电泳用器具、电泳装置、样本导入方法以及样本分离方法制造方法及图纸

本发明专利技术提供一种电泳用器具，能够再现性较好地、容易地进行基于等电点电泳的生物体样本分离。电泳用器具(10)具备电泳用腔室(1)，电泳用腔室(1)设置通过电泳来分离生物体样本的样本分离介质(42)。在电泳用腔室(1)的设置样本分离介质(42)的设置面(1a)上，设置有用于注入包含生物体样本的样本溶液的凹坑(2)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及能够理想地适用于生命科学技术中的生物体样本的二维电泳的电泳用器具、电泳装置、样本导入方法以及样本分离方法。
技术介绍
二维电泳一般分辨率较高，因而作为蛋白质等生物体样本的分离方法，是一种优秀的方法。在利用二维电泳分离蛋白质的情况下，利用等电点电泳来进行向一维方向的分离。等电点电泳是对凝胶施加电压，利用蛋白质的等电点的不同来进行分离的方法。另外，在向二维方向的分离中，广泛利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，该SDS-PAGE使用作为阴离子系界面活性剂的十二烷基硫酸钠(SDS)。二维电泳能够一次分离很多蛋白质，进行全面分析，因此在蛋白质组分析中得到广泛利用。等电点电泳的现有技术有两种方法，第一种方法是用包含生物体样本的溶胀液使干胶条凝胶溶胀，移动到凝胶胶条容器中进行等电点电泳，第二种方法是预先仅用溶胀液使干胶条凝胶溶胀，移动到凝胶胶条容器之后，在样品杯中加入生物体样本以进行等电点电泳。后者称为杯上样(cup loading)法，由于在施加电压的同时进行生物体样本的导入，所以生物体样本的导入效率良好，由于能够从某个区域(酸侧或碱侧)导入生物体样本，所以移动距离较长，提高了分辨率，因此这种方法用于临床样本的二维电泳等(参考专利文献1)。一般而言，利用上述杯上样法的等电点电泳首先在专用腔室中加入包含尿素、硫脲、3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐(CHAPS)、二>硫苏糖醇(DTT)、载体两性电解质(carrier ampholyte)的水溶液，浸泡对聚丙烯酰胺凝胶进行了pH梯度固定化和干燥得到的干胶条凝胶(IPG凝胶)，浸泡时凝胶面朝下。为了防止干燥，加入石蜡油等覆盖溶液，静置数小时以溶胀(再水化)上述IPG凝胶。接着，从上述腔室中取出IPG凝胶，凝胶面朝上地设置到等电点电泳用的腔室中，并在IPG凝胶的上方设置湿滤纸和电极。随后，在凝胶上的任意位置处设置样品杯，在样品杯内添加包含生物体样本的样本溶液，加入上述覆盖油。在无样品杯区域的凝胶上也加入覆盖油，从而使凝胶不会暴露在空气中，施加电压以开始等电点电泳。现有技术文献专利文献专利文献1：日本公开专利公报“特表2008-510481号公报(2008年4月10日公开)”
技术实现思路
专利技术要解决的课题在利用上述杯上样法的等电点电泳中，在IPG凝胶的溶胀工序中，在尺寸不稳定的IPG凝胶的上方即使滴下溶胀液，也不会均匀地进行溶胀，因此一般使凝胶面朝下。另外，在施加电压的工序中，需要在生物体样本上添加覆盖溶液，因而需要使凝胶面朝上。此外，IPG凝胶不处于溶胀的状态时，无法不留间隙地设置样品杯。根据上述理由，需要在IPG凝胶溶胀之后移动IPG凝胶。另外，如上所述，凝胶包含较多生物体样本和水分，需要用于防止该凝胶的干燥的覆盖溶液(一般是石蜡油等)，此外，样品杯内的生物体样本以高浓度存在，因此通常在样品杯与凝胶之间插入用于除去沉淀的不纯物质的过滤器(滤纸等)。这种覆盖溶液、样品杯、过滤器等的设置工作要求使用者较为熟练，对研究者的电泳分离图形的再现性产生影响。在这种背景下，需要一种能够再现性较好地、容易地进行基于等电点电泳的生物体样本分离的方法。本专利技术的目的在于提供一种电泳用器具、电泳装置、样本导入方法以及样本分离方法，能够再现性较好地、容易地进行基于等电点电泳的生物体样本分离。