一种对虾耐低溶氧家系选育方法技术

本发明专利技术涉及一种对虾耐低溶氧家系选育方法，属于对虾抗逆性状选育技术领域；该方法是：（1）基础群体的建立；（2）构建F1代家系；（3）同池培养；（4）抗低溶氧测试；（5）构建F2代家系；（6）继代选育，选用不同来源的亲虾通过定向交配构建全/半同胞家系，共同环境养殖，进行94h低溶氧胁迫，根据抗低溶氧测试结果及生长测度结果进行亲本选留，经过4代的连续选择，在生长性能优异、耐低溶氧性能强的家系中，选择亲缘关系较远的家系，从中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌雄对虾作为亲本，繁育后代作为优良品种；本方法有效的解决了对虾高密度养殖时出现低溶氧影响对虾生长、导致对虾死亡的难题，极大的推动对虾高密度养殖产业的发展。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种对虾选育方法，具体涉及一种对虾耐低溶氧家系选育方法，属于对虾抗逆性状选育

技术介绍
对虾属于节肢动物门、有鳃亚门、甲壳纲、软甲亚纲、十足目、游泳亚目、对虾科、对虾属。对虾可分定居型（如日本对虾、宽沟对虾、欧洲对虾等）和洄游型（如中国对虾、墨吉对虾、长毛对虾），前一类栖于沿岸浅海，白昼常潜入沙底内，不作大范围的移动；后一类栖于河口沿岸混浊海域，常作大范围的移动和洄游。对虾主要以底栖无脊椎动物为食，如多毛类、小型甲壳类和双壳类软体动物等，有时也捕浮游动物。对虾具有极高的营养价值，是深受人们喜爱的美味佳肴。虾肉有补肾壮阳，通乳抗毒、养血固精、化瘀解毒、益气滋阳、通络止痛、开胃化痰等功效，适宜于肾虚阳痿、遗精早泄、乳汁不通、筋骨疼痛、手足抽搐、全身瘙痒、皮肤溃疡、身体虚弱和神经衰弱等病人食用。现代医学研究证实，虾的营养价值极高，能增强人体的免疫力和性功能，补肾壮阳，抗早衰；虾皮有镇静作用，常用来治疗神经衰弱，植物神经功能紊乱诸症；虾中含有三种重要的脂肪酸，能使人长时间保持精力集中；虾中含大量的维生素B12，同时富含锌、碘和硒，热量和脂肪较低，营养丰富，且其肉质松软，易消化，对身体虚弱以及病后需要调养的人是极好的食物；虾中含有的丰富的镁对心脏活动具有重要的调节作用，能很好的保护心血管系统，减少血液中胆固醇含量，防止动脉硬化，同时还能扩张冠状动脉，有利于预防高血压及心肌梗死；虾体内的虾青素有助于消除因时差反应而产生的“时差症”，对人类的健康极有裨益。我国是世界上最大的对虾产品生产国，也是世界上对虾产品的主要贸易国，近年来，由于土地和水资源的制约，集约化的高密养殖模式成为对虾主要养殖模式。采用德尔斐法研究发现溶氧是影响对虾养殖的最重要的水质因子(马真,2010)，由于生物和理化因素的综合作用，高密度养殖虾池经常出现溶氧不足的现象，在低溶氧水体中，对虾对温度、盐度、氨氮、硫化氢等耐受力降低，对病毒、细菌免疫力下降，蜕皮减少生长减缓，死亡率增高。对虾耐低溶氧性状成为影响其生长、存活的重要性状，但国内选育的对虾品种：中国对虾“黄海1号”、“黄海2号”，凡纳滨对虾“中兴1号”、“中科1号”、“科海1号”、“桂海1号”，主要还是以生长和抗病性状为选择指标。 在植物和其他动物中已有报道，通过抗逆性状的选择提高其生长、存活性能，耐低溶氧性状作为一种抗逆性状，具有重要选育价值。因此，专利技术一种耐低溶氧对虾的选育方法，培育出耐低溶氧的对虾新品种，有效解决对虾高密度养殖时出现低溶氧影响对虾生长、导致对虾死亡的难题，将极大的推动对虾高密度养殖产业的发展。良种是水产养殖业可持续发展的重要基础，关于对虾良种选育的研究一直没有停止，中国专利技术“一种凡纳滨对虾良种的选育方法”，申请号201410039044.5提供了一种高产、抗逆的适合高盐度和低盐度养殖环境的凡纳滨对虾良种的选育方法；中国专利技术“一种日本囊对虾家系构建与选育方法”，申请号201110278874.X提供了一种日本囊对虾亲堂兄妹家系构建与选育的方法，但是，针对低溶氧环境对虾养殖存活率低的研究还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种对虾耐低溶氧品种的家系选育方法，以解决高密度养殖过程中，水体缺氧导致的对虾生长缓慢，养殖存活率低的问题。