一种基于免疫磁珠富集沙门氏菌的方法技术

本发明专利技术涉及一种基于免疫磁珠富集沙门氏菌的方法，属于微生物检测领域。本发明专利技术中免疫磁珠富集沙门氏菌的方法具体包括：（1）将待测样品用磷酸盐缓冲液制成待测样品匀液，吸取适量，加入到150～300µl磁珠中，37℃反应30～60min；（2）将其置于磁铁上作用2～3min，使磁铁充分吸附后，弃去悬浮液，加入1ml的PBS重复洗涤3次；（3）将富集后的沙门氏菌在XLT4琼脂培养基上培养24h，计数确定样品中沙门氏菌的数量；该方法特异性强，准确度高，检测时间短，操作简单，不需要大型仪器和特殊培训的专业人员，样品不需要特殊前处理，可应用于鸡蛋、畜禽组织、饲料、水、畜禽粪样中沙门氏菌的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物检测
，具体涉及一种基于免疫磁珠富集沙门氏菌的方法。
技术介绍
沙门氏菌（Salmonella）是肠杆菌科中一种重要的人畜共患、革兰氏阴性病原菌。动物源性沙门氏菌易引起摄食者急性腹泻，甚至暴发食物中毒，导致胃肠炎、伤寒及副伤寒，其中肉类和家禽类是沙门氏菌传播的主要媒介。近年来，沙门氏菌在全球范围内引起的危害呈不断上升趋势，公共卫生学上，具有十分重要的意义。沙门氏菌的检测难点在于含量低、干扰测定的基体成分复杂，给准确测定造成了很大的困难。因此，在国标的食品微生物检测方法中，采用两步增菌法以提高沙门氏菌的检出率，如利用缓冲蛋白胨水（BPW）进行预增菌后，采用亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）进行选择性增菌，并划线于木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）上。这个方法虽然能够在一定程度上选择性分离鉴定沙门氏菌，但是耗时长（约72h），操作繁琐，不利于快速检测及推广应用。免疫磁珠(Imrnunomagnetiebead,IMB)简称磁珠，它是20世纪70年代中期发展起来的一种新型免疫学技术，它以免疫学为基础，渗透到病理、药理、生理、微生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于免疫磁珠富集沙门氏菌的方法，其特征是：用于制备所述免疫磁珠的特异性抗体为沙门氏菌外膜蛋白OmpC免疫新西兰兔获得。

【技术特征摘要】
1.一种基于免疫磁珠富集沙门氏菌的方法，其特征是：用于制备所述免疫磁珠的特异性抗体为沙门氏菌外膜蛋白OmpC免疫新西兰兔获得。
2.一种基于免疫磁珠富集沙门氏菌的方法，其特征在于按如下步骤进行：
（1）将待测样品用磷酸盐缓冲液（0.01M～0.1M，PH6.0～7.4）制成一定比例的待测样品匀液，吸取100～200μl，加入到150～300μl磁珠中，37℃反应30～60min；
（2）将其置于磁铁上作用2～3min，使磁铁充分吸附后，弃去悬浮液，加入1ml的PBS（0.01M～0.1M，PH6.0～7.4...

【专利技术属性】
技术研发人员：王红宁，刘必慧，张安云，雷昌伟，丁梦蝶，张冬冬，杨永强，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川;51