一种反刍动物专用双效微生物饲料添加剂及其制备制造技术

一种反刍动物专用双效微生物饲料添加剂及其制备，属于微生物饲料添加剂技术领域。本发明专利技术是采用玉米为原料，经过粉碎、蒸煮、液化、糖化等步骤，制成玉米液化酶解液，作为嗜酸乳杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）和酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅ　　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）的发酵原料，分别发酵制备成嗜酸乳杆菌和酿酒酵母培养物的活菌制剂；采用玉米、麸皮和豆粕等原料作为枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　　ｏｒｙｚａｅ）和黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　　ｎｉｇｅｒ）的发酵产酶培养基，枯草芽孢杆菌用液体发酵、米曲霉和黑曲霉用固体混合发酵，配伍制成复合酶制剂；将活菌制剂与复合酶制剂按合适比例复配制成双效添加剂产品。该发明专利技术产品每克含有益微生物活菌数＞１０↑［９］ｃｆｕ，α－淀粉酶活为每克产品每分钟水解淀粉量＞４０００毫克，蛋白酶活为每克产品每分钟水解酪蛋白生成氨基酸量＞５００毫克，纤维素酶活为每克产品每分钟降解纤维素量＞２００毫克，脂肪酶活为每克产品每分钟水解甘油三酯量＞１５０毫克。本发明专利技术的产品作为添加剂，同时具备了活菌制剂和酶制剂两种功效，一方面改善反刍动物瘤胃发酵，增加采食量，增强动物健康状况，提高生产性能；另一方面提高饲料利用率，改善饲料报酬，降低生产成本；从两方面可以显著降低养殖生产的成本，提高经济效益，具有广阔的应用前景和市场需求。

【技术实现步骤摘要】
一种反刍动物专用双效微生物饲料添加剂及其制备一  
本专利技术涉及一种反刍动物专用双效微生物饲料添加剂及其制备方法，属于微生物饲料添加剂
二  
技术介绍
饲料安全是当前全世界广泛关注的重大问题。在饲料中添加抗生素和特定药物造成的药物残留和病原菌抗药性产生，这已经成为全球性的难题，越来越多的国家采取立法手段禁止滥用抗生素和药物。开发新型安全的微生物饲料添加剂，替代或部分替代抗生素和药物在畜禽养殖业中的应用，对于缓解畜产品中药物残留和病原菌耐药性等饲料和食品安全问题，保障人类健康，具有积极的意义。反刍动物由于其独特的生理特点，能够利用低值青粗饲料和农副产品转化为高营养价值的肉奶等畜产品，饲料转化效率高，养殖效益明显，反刍动物养殖业是现代农业产业结构中效益最高的产业。发展奶牛、肉牛和肉羊等反刍动物养殖业对于充分利用饲料资源，缓解我国粮食相对短缺的局面，调整农业产业结构、发展农村经济、增加农民收入等方面具有重大的现实意义。开发反刍动物专用的微生物饲料添加剂，能够有效地改善反刍动物瘤胃发酵性能，提高饲料(尤其是粗饲料)的利用率和转化率，改善动物机体的健康状况，降低疾病发生率，避免药物残留和耐药性等安全性问题，为人类提供更高品质的畜产品。目前，国内外关于反刍动物微生物饲料添加剂的研究开发，主要集中于两类：一类是酵母培养物和酵母活菌制剂，以酿酒酵母为出发菌株经过发酵制备而成的，含有调控动物消化道内微生物生长的活性因子和活细胞等有效成分，具有调控改善动物消化道微生物区系的功效；一类是酶制剂，以高产酶能力的微生物为出发菌株，经过固体或液体发酵以及一定的提取工艺制备而成的，一般为含有蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、半纤维素酶等活性成分，能够改善动物对饲料中各种组分的利用效率。这两类产品均属于单一功效的添加剂产品，不直接具备微生态调控和饲料养分利用促进两种功效。本专利技术的目的是提供一种反刍动物专用双效微生物饲料添加剂及其制备方法。采用本专利技术后，能够提高奶牛的采食量和对粗饲料的利用效率，提高犊牛日增重最高达46.75％，降低料肉比最高达31.7％，提高奶牛产奶量达6.30％，显著增加经济效益。三  
技术实现思路
