凤阳产气霉制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种凤阳产气霉制剂，凤阳产气霉制剂为凤阳产气霉的固体发酵产物；固体发酵产物的制备方法为：将凤阳产气霉的一级发酵种子接种于发酵基质上进行发酵，得固体发酵产物。或者凤阳产气霉制剂为将固体发酵产物进行营养液包衣并风干后的所得物；制备方法为：将固体发酵产物按照1g:0.9～1.1ml的固液比浸泡于灭菌后营养液中，浸泡时间为10～12小时；将浸泡后所得的固体发酵产物风干至含水率为6％～10％。本发明专利技术的凤阳产气霉制剂实际使用时，在每10升容器内放置30～80克的凤阳产气霉制剂，就能对容器内的物质产生保鲜防腐杀菌的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及生物农药领域，尤其是提供一种内生真菌制剂，更确切的说，是能够产 生抑菌活性气体的凤阳产气霉制剂。
技术介绍
产气霉（Muscodorspp.)(现在也称廢香霉）是一类属于炭角菌科的内生真菌， 最早由Worapong等（2001)从肉桂树分离所得，其显著特征是能产生挥发性有机化合物 (volatileorganiccompounds,简称VOCs)，该些VOCs具有广泛的生物活性，能抑制或杀死 许多病原真菌、病原细菌和一些昆虫。而后，人们利用其特有的形态学、生理学、生物化学方 面的特征及核糖体RNA的序列来寻找和鉴定新的产气霉属内生真菌，越来越多的产气霉种 被发现。由于产气霉能产生有广泛抑菌活性的VOCs,科学家们利用GC-MS等化学分析手段 分离鉴定了产气霉产生的VOCs成分，发现不同菌株产生的VOCs成分不尽相同。 生物制剂的开发中非常重要的环节是通过发酵规模化生产。发酵分为固体发酵和 液体发酵。固体发酵（solid-statefermentation,SS巧是在指不存在或几乎没有自由水 (基质必须具有足够的湿度支持微生物的生长和代谢）的条件下进行发酵。（Pandey等， 1992 ;1994 ;2000 ;2001)。从生物反应过程的角度考虑，固态发酵是W气相为连续相的生物 反应过程，我们可W认为固体发酵是一种在培养基为固体载体的基础上进行利用的一种发 酵手段（Mitchell等，2000)。 固体发酵与液体发酵相比有许多显著的优点：发酵原料成本低（经常是农业废弃 物），能源消耗低，操作简单，较少的废水产生；对无菌要求相对较低，不易发生大面积的污 染；单位体积的产量高，能用较小的反应器进行发酵；并且对环境友好，因为此技术解决了 固体废弃物的处置问题（Pand巧等，2008 ;Matthew等，2009)。SSF由于发酵环境类似于微 生物的自然习惯，对于微生物来说，SSF十分适合其生长并且能产生有价值的副产品。固体 发酵已经成为一种应用于生产微生物产品如饲料、燃料、工业化学品和医药产品的有潜力 的技术。 关于固体发酵的发展可追溯至20世纪50年代。利用真菌培养转化类固醇，利用 SSF生产出霉菌毒素产物，固体发酵生产富含蛋白质的牛饲料（此过程中包括了农用工业 废渣的利用，因此提供了对低成本废渣增值的独特工艺开发，Sin曲ania等，2009);该一系 列固体发酵的成果引起了研究者们对SSF的兴趣，SSF取得了空前的发展（Sin曲ania等， 2009)。关于SSF的基础研究、生物反应器的发展、建模和生产不同的微生物产品（如食物、 饲料、不同的基础和次级代谢产物W及如生物浸出、生物制浆、生物修复、生物选矿的生物 过程）等方面产生了大量研究。 至今，有许多人研究影响固体发酵进程的生物化学和工程学的因素（Mitchell 等，2000a，20(K)b;Pandey，2003)，虽然SSF中的许多技术细节仍未得到解决（H別kcr等， 2004)，但SSF在生物技术中的运用仍十分广泛（Raimbault等，1998 ;Pandey等，2000a， 200化）。毒素、细菌内毒素、植物生长因子、抗生素、免疫抑制药物、生物碱，该些重要的生物 活性物质已经被广泛报道通过SSF生产。工业酶，如淀粉酶，纤维素酶，木聚糖酶，蛋白酶， 植酸酶，脂肪酶等，有机酸如巧樣酸和乳酸等也已通过SSF大量生产（Krishna等，2005)。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种凤阳产气霉制剂。