基于高通量测序技术的全血免疫组库探测方法技术

本发明专利技术提供了基于高通量测序技术的全血免疫组库探测方法，该方法包括以下步骤：(1)全血样本中直接提取RNA(2)从RNA逆转录产生单链cDNA，将寡核苷酸接头序列连接到单链cDNA的3'末端，采用通用引物和序列为GAC CTC GGG TGG GAA CAC的特殊靶向引物P-VDJ为PCR反应的特殊引物对、连接寡核苷酸接头序列后的单链cDNA为PCR模板进行PCR反应，对免疫受体基因组进行扩增(3)高通量测序。该方法所用RNA直接从全血液样本中提取更适用于临床，使用单一的靶特异性引物，去均一地扩增亚型T细胞受体基因的可变区域，通过Illumina公司的Hi-SEQ 2500加条形码方式测序，确保了相对较低的成本,少于48小时的测序时间和良好的测序深度。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
基于高通量测序技术的全血免疫组库探测方法，该方法包括以下步骤：(1)全血样本中直接提取RNA；(2)从RNA逆转录产生单链cDNA，将寡核苷酸接头序列连接到单链cDNA的3'末端，采用通用引物和序列为GAC CTC GGG TGG GAA CAC的特殊靶向引物P‑VDJ为PCR反应的特殊引物对、连接寡核苷酸接头序列后的单链cDNA为PCR模板进行PCR反应，对免疫受体基因组进行扩增；(3)高通量测序。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王凯，高帆，
申请(专利权)人：武汉凯吉盈科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42