一种反刍动物专用双效微生物添加剂，它是采用玉米为原料，经过粉碎、蒸煮、液化、糖化等步骤，制成玉米液化酶解液，作为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)的发酵原料，分别发酵制备成嗜酸乳杆菌和酿酒酵母培养物的活菌制剂；采用玉米、麸皮和豆粕等原料作为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、米曲霉(Aspergillusoryzae)和黑曲霉(Aspergillus niger)的发酵产酶培养基，枯草芽孢杆菌用液体发酵、米曲霉和黑曲霉用固体混合发酵，配伍制成复合酶制剂；将活菌制剂与复合酶制剂按1∶4的比例复-->配制成双效添加剂产品。该专利技术产品每克含有益微生物活菌数＞109cfu，α-淀粉酶活为每克产品每分钟水解淀粉量＞4000毫克，蛋白酶活为每克产品每分钟水解酪蛋白生成氨基酸量＞500毫克，纤维素酶活为每克产品每分钟降解纤维素量＞200毫克，脂肪酶活为每克产品每分钟水解甘油三酯量＞150毫克。本专利技术的制备方法是(一)活菌制剂制备1  菌种嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)。2  原料采用新鲜黄玉米粉碎处理后，按料水比为1∶3.0～4.0的比例加50℃温水拌料，拌匀后加热到80℃预煮30～40分钟，在132～135℃、2.8～3.0kg/cm2条件下蒸煮90分钟，冷却到65℃左右，加入高温液化酶和糖化酶处理3～4小时，得到DE值为60％以上、糖度在12～14°Bx的玉米酶解糖化液，调节pH值为4.5左右，再加热至90℃左右保持30分钟，待用。3  发酵工艺(1)嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)A.培养基种子培养基(g/1000ml)：大豆蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4·7H2O 0.58g，MnSO4·4H2O 0.25g，pH6.2，115℃灭菌20分钟。发酵培养基：玉米酶解糖化液加入3％脱脂大豆粉，121℃灭菌30分钟。B.培养条件一级种子培养：为摇瓶发酵，取250ml三角瓶装种子培养基50ml，取斜面活化菌种1环接入培养基中，30℃，220rpm旋转摇床培养36小时。二级种子培养：10L自动种子发酵罐装种子培养基6L，按5％接种量，30℃，300rpm，培养28小时。发酵罐培养：100L全自动搅拌发酵罐装发酵培养基60L，由种子罐流加接种，接种量10％，30℃，300rpm，培养28～32小时。(2)酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)A.培养基种子培养基：取新鲜黄豆芽按1∶10比例加水，煮沸30分钟，用纱布过滤，滤液加水补足起始体积，加入葡萄糖5％，自然pH值，115℃灭菌30分钟。发酵培养基：玉米酶解糖化液。B.培养条件一级种子培养：为摇瓶发酵，取250ml三角瓶装种子培养基50ml，取斜面活化菌种1环-->接入培养基中，28℃，260rpm，培养16小时。二级种子培养：10L自动种子发酵罐装发酵培养基6L，按5％接种量，28℃，300rpm，培养18小时。发酵罐培养：100L全自动搅拌发酵罐装发酵培养基60L，由种子罐流加接种，接种量10％，28℃，200rpm，培养18～24小时。4  干燥加工发酵液中加入0.5％乳清粉作为保护剂后，分别经过喷雾干燥，制得嗜酸乳杆菌培养物(活菌数＞1.5×109cfu/g)和酵母培养物(活菌数＞1.0×1010cfu/g)，二者按40∶60的比例复配成活菌数超过6.6×109cfu/g的活菌制剂。(二)酶制剂制备1  菌种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、米曲霉(Aspergillus oryzae)和黑曲霉(Aspergillus niger)。2  发酵工艺(1)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)A.培养基种子培养基：豆饼粉3％，玉米粉2％，麸皮3％，Na2HPO4 0.4％，KH2PO4 0.03％，自然pH值，121℃灭菌20分钟。发酵培养基：豆饼粉3％，玉米粉5％，麸皮4％，Na2HPO4 0.4％，KH2PO4 0.03％，自然pH值，121℃灭菌20分钟。发酵补料液：取蚕蛹∶石灰∶水按100∶6∶600的比例，混合均匀，在1.0×105Pa蒸汽压力下加热水解1小时，制成蚕蛹水解液，作为发酵补料液。B.培养条件种子培养：10L自动种子发酵罐装发酵培养基6L，取斜面菌种制成的细胞悬液(约1.0×1011cfu/ml)按1％接种量接入种子罐，30℃，通风量1∶1.2体积比，350rpm，培养8小时。