一种大叶白蜡再生植株的快速繁殖方法技术

本发明专利技术涉及一种大叶白蜡植株再生的快速繁殖方法，包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽。采用本发明专利技术的大叶白蜡组培诱导率高，再生率高，且生长快速，遗传稳定性好，可以短期内获得大量的大叶白蜡幼苗。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种大叶白蜡植株再生的快速繁殖方法，包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽。采用本专利技术的大叶白蜡组培诱导率高，再生率高，且生长快速，遗传稳定性好，可以短期内获得大量的大叶白蜡幼苗。【专利说明】
本专利技术涉及大叶白蜡组织培养的快繁方法，属于植物
。
技术介绍
大叶白腊/7Tarizw1Samericana L var juglandifolia 又名花曲柳,木犀科涔属，落叶乔木，喜光，耐寒。对土壤要求不严。产黄河流域各省和东北三省。生山坡、河岸、路旁，海拔1500m以下。俄罗斯、朝鲜也有分布。木材硬而致密，为制家具的好材料。树生长较快，可用行道树；种子油供制肥皂用。树皮含有苦芩甙、丁香甙、槲皮素，鞣质等可做药用，清肝明目，收敛止痢。主治风毒赤眼，慢性痢疾。目前市场上对大叶白蜡的需求量很大，大叶白蜡主要采用常规种植方法，使用组培技术对其进行快繁，可以显著缩短周期，保持遗传稳定性，满足市场的需要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种大叶白蜡的快速繁殖方法，由该方法所制备得到的大叶白蜡组培诱导率高，再生率高，且生长快速，遗传稳定性好，可以短期内获得大量的大叶白蜡幼苗。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:取大叶白蜡幼嫩叶片，在含抑菌剂的洗洁精中浸泡15min，流水冲洗20min，超净工作台上1%高锰酸钾处理lOmin，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的大叶白蜡叶片接入培养基为PDA+2，4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/1诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照15001x，温度21 ± I °C，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基改良PDA+6-BA0.3-0.5mg/L+TDZ0.1-0.5mg/L,附加蔗糖40g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照30001x，温度23土 1°C，分化培养出来的大叶白蜡芽苗放入生根培养基 1/2⑶+ΝΑΑ0.01-0.02mg/L,附加蔗糖 20g/L,琼脂 6.0g/L, PH5.83，光照 60001x,温度 23± 1°C,将生长良好、植株健壮根系发达的试管苗，打开瓶盖，洗去根部培养基，栽植于泥炭土:锯末=2:1的基质中，基质使用高压灭菌锅121°C高压灭菌20min，浇足水后覆盖聚乙烯膜小拱棚，放入温室，湿度保持在90%。 采用本专利技术制备的大叶白蜡成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1取大叶白蜡幼嫩叶片，在含抑菌剂的洗洁精中浸泡15min，流水冲洗20min，超净工作台上1%高锰酸钾处理lOmin，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的大叶白蜡叶片接入培养基为PDA+2，4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照15001x，温度21 土 1°C，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基改良 PDA+6-BA0.3mg/L+TDZ0.lmg/L,附加蔗糖 40g/L，琼脂 6.0g/L, PH5.83，光照30001x，温度23土1°C，分化培养出来的大叶白蜡芽苗放入生根培养基1/2⑶+NAA0.0lmg/L,附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照60001x，温度23± I°C，将生长良好、植株健壮根系发达的试管苗，打开瓶盖，洗去根部培养基，栽植于泥炭土:锯末=2:1的基质中，基质使用高压灭菌锅121°C高压灭菌20min，浇足水后覆盖聚乙烯膜小拱棚，放入温室，湿度保持在90%，成活率89%。 实施例2取大叶白蜡幼嫩叶片，在含抑菌剂的洗洁精中浸泡15min，流水冲洗20min，超净工作台上1%高锰酸钾处理lOmin，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的大叶白蜡叶片接入培养基为PDA+2，4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/1诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照15001x，温度21 ± I °C，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基改良 PDA+6-BA0.4mg/L+TDZ0.3mg/L,附加蔗糖 40g/L，琼脂 6.0g/L, PH5.83，光照30001x，温度23土 1°C，分化培养出来的大叶白蜡芽苗放入生根培养基1/2⑶+ΝΑΑ0.02mg/L,附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照60001x，温度23土 1°C，将生长良好、植株健壮根系发达的试管苗，打开瓶盖，洗去根部培养基，栽植于泥炭土:锯末=2:1的基质中，基质使用高压灭菌锅121°C高压灭菌20min，浇足水后覆盖聚乙烯膜小拱棚，放入温室，湿度保持在90%，成活率90%。 实施例3取大叶白蜡幼嫩叶片，在含抑菌剂的洗洁精中浸泡15min，流水冲洗20min，超净工作台上1%高锰酸钾处理lOmin，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的大叶白蜡叶片接入培养基为PDA+2，4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照15001x，温度21 土 1°C，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基改良 PDA+6-BA0.5mg/L+TDZ0.5mg/L,附加蔗糖 40g/L，琼脂 6.0g/L, PH5.83，光照30001x，温度23土1°C，分化培养出来的大叶白蜡芽苗放入生根培养基1/2⑶+ΝΑΑ0.02mg/L,附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照60001x，温度23± I°C，将生长良好、植株健壮根系发达的试管苗，打开瓶盖，洗去根部培养基，栽植于泥炭土:锯末=2:1的基质中，基质使用高压灭菌锅121°C高压灭菌20min，浇足水后覆盖聚乙烯膜小拱棚，放入温室，湿度保持在90%，成活率88%。【权利要求】1.，包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取大叶白蜡的幼嫩叶片，对其进行消毒处理； (2)将步骤(I)消毒处理过的大叶白蜡叶片接入培养基为PDA+2，4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/1诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L, PH5.83，光照 15001x，温度 21±1°C ； (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入分化培养基改良PDA+6-BA0.3-0.5mg/L+TDZ0.1-0.5mg/L，附加蔗糖 40g/L，琼脂 6.0g/L, PH5.83，光照 30001x，温度 23±1°C ; (4)取步骤(3)分化培养出来的大叶白蜡芽苗放入生根培养基1/2⑶+ΝΑΑ0.01-0.02mg/L,附加蔗糖 20g/L，琼脂 6.0g/L, PH5.83，光照 60001x，温度 23±1°C ; (5)取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大叶白蜡再生植株的快速繁殖方法，包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下：（1）取大叶白蜡的幼嫩叶片，对其进行消毒处理；（2）将步骤（1）消毒处理过的大叶白蜡叶片接入培养基为PDA+2，4‑D4.0mg/L+6‑BA0.2mg/l+VC5.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L，PH5.83，光照1500lx，温度21±1℃；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入分化培养基改良PDA+6‑BA0.3‑0.5mg/L+TDZ0.1‑0.5mg/L，附加蔗糖40g/L，琼脂6.0g/L，PH5.83，光照3000lx，温度23±1℃；（4）取步骤（3）分化培养出来的大叶白蜡芽苗放入生根培养基1/2GD+NAA0.01‑0.02mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂6.0g/L，PH5.83，光照6000lx，温度23±1℃；（5）取步骤（4）生根后的大叶白蜡试管苗进行炼苗移栽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨存，
申请(专利权)人：南京通泽农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32