蔗糖35g/L，在温度为30℃、光照时间为10h/d、光照强度为45μmol/m2·s的条件下进行培养直至小苗高2～3㎝；在此条件下培育至10天左右种子开始萌发，至55天小苗即可长高2.61㎝；B、将步骤A培养出的小苗剪下，切成带腋芽的茎段接种于下列增殖培养基中：在温度为30℃、光照时间为10h/d、光照强度为45μmol/m2·s的条件下进行增殖培养40天，再转入新的与上述增殖培养基相同的培养基中，按相同培养条件继续培养一次，得丛生芽；平均每个外植体得丛生芽4.1个，芽长3.27cm；C、将步骤B所得丛生芽剪下，接种本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种鸡冠滇丁香的组培快繁方法，其特征在于经过下列步骤：A、将消毒灭菌的种子接入下列初代培养基中：MS蔗糖 25～35g/L，在温度为20～30℃、光照时间为8～12h/d、光照强度为35～45μmol/m2·s的条件下进行培养直至小苗高2～3㎝；B、将步骤A培养出的小苗剪下，切成带腋芽的茎段接种于下列增殖培养基中：MS6‑BA 0.5～1.5mg/LNAA 0.05～0.15mg/L蔗糖 25～35g/L，在温度为20～30℃、光照时间为8～12h/d、光照强度为35～45μmol/m2·s的条件下进行增殖培养30～40天，再转入新的与上述增殖培养基相同的培养基中，按相同培养条件继续培养一次，得丛生芽；C、将步骤B所得丛生芽剪下，接种于下列生根培养基中：1/4MSIBA 0.4～1.2mg/L蔗糖 15～25g/L，在温度为20～30℃、光照时间为8～12h/d、光照强度为35～45μmo/m2·s的条件下进行培养15～25天，得生根苗；D、将步骤C所得生根苗移至湿度为70～85%的条件下进行3～5天，取出生根苗，洗去根部培养基，移栽到经800～900倍甲基托布津消毒的营养袋中，于湿度为70～85%的同样条件下培养，1周后逐步降低湿度，即得鸡冠滇丁香的移栽苗。...
【技术特征摘要】
1.一种鸡冠滇丁香的组培快繁方法，其特征在于经过下列步骤：A、将野生的鸡冠滇丁香蒴果用水洗净后，移至超净工作台中，在无菌条件下用体积浓度为75％酒精浸泡30s，迅速用无菌水冲洗4次，再用质量浓度为0.5％的升汞溶液浸泡15分钟，以无菌水冲洗6次，然后用无菌滤纸吸干表面水分，用解剖刀切开蒴果取种子，再将种子接入下列初代培养基中：MS蔗糖35g/L，在温度为30℃、光照时间为10h/d、光照强度为45μmol/m2·s的条件下进行培养直至小苗高2～3㎝；在此条件下培育至10天左右种子开始萌发，至55天小苗即可长高2.61㎝；B、将步骤A培养出的小苗剪下，切成带腋芽的茎段接种于下列增殖培养基中：MS6-BA1.5mg/LNAA0.15mg/L蔗糖35g/L，在温度为30℃、光照时间为10h/d、光照强度为...
【专利技术属性】
技术研发人员：马宏，刘秀贤，李正红，万友名，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院资源昆虫研究所，
类型：发明
国别省市：云南;53
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