一种细菌纳米磁小体-凝集素复合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种细菌纳米磁小体-凝集素复合物及其制备方法与应用，属于分离纯化技术领域。本发明专利技术是将BMPs进行表面修饰、改造后加入交联剂与凝集素进行偶联制备得到BMPs-凝集素复合物。对BMPs表面进行修饰，去除BMPs自身蛋白对后续应用时的影响，同时添加了PE为偶联凝集素提供了更多的伯氨基，提高了偶联效率，同时提高了BMPs的分散性；利用交联剂(BS3)作为连接臂将BMPs与凝集素进行了共价偶联，并保证凝集素识别糖链区域未受破坏；通过调节缓冲液的浓度，缩短了制备时间，提高了偶联效率。本发明专利技术的复合物用于富集和分离特定糖蛋白，较传统亲和色谱分离，具有步骤少，时间短等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种细菌纳米磁小体-凝集素复合物及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种细菌纳米磁小体-凝集素及其制备方法与应用，属于分离纯化

技术介绍
糖可以与蛋白质或脂类等共价结合形成糖蛋白、蛋白聚糖及糖脂等糖复合物，是人体内重要的信息分子，在许多生命和疾病过程中起着特异性的识别和介导作用。其结构或数量的微小变化就可能引起其功能的改变，从而导致各种疾病的发生，这引起了人们对糖组学研究的极大热情。随着科技的进步和生物学的发展，越来越多的技术被应用于糖组学的研究之中，如凝集素亲和层析技术、前沿亲和层析技术、高效液相色谱、质谱、糖芯片技术等。在糖组学的研究的中，主要分为三大部分：结构糖组学、功能糖组学以及信息生物学。糖复合物的获取及分离是糖组学研究的基础，目前常用的捕获技术为凝集素亲和层析技术。凝集素是一种从各种植物、无脊椎动物或者高等动物中分离提纯的非免疫来源、非酶类物质，能与一类糖基特异性结合的蛋白质，在糖蛋白质组学的研究过程中非常重要，被广泛应用于鉴定细胞中糖蛋白和糖脂糖链的类型。凝集素亲和层析技术就是利用凝集素与糖链的亲和性，从而应用于亲和色谱层析中分离糖复合物，而由于凝集素与糖链的亲本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细菌纳米磁小体‑凝集素复合物，其特征在于，所述复合物是将经表面去蛋白、表面添加伯氨基处理的细菌纳米磁小体与凝集素进行偶联而生成的。

【技术特征摘要】
1.一种细菌纳米磁小体-凝集素复合物，其特征在于，所述复合物是将经表面去蛋白、表面添加伯氨基处理的细菌纳米磁小体与凝集素进行偶联而生成的；所述表面去蛋白是用表面活性剂处理细菌纳米磁小体；所述添加伯氨基是用含伯氨基的磷脂对细菌纳米磁小体表面进行修饰；所述偶联是通过交联剂完成。2.一种制备权利要求1所述复合物的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)细菌纳米磁小体BMPs表面修饰：称取BMPs，加入表面活性剂进行处理，以去除BMPs表面的蛋白，然后收集BMPs，重悬于磷脂溶液中，超声，孵育，得到表面修饰的BMPs，即BMPs-磷脂复合物；(2)BMPs-交联剂复合物的制备：将上一步得到的BMPs-磷脂复合物悬浮、打散，然后加入交联剂溶液进行反应，收集，即得到BMPs-交联剂复合物；(3)BMPs-交联剂-凝集素复合物的制备：将上一步得到的BMPs-交联剂复合物加入到凝集素溶液中，超声打散，反应，收集，即得到BMPs-交联剂-凝集素复合物，即BMPs-凝集素复合物。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法具体包括：(1)BMPs表面修饰：秤取BMPs，按每1mgBMPs，加入50μL-100mL的浓度为0.5-2％的表面活性剂溶液进加热或者震荡处理，以去除BMPs表面的蛋白，然后收集BMPs，清洗后重悬于1-100mg/mL的磷脂酰乙醇胺PE或磷脂酰丝氨酸PS溶液中，超声，孵育，得到BMPs-磷脂复合物；(2)BMPs-交联剂复合物的制备：用与BMPs体积质量比为10：1-1：10mL/mg的缓冲液将上一步得到的BMPs-磷脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：关锋，李想，杨刚龙，郭佳，刘昌梅，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32