用于解决课题的手段本专利技术的一技术方案的电泳用器具具备电泳用腔室，所述电泳用腔室具有：设置通过电泳来分离生物体样本的样本分离介质的设置面；以及与所述样本分离介质的两端部连接的第一电极和第二电极，在所述电泳用腔室的所述设置面上，设置有用于注入包含所述生物体样本的样本溶液的凹坑。本专利技术的一技术方案的样本导入方法，在通过电泳来分离生物体样本的样本分离介质中导入所述生物体样本，包括：第一步骤，对电泳用腔室的样本保持部供给包含所述生物体样本的样本溶液，所述电泳用腔室具有：设置所述样本分离介质的设置面、以及与所述样本分离介质的两端部连接的第一电极和第二电极，所述样本保持部设置在所述设置面上，所述样本保持部抑制所述样本溶液的扩大润湿的同时保持所述样本溶液；以及第二步骤，使所述样本分离介质接触对所述样本保持部供给了的所述样本溶液，在所述样本分离介质中导入所述生物体样本。专利技术效果根据本专利技术，能够提供一种电泳用器具、电泳装置、样本导入方法以及样本分离方法，能够再现性较好地、容易地进行基于等电点电泳的生物体样本分离。附图说明图1是表示第一实施方式的电泳装置的概略结构的图。图2是表示电泳装置中设置了IEF芯片后的状态的图。图3是电泳用器具的俯视图及剖视图。图4是样本导入方法的说明图。图5是样本导入方法的说明图。图6是第二实施方式的电泳用器具的俯视图及剖视图。图7是样本导入方法的说明图。图8是样本导入方法的说明图。图9是样本导入方法的其它例子的说明图。图10是样本导入方法的其它例子的说明图。图11是第三实施方式的电泳用器具的俯视图及剖视图。图12是第四实施方式的电泳用器具的俯视图及剖视图。图13是第五实施方式的电泳用器具的俯视图及剖视图。图14是表示实施例及比较例的二维电泳的图形的图。图15是表示第六实施方式的电泳装置的概略结构的图。图16是表示电泳装置中设置了IEF芯片后的状态的图。图17是电泳用器具的俯视图及剖视图。图18是样本导入方法的说明图。图19是样本导入方法的说明图。图20是说明在使样本分离介质紧靠样本保持部与不使样本分离介质紧靠样本保持部的情况下，对样本分离介质施加的电压的均匀性如何变化的图。图21是第七实施方式的电泳用器具的俯视图及剖视图。图22是样本导入方法的说明图。图23是样本导入方法的说明图。图24是说明在使样本分离介质紧靠样本保持部与不使样本分离介质紧靠样本保持部的情况下，对样本分离介质施加的电压的均匀性如何变化的图。图25是第八实施方式的电泳用器具的俯视图及剖视图。图26是样本导入方法的说明图。图27是样本导入方法的说明图。图28是表示电泳用器具中设置的样本保持部的其它变形的一例的俯视图。具体实施方式第一实施方式图1是表示第一实施方式的电泳装置12的概略结构的图。图2是表示电泳装置12中设置了IEF(IsoElec本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种电泳用器具，具备电泳用腔室，所述电泳用腔室具有：设置通过电泳来分离生物体样本的样本分离介质的设置面；以及与所述样本分离介质的两端部连接的第一电极和第二电极，在所述电泳用腔室的所述设置面上，设置有用于注入包含所述生物体样本的样本溶液的凹坑。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.06.29 JP 2012-147315;2012.06.29 JP 2012-147681.一种电泳用器具，具备电泳用腔室，所述电泳用腔室具有：设置
通过电泳来分离生物体样本的样本分离介质的设置面；以及与所述样本分
离介质的两端部连接的第一电极和第二电极，
在所述电泳用腔室的所述设置面上，设置有用于注入包含所述生物体
样本的样本溶液的凹坑。
2.根据权利要求1所述的电泳用器具，其特征在于，
所述凹坑设置在与所述第二电极相比更靠近所述第一电极的一侧，或
者设置在与所述第一电极相比更靠近所述第二电极的一侧。
3.根据权利要求1所述的电泳用器具，其特征在于，
