【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种基于PCR制备粘性未端DNA组装产 物的方法。
技术介绍
将两个或更多DNA片段按照设计组装在一起一直是生物学研宄中非常基础且重 要的一步。在启动子和外显子功能研宄、蛋白质功能研宄以及基因操作等传统领域中DNA 连接技术都有广泛的应用。而在合成生物学这门新兴学科中，DNA连接更是成为许多研宄 必不可少的核心步骤。尽管一系列相关手段已经被开发出来，其中包括经典的type II型限 制酶技术及同源重组技术等，他们都旨在获得更高的效率、准确度、适用性和通量，但直到 现在，DNA连接技术仍然在平末端片段连接、一次性连接数量、连接长度、酶切位点依赖以及 片段处理方面有着诸多限制，依然有很大的改进余地。本专利技术开发的一种新型DNA连接技 术，在插入大片段的定点突变、载体构建、敲除基因片段以及嵌合编码序列上具有独特的优 势。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种基于PCR制备粘性未端DNA组装产物的方法，利用PCR方法 产生长短不一样的PCR产物，把PCR产物经过变性和复性过程，就可形成粘性未端的可连 接低物。 本专...
【技术保护点】
一种基于PCR制备粘性未端DNA组装产物的方法，其特征在于包括以下步骤：将两对PCR扩增引物进行扩增，两种产物混合，高温条件下将PCR产物变性为单链DNA，在99℃条件下缓慢复性30s，形成具有粘性未端的DNA组装产物，在连接酶作用下，具有粘性未端的DNA组装产物之间进行组装。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：曹君利，张松，宋昱，郭羽白，周笑，李燕强，
申请(专利权)人：徐州医学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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