发酵培养：100L全自动搅拌发酵罐装发酵培养基60L，由种子罐流加接种，接种量10％，30℃，300rpm，通风量1∶0.4体积比，培养8小时；再提高通风量为1∶0.6，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种反刍动物专用双效微生物添加剂，其特征是由发酵制备成嗜酸乳杆菌和酿酒酵母培养物的活菌制剂，与由枯草芽孢杆菌用液体发酵、米曲霉和黑曲霉用固体混合发酵配伍制成复合酶制剂，按比例复配制成双效饲料添加剂产品。该专利技术产品每克含有益微生物活菌数＞１０↑［９］ｃｆｕ，α－淀粉酶活为每克产品每分钟水解淀粉量＞４０００毫克，蛋白酶活为每克产品每分钟水解酪蛋白生成氨基酸量＞５００毫克，纤维素酶活为每克产品每分钟降解纤维素量＞２００毫克，脂肪酶活为每克产品每分钟水解甘油三酯量＞１５０毫克。实际生产中使用本专利技术的产品后，能够提高犊牛日增重最高达４６．７５％，降低料肉比最高达３１．７％，提高奶牛产奶量达６．３０％，显著增加经济效益。

【技术特征摘要】
1.一种反刍动物专用双效微生物添加剂，其特征是由发酵制备成嗜酸乳杆菌和酿酒酵母培养物的活菌制剂，与由枯草芽孢杆菌用液体发酵、米曲霉和黑曲霉用固体混合发酵配伍制成复合酶制剂，按比例复配制成双效饲料添加剂产品。该发明产品每克含有益微生物活菌数＞109cfu，α-淀粉酶活为每克产品每分钟水解淀粉量＞4000毫克，蛋白酶活为每克产品每分钟水解酪蛋白生成氨基酸量＞500毫克，纤维素酶活为每克产品每分钟降解纤维素量＞200毫克，脂肪酶活为每克产品每分钟水解甘油三酯量＞150毫克。实际生产中使用本发明的产品后，能够提高犊牛日增重最高达46.75％，降低料肉比最高达31.7％，提高奶牛产奶量达6.30％，显著增加经济效益。2.一种反刍动物专用双效微生物添加剂的制备方法，其特征在于：(一)活菌制剂制备1  菌种嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)。2  原料采用新鲜黄玉米粉碎处理后，按料水比为1∶3.0～4.0的比例加50℃温水拌料，拌匀后加热到80℃预煮30～40分钟，在132～135℃、2.8～3.0kg/cm2条件下蒸煮90分钟，冷却到65℃左右，加入高温液化酶和糖化酶处理3～4小时，得到DE值为60％以上、糖度在12～14°Bx的玉米酶解糖化液，调节pH值为4.5左右，再加热至90℃左右保持30分钟，待用。3  发酵工艺(1)嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)A.培养基种子培养基(g/1000ml)：大豆蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4·7H2O 0.58g，MnSO4·4H2O 0.25g，pH6.2，115℃灭菌20分钟。发酵培养基：玉米酶解糖化液加入3％脱脂大豆粉，121℃灭菌30分钟。B.培养条件一级种子培养：为摇瓶发酵，取250ml三角瓶装种子培养基50ml，取斜面活化菌种1环接入培养基中，30℃，220rpm旋转摇床培养36小时。二级种子培养：10L自动种子发酵罐装种子培养基6L，按5％接种量，30℃，300rpm，培养28小时。发酵罐培养：100L全自动搅拌发酵罐装发酵培养基60L，由种子罐流加接种，接种量10％，30℃，300rpm，培养28～32小时。(2)酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)A.培养基种子培养基：取新鲜黄豆芽按1∶10比例加水，煮沸30分钟，用纱布过滤，滤液加水补足起始体积，加入葡萄糖5％，自然pH值，115℃灭菌30分钟。发酵培养基：玉米酶解糖化液。B.培养条件一级种子培养：为摇瓶发酵，取250ml三角瓶装种子培养基50ml，取斜面活化菌种1环接入培养基中，28℃，260rpm，培养16小时。二级种子培养：10L自动种子发酵罐装发酵培养基6L，按5％接种量，28℃，300rpm，培养18小时。发酵罐培养：100L全自动搅拌发酵罐装发酵培养基60L，由种子罐流加接种，接种量10％，28℃，200rpm，培养18～24小时。4  干燥加工发酵液中加入0.5％乳清粉作为保护剂后，分别经过喷雾干燥，制得嗜酸乳杆菌培养物(活...

【专利技术属性】
技术研发人员：王加启，黄庆生，周凌云，赵青余，
申请(专利权)人：中国农业科学院畜牧研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]