【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种细胞增殖速率的测定方法及应用，属于细胞工程
技术介绍
细胞增殖速率测定是细胞生物学领域最基础的实验方法，传统的化学方法精度不高，现有的流式细胞仪测定技术(如BrdU法，PCNA法等)，虽然解决了测量精度的问题，但是BrdU法和PCNA法都依赖于特殊标记的抗体，这些抗体价格昂贵且具有种属特异性，这就大大限制了这两种方法的应用范围。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种细胞增殖速率的测定方法，所采取的技术方案如下：本专利技术的目的在于提供一种细胞增殖速率的测定方法，该方法是在培养细胞的不同时间点分别取样，利用秋水仙素对所取样品进行处理，处理后利用乙醇固定细胞，再利用流式细胞仪对固定细胞进行细胞周期检测，同时检测未经秋水仙素处理的空白对照组的细胞周期，计算细胞增殖速率，绘制细胞生长曲线，再利用细胞生长曲线确定待测细胞的增殖速率。所述方法的步骤如下：1)在含有5％CO2培养箱中培养细胞，并在细胞生长的不同时间点取样；
【技术保护点】
一种细胞增殖速率的测定方法，其特征在于，是在培养细胞的不同时间点分别取样，利用秋水仙素对所取样品进行处理，处理后利用乙醇固定细胞，再利用流式细胞仪对固定细胞进行细胞周期检测，同时检测未经秋水仙素处理的空白对照组的细胞周期，计算细胞增殖速率，绘制细胞生长曲线，再利用细胞生长曲线确定待测细胞的增殖速率。
【技术特征摘要】
1.一种细胞增殖速率的测定方法，其特征在于，是在培养细胞的不同时间点分别取样，利用
秋水仙素对所取样品进行处理，处理后利用乙醇固定细胞，再利用流式细胞仪对固定细胞
进行细胞周期检测，同时检测未经秋水仙素处理的空白对照组的细胞周期，计算细胞增殖
速率，绘制细胞生长曲线，再利用细胞生长曲线确定待测细胞的增殖速率。
2.权利要求1所述方法，其特征在于，步骤如下：
1)在含5％CO2培养箱中培养细胞，并在细胞生长的不同时间点取样；
2)利用秋水仙素对步骤1)取样的细胞进行处理，处理结束后静置备用，同时设置未经
秋水仙素处理的空白对照组；
3)利用乙醇对步骤2)所得的处理样品及对照组样品进行固定处理，获得固定细胞；
4)利用流式细胞仪测定步骤3)所得的固定细胞的细胞周期，并计算细胞的增殖速率，
绘制细胞生长曲线；
5)利用步骤4)所得的细胞生长曲线测定待测细胞的增殖速率。
3.权利要求2所述方法，其特征在于，步骤1)所述细胞为鹿茸间充质干细胞；所述不同时间
点，是在细胞培养的12h、24h、36h、48h、60h和72h取样；所述取样，是用直径100mm
的培养皿取106个细胞。
4.权利要求2所述方法，其特征在于，步骤2)所述秋水仙素处理，是利用终浓度80-120μg/ml
的秋水仙素对...
【专利技术属性】
技术研发人员：王大涛，李春义，郭倩倩，
申请(专利权)人：中国农业科学院特产研究所，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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