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种对虾耐低溶氧家系选育方法，包括如下步骤：（1）基础群体的建立：收集来自美国弗罗里达对虾改良公司SIS、科纳湾海洋资源公司Konna Bay、夏威夷海洋研究所OI、泰国正大亲虾公司ZD和国内选育的中兴1号、中科1号、桂海1号亲虾作为群体，通过群体交配建立15个交配组合作为选育基础群体；（2）构建F1代家系：从上述15个交配组合中，按2%选择强度，挑选个体大的，雌虾45~65g，雄虾35~55g的个体，雌雄虾性腺发育正常、附肢齐全、无病、食欲旺盛、对外界刺激反应敏感，作为亲虾进行留种，通过人工受精的方式，按雌雄比例2:1，建立全同胞家系60~100个，父系半同胞家系30~50个，为F1代家系；（3）同池培养：各F1代家系对虾从仔虾阶段分别取400尾虾苗于3m×1m×1m网箱中，每8~12d清洗更换一次网箱网布，全部网箱置于20m×30m×1.5m的大池子中进行共同环境养殖；（4）抗低溶氧测试：各F1代对虾在共同环境中养殖2月和5月时，分别从各家系中随机抽取30尾对虾测量对虾体重、体长、头胸甲长、腹节长、头胸甲宽，将取样对虾进行眼柄套环标记，标记好的对虾在虾池暂养2d，如有死虾，从其所在家系中随机抽取对虾标记测量补充至30尾，将实验对虾放于800L的圆形塑料桶中，待对虾将水体中溶氧消耗至1.2mg.L-1开始计时，通过调节气阀控制使水体溶氧维持在0.8~1.2mg.L-1（96小时预实验确定的氧浓度范围），进行94h低溶氧胁迫，桶中放有水泵维持上下水体溶氧均匀，每1h检测水体溶氧情况，每8h检测对虾存活情况，对各家系溶氧胁迫时不同时间段死亡和成活对虾，进行抗低溶氧性状相关基因SNP位点分析；（5）数据分析：利用ASReml软件，采用多性状个体动物模型估算生长性状与耐低溶氧性状遗传力与遗传相关，预测生长性状与耐低溶氧性状育种值，结果显示：体重的遗传力为0.27±0.11（中等遗传力），耐低溶氧遗传为0.13±0.07（中等遗传力），体重与耐低溶氧间遗传相关为0.22±0.09，均Z-Score检验显著(P<0.05)，采用5月龄体重性状育种值加权50%加5月龄低溶氧存活育种值加权50%算得选择指数，筛选家系选择指数高的20个家系作为留种家系；（6）构建F2代家系：从20个留种家系中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌虾20尾，雄虾10尾作为亲本，控制近交系数0.1以下，通过定向交配构建全同胞（半同胞）家系，构建F2代家系；（7）继代选择：将上述实验家系经过4代的连续选择，在生长性能优异耐低溶氧性能强的家系中，选择亲缘关系较远的家系，从中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌雄对虾作为亲本，繁育后代作为优良品种供生产应用。本专利技术选用多个遗传背景不同，生长性能优异的对虾群体作为基础群体，保证了丰富的遗传多样性；亲本遗传背景清晰，通过设定近交系数交配，有效避免选育过程中出现近交现象；采用人工受精，按雌雄比例2:1的方式建立全、半同胞家系，可以对耐低溶氧性状与其他性状的遗传参数进行计算，更好的制定选择方案；在共同环境养殖2月和5月进行，充分考虑到共同环境效益大小对对虾低溶氧耐受性的影响。本专利技术的有益效果是：采用本专利技术的一种对虾耐低溶氧家系选育方法，可以缩短耐低溶氧对虾家系的养成周期，降低维护成本，而且方便管理，并且可以解决高密度养殖过程中，水体缺氧导致的对虾生长缓慢，养殖存活率低的问题。具体实施方式下面通过实例对本专利技术做进一步详细说明，这些实例仅用来说明本专利技术，并不限制本专利技术的范围。本专利技术在广东省湛江市海威水产养殖公司进行：实施例1一种对虾耐低溶氧家系选育方法，包括如下步骤：...

