检测TOPO IIa mRNA相对表达量的引物和方法技术

本发明专利技术公开了一种实时荧光定量PCR技术检测TOPO IIa mRNA相对表达量的引物和方法，它包括：逆转录及实时荧光定量PCR扩增反应试剂；特异性扩增引物，特异性探针；阳性对照品、阴性对照品。该检测方法由于引入了“正常人”替代了原有的单纯个体检测，不但能够对受测者体内TOPO IIa基因表达量进行检测，同时还能与正常水平进行比较，进而可指导患者临床用药。该方法特异性好、灵敏度高、操作简单、缩短了检测时间和降低了检测成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生命科学和生物
，更具体的是一种实时荧光定量PCR技术检测 TOPO IIa mRNA相对表达量的方法。
技术介绍
DNA拓扑异构酶IIa(topoisomerase IIa)是控制DNA的拓扑状态的一类酶蛋白， 存在于细胞核内，可以降低DNA超螺旋和扭转，在这一过程中DNA形成一个双链缺口，可使 双链DNA通过这个缺口，然后重新连接起断裂的DNA链，从而达到解开超螺旋的目的，为进 一步解链复制等做准备。 目前诸多研宄表明TOPO IIa是肺癌、乳腺癌、白血病等多种恶性肿瘤化疗药物的 作用靶点，而该类药物种类诸多，根据作用方式不同分为嵌人型和非嵌人型两类。嵌人型抑 制剂系通过其分子中类似嗓吟碱或嗜吮碱的多环结构嵌人到TOPO IIa与DNA结合部位的 双链之间，从而干扰了该酶将DNA断端重新接合的正常功能，进而影响DNA的复制，激活了 细胞内一系列导致细胞死亡的过程，细胞发生凋亡或坏死，从而抑制肿瘤生长。如葱环类抗 生素阿霉素等，在临床实验中对肺小细胞癌、白血病、胸腺癌和卵巢癌均有显著疗效。非嵌 人型抑制剂其作用模式还不十分清楚，可能是直接作用或是仅仅本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测TOPO IIa mRNA相对表达量的核苷酸，所述核苷酸包括扩增引物和探针，其特征在于，特异性检测TOPO IIa基因的扩增引物序列为SEQ NO1和SEQ NO2及其探针序列SEQ NO3：SEQ NO1：CCACTTCTGATGATTCTGACTCT；SEQ NO2：CATCTGACTCTTCCAGGTACTT；SEQ NO3：FAM‑CGAAAGCAGTCACAAGCAAGAAATCCAAG‑TAMARA。特异性检测actin基因的扩增引物序列为SEQ NO4和SEQ NO5及其探针序列SEQ NO6：SEQ4：TGAGCGAGGCTACAGCTT；SEQ5：TCCTTGATGT...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈奕磊，黎洪奋，王淑一，
申请(专利权)人：杭州艾迪康医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33