所述凹坑形成在夹持所述电泳用腔室的中心部从靠近所述第一电极
的一侧到靠近所述第二电极的一侧。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的电泳用器具，其特征在于，
所述凹坑的容积小于注入所述凹坑的所述样本溶液的体积。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的电泳用器具，其特征在于，
所述样本分离介质是溶胀了的凝胶。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的电泳用器具，其特征在于，
所述电泳用腔室的至少一部分形成为与所述样本分离介质大致相同
的宽度。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的电泳用器具，其特征在于，
所述凹坑的至少一部分以比所述样本分离介质宽的宽度形成。
8.一种电泳装置，具备：
权利要求1至7中任一项所述的电泳用器具；以及
将所述样本分离介质设置到所述电泳用腔室的搬运臂。
9.根据权利要求8所述的电泳装置，其特征在于，
具备设置所述样本分离介质的第二电泳用腔室，
所述搬运臂在所述电泳用腔室与所述第二电泳用腔室之间搬运所述
样本分离介质。
10.根据权利要求9所述的电泳装置，其特征在于，
具备第三电泳用腔室，所述第三电泳用腔室具有：设置所述样本分离
介质的平坦的设置面；以及与所述样本分离介质的两端部连接的第一电极
和第二电极，
所述搬运臂在所述第三电泳用腔室与所述第二电泳用腔室之间搬运
所述样本分离介质。
11.一种样本导入方法，在通过电泳来分离生物体样本的样本分离介
质中导入所述生物体样本，包括：
第一步骤，在具有设置所述样本分离介质的设置面、与所述样本分离
介质的两端部连接的第一电极和第二电极、以及设置于所述设置面上的凹
坑的电泳用腔室的所述设置面的凹坑中，注入包含所述生物体样本的样本
溶液；以及
第二步骤，使所述样本分离介质接触所述凹坑中注入的所述样本溶
液，在所述样本分离介质中导入所述生物体样本。
12.根据权利要求11所述的样本导入方法，其特征在于，
在所述第二步骤中，在所述第一电极与所述第二电极之间施加电压的
同时使所述样本溶液接触所述样本分离介质。
13.一种样本分离方法，包括：
样本导入步骤，使用权利要求11或12所述的样本导入方法在所述样
本分离介质中导入所述生物体样本；以及
第一电泳步骤，在所述第一电极与所述第二电极之间施加电压，通过
等电点电泳来分离所述生物体样本。
14.根据权利要求13所述的样本分离方法，其特征在于，还包括：
搬运步骤，将通过所述第一电泳步骤进行了所述生物体样本的分离的
所述样本分离介质，搬运到第二电泳用腔室；以及
第二电泳步骤，对搬运到所述第二电泳用腔室的所述样本分离介质施
加电压，通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳来分离所述生物体样本。
15.一种样本分离方法，包括：
样本导入步骤，使用权利要求11或12所述的样本导入方法在所述样
本分离介质中导入所述生物体样本；以及
第一电泳步骤，在具有设置所述样本分离介质的平坦的设置面、以及

\t与所述样本分离介质的两端部连接的第一电极和第二电极的第三电泳用
腔室中设置所述样本分离介质，在使所述样本分离介质紧靠所述第三电泳
用腔室的所述设置面的状态下，在所述第三电泳用腔室的所述第一电极与
所述第二电极之间施加电压，通过等电点电泳来分离所述生物体样本。
16.根据权利要求15所述的样本分离方法，其特征在于，包括：
搬运步骤，将通过所述第一电泳步骤进行了所述生物体样本的分离的
所述样本分离介质，搬运到第二电泳用腔室；以及
第二电泳步骤，对...

【专利技术属性】
技术研发人员：绿川宇一，木下英树，鹈沼丰，丸尾祐二，
申请(专利权)人：夏普株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP