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一种重组表达葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母及其应用制造技术

技术编号:11061369 阅读:147 留言:0更新日期:2015-02-19 04:52
本发明专利技术公开了一种重组表达葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母及其应用,属于生物技术领域。本发明专利技术通过构建重组质粒pINA1297-GOD,醋酸锂转化法转化解脂耶氏酵母po1h,筛选获得了具有较好产酶能力的重组菌株。该菌株在以蔗糖为唯一碳源,发酵168h后,葡萄糖氧化酶酶活力达到13.9U/ml,与原黑曲霉相比,提高了两倍。

【技术实现步骤摘要】
-种重组表达葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母及其应用
本专利技术涉及一种重组表达葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母及其应用,属于生物技术 领域。
技术介绍
葡萄糖氧化酶佑Iucose Oxidase,简称G0D,E. C. 1. 1. 3. 4)是一种黄素糖蛋白,在 有氧条件下能专一性地催化目-D-葡糖生成葡萄糖酸和过氧化氨。GOD广泛分布于动植物 和微生物体内。由于微生物生长繁殖快、来源广,是生产GOD的主要来源,主要生产菌株为 黑曲霉和青霉。目前GOD的应用领域不断拓展,国内外市场需求量急剧增加。目前GOD的 应用领域不断拓展,国内外市场需求量急剧增加。目前GOD基因已经在毕赤酵母GS115、大 肠杆菌、瑞氏木霉等中得到表达,但还未见其在非常规酵母解脂耶氏酵母中进行表达研究, 而解脂耶氏酵母被认为是安全的,因此,能用于食品和药物生产上。 [000引解脂耶氏酵母化Id菌系中,编码能水解其它蛋白质的AEP基因被剔除,使得外源 蛋白能更好地表达。人们将化Id系改造,生成一系列的派生菌系,如化化、Polg、化If。 Po化、化Ig在化Id系基础上进行改造,只有一个营养缺陷本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株能够高产葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母重组菌,其特征在于,是以解脂耶氏酵母Po1h为宿主,以pINA1297为载体表达编码葡萄糖氧化酶的基因。

【技术特征摘要】
1. 一株能够高产葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母重组菌,其特征在于,是以解脂耶氏酵 母Polh为宿主,以PINA1297为载体表达编码葡萄糖氧化酶的基因。2. 根据权利要求1所述的重组菌,其特征在于,所述葡萄糖氧化酶基因来源黑曲霉 Aspergillus niger CCTCC NO :M2011291〇3. 根据权利要求1所述的重组菌,其特征在于,所述葡萄糖氧化酶基因的核苷酸序列 如 SEQ ID NO. 1 所示。4. 一种构建权利要求1所述解脂耶氏酵母重组菌的方法,其特征在于,主要包括以下 步骤:(1)构建重组表达载体PINA1297-G0D ; (2)醋酸锂法转化解脂耶氏酵母Polh ; (3)筛 选验证重组菌株。5....

【专利技术属性】
技术研发人员:陈坚刘晓筱张娟堵国成顾磊
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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