[000引为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种凤阳产气霉制剂，该凤阳产气霉制剂为 凤阳产气霉的固体发酵产物；所述凤阳产气霉固体发酵产物的制备方法为包括W下步骤： 将凤阳产气霉的一级发酵种子（即液体发酵种子）按照10~20ml: 100g(较佳为 20ml:100g)的用量比接种于发酵基质上进行发酵，发酵工艺为：于24. 5~25. 5°C(较佳为 25°C)黑暗静培养，培养时间为8~10天；得固体发酵产物。该固体发酵产物能直接作为 凤阳产气霉制剂。 作为本专利技术的凤阳产气霉制剂的改进；所述凤阳产气霉制剂为将固体发酵产物进 行营养液包衣并风干后的所得物；制备方法为： 配制营养液，所述营养液为W下任意一种；3%~5%的海藻糖水溶液、3%~5% 的海藻酸钢水溶液、0. 1%~0.2%黄原胶水溶液、水（较佳），上述％均为质量％ ; 将固体发酵产物按照lg:0. 9~1. 1ml(较佳为Ig: 1ml)的固液比浸泡于灭菌后营 养液中，浸泡时间为10~12小时（较佳为10小时）； 备注说明；将营养液经常规灭菌（于12rC、l. 1个大气压灭菌20min)，得灭菌后 营养液； 将浸泡后所得的固体发酵产物风干（超净工作台风干）至含水率为6%~10% (较佳为8%，％为质量％);风干后产物为凤阳产气霉制剂。 作为本专利技术的凤阳产气霉制剂的进一步改进；将凤阳产气霉制剂进行包装处理； 所述包装处理包括抽真空和塑封处理。 作为本专利技术的凤阳产气霉制剂的进一步改进；所述发酵基质为麦粒固体发酵培养 基或低成本发酵培养基； 所述麦粒固体发酵培养基的制备方法为；将麦粒放入水中浸泡7~化，将浸泡 后所得的麦粒进行灭菌（常规方式灭菌2次，即，具体为：于12rc、l.1个大气压灭菌 40min)； 所述低成本发酵培养基的制备方法为：配制原料，所述原料由W下重量含量的成 分组成；40%款皮、20%豆饼、30%玉米粒和10%米慷；将原料与去离子水按照Ig;lml的 比例混合后进行灭菌（常规方式灭菌2次，即，具体为：于121°C、1. 1个大气压灭菌40min)。 作为本专利技术的凤阳产气霉制剂的进一步改进；凤阳产气霉的一级发酵种子（即液 体发酵种子）的制备方法为：将ZJL024菌于PDB培养液中，200r/min、黑暗25°C培养6天， 得一级发酵种子。 作为本专利技术的凤阳产气霉制剂的制备方法的进一步改进：所述凤阳产气霉制剂的 保存温度为4°c。 本专利技术所述的凤阳产气霉为Muscodorsp.ZJLQ024 (亦名；Muscodor.fengyangensisZ化Q024)，在专利号为200910153512. 0的专利技术《Muscodorsp.属植物内生 真菌ZJLQ024及其用途和杀菌剂》中有明确告知，保藏号为CGMCCNo. 2863。 产气霉因其产生的VOCs对多数细菌、真菌及昆虫具有抑制甚至杀死作用，其作为 生物防治制剂具有很大的应用潜力，目前在农业、医药及工业应用上受到越来越多科技工 作者的重视。 本专利技术所得的固体发酵产物，可直接使用；本专利技术所得的固体发酵产物仅仅用灭 菌后营养液浸泡后，也可直接使用。灭菌后营养液浸泡并风干后的凤阳产气霉制剂，使用前 需；将无菌棉花铺在无菌塑料瓶底部，加无菌水浸湿，加入上述凤阳产气霉制剂（灭菌后营 养液浸泡并风干后的凤阳产气霉制剂），再用水喷洒润湿表面，盖盖。于4°C保存，使用时， 即开即用。 本专利技术的凤阳产气霉制剂实际使用时，在每10升容器内放置30~80克的凤阳产 气霉制剂，就能对容器内的物质产生保鲜防腐杀菌的作用。 本专利技术的凤阳产气霉制剂采用固体发酵方式制备而得，具有成本较低、工艺简洁、 保鲜防腐杀菌好的优本文档来自技高网...

【技术保护点】
凤阳产气霉制剂，其特征是：凤阳产气霉制剂为凤阳产气霉的固体发酵产物；所述凤阳产气霉固体发酵产物的制备方法为包括以下步骤：将凤阳产气霉的一级发酵种子按照10～20ml:100g的用量比接种于发酵基质上进行发酵，发酵工艺为：于24.5～25.5℃黑暗静培养，培养时间为8～10天；得固体发酵产物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：章初龙，张雪，林福呈，毛黎娟，苏珍珠，冯晓晓，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33