【技术保护点】
一种对虾耐低溶氧家系选育方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）基础群体的建立：收集来自美国弗罗里达对虾改良公司SIS、科纳湾海洋资源公司Konna Bay、夏威夷海洋研究所OI、泰国正大亲虾公司ZD和国内选育的中兴1号、中科1号、桂海1号亲虾作为群体，采用AFLP的技术对不同来源亲虾进行遗传多样性分析，通过群体交配建立15个交配组合作为选育基础群体；（2）构建F1代家系：从上述15个交配组合中，按2%选择强度，挑选个体大的作为亲虾进行留种，通过人工受精的方式，按照雌雄比例2:1，建立全同胞家系60~100个，父系半同胞家系30~50个，作为F1代家系；（3）同池培养：各F1代家系对虾从仔虾阶段分别取400尾虾苗于3m×1m×1m网箱中，每8~12d清洗更换一次网箱网布，全部网箱置于20m×30m×1.5m的大池子中进行共同环境养殖；（4）抗低溶氧测试：各F1代对虾在共同环境中养殖2个月和5个月时，分别从各家系中随机抽取30尾对虾测量对虾体重、体长、头胸甲长、腹节长、头胸甲宽，将取样对虾进行眼柄套环标记，标记好的对虾在虾池暂养2d，然后将实验对虾放于800L的圆形塑料桶中，待对虾将水体中溶氧消耗至1.2mg.L‑1开始计时，通过调节气阀控制使水体溶氧维持在0.8~1.2mg.L‑1，进行94h低溶氧胁迫，桶中放有水泵维持上下水体溶氧均匀，每1h检测水体溶氧情况，每8h检测对虾存活情况，筛选出生长性能优异抗低溶氧能力强的家系，并进行记录分析；（6）构建F2代家系：从留种家系中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌虾20尾，雄虾10尾作为亲本，控制近交系数0.1以下，通过人工受精的方式，构建F2代家系；（7）继代选择：将上述实验家系经过4代的连续选择，在生长性能优异耐低溶氧性能强的家系中，选择亲缘关系较远的家系，从中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌雄对虾作为亲本，繁育后代作为优良品种供生产应用。...

【技术特征摘要】
1.一种对虾耐低溶氧家系选育方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）基础群体的建立：收集来自美国弗罗里达对虾改良公司SIS、科纳湾海洋资源公司Konna Bay、夏威夷海洋研究所OI、泰国正大亲虾公司ZD和国内选育的中兴1号、中科1号、桂海1号亲虾作为群体，采用AFLP的技术对不同来源亲虾进行遗传多样性分析，通过群体交配建立15个交配组合作为选育基础群体；
（2）构建F1代家系：从上述15个交配组合中，按2%选择强度，挑选个体大的作为亲虾进行留种，通过人工受精的方式，按照雌雄比例2:1，建立全同胞家系60~100个，父系半同胞家系30~50个，作为F1代家系；
（3）同池培养：各F1代家系对虾从仔虾阶段分别取400尾虾苗于3m×1m×1m网箱中，每8~12d清洗更换一次网箱网布，全部网箱置于20m×30m×1.5m的大池子中进行共同环境养殖；
（4）抗低溶氧测试：各F1代对虾在共同环境中养殖2个月和5个月时，分别从各家系中随机抽取30尾对虾测量对虾体重、体长、头胸甲长、腹节长、头胸甲宽，将取样对虾进行眼柄套环标记，标记好的对虾在虾池暂养2d，然后将实验对虾放于800L的圆形塑...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘定，刘建勇，刘荡，刘东晖，郑大，陈海龙，许榕榕，
申请(专利权)人：雷州市海威水产养殖有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44