血液待测体的处理方法技术

技术编号:11197906 阅读:127 留言:0更新日期:2015-03-26 04:34
本发明专利技术提供血液待测体的处理方法,所述方法能够在抑制过滤器的过滤面积的同时提高容易变形地漏过的稀少细胞或小的稀少细胞的回收率,并且能够活着回收所述细胞。在一种方式中,涉及分离或检测血液待测体中的稀少细胞的方法,所述方法包括:使用过滤器,对相对于所述过滤器的孔、6μl/孔以下的容量的血液待测体进行过滤处理,从而分离或检测稀少细胞,其中,所述过滤器以200个/mm2~40000个/mm2的孔密度含有短轴直径为3.0μm以上15μm以下且长轴直径为所述短轴直径的1.1倍~3倍的椭圆形或含有该椭圆且在夹着该椭圆的长轴的至少2点与该椭圆相接的形状的孔。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供,所述方法能够在抑制过滤器的过滤面积的同时提高容易变形地漏过的稀少细胞或小的稀少细胞的回收率,并且能够活着回收所述细胞。在一种方式中,涉及分离或检测血液待测体中的稀少细胞的方法,所述方法包括:使用过滤器,对相对于所述过滤器的孔、6μl/孔以下的容量的血液待测体进行过滤处理,从而分离或检测稀少细胞,其中,所述过滤器以200个/mm2~40000个/mm2的孔密度含有短轴直径为3.0μm以上15μm以下且长轴直径为所述短轴直径的1.1倍~3倍的椭圆形或含有该椭圆且在夹着该椭圆的长轴的至少2点与该椭圆相接的形状的孔。【专利说明】
本公开涉及,分离血液待测体中的稀少细胞的方法,血中 循环肿瘤细胞的数量测定或分析方法,以及其中使用的过滤器和稀少细胞捕获装置。
技术介绍
虽然血液的细胞成分主要是红血球、白血球、血小板,但是在血液中有时存在除此 以外的细胞。作为其一例,可以举出血中循环肿瘤细胞/CTC(CirculatingTumorCell)。 认为癌的转移由癌细胞通过血管或淋巴管被运送到体内的其它部位并增殖引起。并且,报 告了血液中的CTC数与癌的转移的可能性和预后有关,已知为了作为癌(特别是乳癌等转 移性的癌)的诊断、预后诊断和治疗效果的预测或判定的指标,而测定血液中的CTC数的 计数、CTC的核酸,关于其分离、浓缩提出、研究了各种手法(非专利文献1?16、专利文献 1?4等)。 在先技术文献 专利文献 专利文献1 :日本专利第5086241号 专利文献2 :日本专利文献特开2011-163830号公报 专利文献3 :日本专利文献特开2013-17429号公报 专利文献4 :日本专利文献特表2010-530234号公报 非专利文献 非专利文献1:EFRATDOTAN,STEVENJ.COHEN,KATHERINER.ALPAUGH,NEAL J.MER0P0L.EvolvingEvidenceandFutureChallenges.Theoncologist2009 ; 14 ; 1070-1082 非专利文献2:MartinVM,SiewertC,ScharlA,HarmsT,HeinzeR,OhlS, RadbruchA,MiltenyiS,SchmitzJ.Immunomagneticenrichmentofdisseminated epithelialtumorcellsfromperipheralbloodbyMACS.ExpHematol. 1998Mar; 26(3) :252-64. 非专利文献3 :L.Yang,J.C.Lang,P.Balasubramanian,K.R.Jatana,D.Schuller, etal.OptimizationofanEnrichmentProcessforCirculatingTumorCellsFrom theBloodofHeadandNeckCancerPatientsThroughDepletionofNormalCells. BiotechnolBioeng; 102 (2) :521-534 (2009) 非专利文献4:RalfGertler,RobertRosenberg,KatrinFuehrer,Michael Dahm,HjalmarNekarda,JoergRuedigerSiewertDetectionofCirculatingTumor CellsinBloodUsinganOptimizedDensityGradientCentrifugationRecent ResultsinCancerResearchVolume162,2003,pp149-155 非专利文献5 :M.K.Baker,K.Mikhitarian,W.Osta,etal.Moleculardetection ofbreastcancercellsintheperipheralbloodofadvanced-stagebreastcancer patientsusingmultimarkerreal-timereversetranscription-polymerasechain reactionandanovelporousbarrierdensitygradientcentrifugationtechnology. ClinCancerRes;9 :4865-4871 (2003) 非专利文献6:RostagnoP,MollJL,BisconteJC,CaldaniC.Detectionofrare circulatingbreastcancercellsbyfiltrationcytometryandidentificationbyDNA content:sensitivityinanexperimentalmodel.AnticancerRes. 1997,17,2481-2485 非专利文献 7 :G.Vona,A.Sabile,M.Louha,etal.Isolationbysizeof epithelialtumorcells:anewmethodfortheimmunomorphologicalandmolecular characterizationofcirculatingtumorcells.AmJPathol;156 :57_63 (2000) 非专利文献 8 :F.Farace,C.Massard,N.Vimond,F.Drusch,etal.Adirect comparisonofCellSearchandISETforcirculatingtumour-celldetectionin patientswithmetastaticcarcinomas.BrJCancer; 105 (6) :847-853 (2011) 非专利文献 9 :S.Zheng,H.Lin,J.Q.Liu,etal.Membranemicrofilterdevice forselectivecapture,electrolysisandgenomicanalysisofhumancirculating tumorcells.JChromatogrA;1162 :154-61 (2007) 非专利文献 10 :H.K.Lin,S.Zheng,A.J.Williams,etal.Portablefilter-based microdevicefordetectionandcharacterizationofcirculatingtumorcells.Clin CancerRes;16(20) :5011-5018(2010) 非专利文献 11:HosokawaM,HayataT,FukudaY,ArakakiAi,etal.Anal. Chem. ,2010,82(15),pp6629-6635Size_SelectiveMicrocavityArrayforRapidand EfficientDetectionofCirculatingTumorC本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血液待测体中的稀少细胞的分离或检测方法,包括:使用过滤器,以相对于所述过滤器的孔的过滤器处理容量换算成血液为6μl/孔以下的容量的方式来对血液待测体进行过滤器处理,从而分离或检测稀少细胞,其中,所述过滤器以200个/mm2~40000个/mm2的孔密度含有短轴直径为3.0μm以上15μm以下且长轴直径为所述短轴直径的1.1倍~3倍的椭圆形或含有该椭圆且在含有该椭圆的长轴的两端的至少2点与该椭圆相接的形状的孔。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:高木英纪
申请(专利权)人:爱科来株式会社
类型:发明
国别省市:日本;JP

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