本发明专利技术属于体外诊断领域，具体涉及一种能定量检测血液传染病多指标的量子点标记试条及其方法。所述试条的标记垫（3）包被有量子点标记的HBsAg单抗、HIVAg、HCVAg和TPAg的混合物，分析膜（7）的T带（4）包被有HBsAg单抗、HIVAg、鼠抗人抗体和TPAg的混合物，分析膜（7）的C带（5）包被有二抗。各被检物标准曲线采用电子标签进行储存并安装在试条上。所述试条采用具有信号检测功能的检测仪读取电子标签存贮的标准曲线并结合检测仪测得的待测样品对应的荧光强度而同步定量检测样品中的HBsAg、HIVAb、HCVAb、TPAb浓度。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术属于体外诊断领域，具体涉及一种。所述试条的标记垫（3）包被有量子点标记的HBsAg单抗、HIVAg、HCVAg和TPAg的混合物，分析膜（7）的T带（4）包被有HBsAg单抗、HIVAg、鼠抗人抗体和TPAg的混合物，分析膜（7）的C带（5）包被有二抗。各被检物标准曲线采用电子标签进行储存并安装在试条上。所述试条采用具有信号检测功能的检测仪读取电子标签存贮的标准曲线并结合检测仪测得的待测样品对应的荧光强度而同步定量检测样品中的HBsAg、HIVAb、HCVAb、TPAb浓度。【专利说明】
本专利技术属于体外诊断领域，具体涉及一种。
技术介绍
乙肝、丙肝、艾滋病和梅毒是与血液安全相关的4种常见传染病。我国卫生部规定，献血员必须检查乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、丙肝病毒抗体(HCVAb)、艾滋病毒抗体(HIVAb)、梅毒螺旋体抗体(TPAb)，所有医院和血液制品用血也必须检查上述4种血液传染病。 目前，对上述4种血液传染病检测常采用酶联免疫吸附方法(ELISA)和胶体金免疫层析方法(Gold-1mmunochromatography Assay, GICA)。这些方法存在诸多不足:ELISA方法检测样品:①待检样品需要离心机先分离出血清，需要使用孵育箱、酶标仪、洗板机等仪器设备；②每次只能检测一种指标检测过程复杂，耗时，每一指标检测至少需要40-60分钟；④检测一般需要攒够一定数量的样品才能进行；⑤不能实现现场快速检测。GICA方法虽然能实现样品现场快速检测，但一次只能检测样品中的一种指标，而且只能定性检测而不能定量检测样品。 样品多种组分同步检测，特别是多种组分同步快速定量检测，对检测领域样品分析具有非常重要意义，其是人们一直追求的目标，是人们长期渴望解决而未能解决的问题。传统上测定混合体系中样品多种组分含量，多采用平行单组分分析法，即每个分析流程只测定其中一种组分含量，多次平行执行该流程，最后得到所有所需组分含量。分析所需时间长，消耗试剂多，分析通量低，劳动量大。 近年发展的纳米量子点(quantum dots, QDs)突光发光效率高,激发谱线范围宽，能“一元激发，多元发射”，发射谱线范围窄且对称，光漂白速度慢，荧光寿命长，粒径与生物分子相近，表面修饰后能多功能化，不同粒径和种类的量子点混合物产生的特征波长荧光光谱不交叠，非常适用于样品多组分分析。 本专利技术结合QDs多组分分析的独特优势和免疫层析技术简单快速优势，公开一种，以解决乙肝、丙肝、梅毒和艾滋病4种血液传染病指标同步定量问题。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是公开一种能定量检测血液传染病多指标的量子点标记试条，本专利技术的第二个目的是公开所述试条的制备方法、标准曲线制作方法、以及用所述试条同步定量检测血液样品HBsAg、HIVAb、HCVAb、TPAb的方法。 本专利技术上述目的是通过如下技术方案实现的:所述的能定量检测血液传染病多指标的量子点标记试条，包括顺次搭接固定在底衬8上的样品垫1、红细胞滤膜2、标记垫3、分析膜7、吸水垫6。 所述标记垫3为玻璃纤维膜。所述分析膜7为硝酸纤维素膜、尼龙膜、或硝酸纤维素/醋酸纤维素混合膜，其上具有检测带(即T带)4和质控带(即C带)5。所述底衬8为聚脂或塑料板。 所述标记垫3包被有量子点a标记的HBsAg单抗、量子点b标记的HIVAg、量子点c标记的HCVAg、量子点d标记的TPAg的混合物。所述分析膜7的T带4包被有HBsAg单抗、HIVAg、鼠抗人抗体和TPAg的混合物。所述分析膜7的C带5包被有二抗。 本专利技术所述试条的标记垫3的量子点包括ZnS、CdS、HgS、ZnSe、CdSe、HgSe、CdTe、ZnTe、ZnO、PbSe、HgTe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/PbS、CdS/Cd (OH)2,CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CuSe、CdSe/HgTe、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdTe/HgS、CdTe/HgTe、InAs/InP、InAs/CdSe、InAs/ZnSe、MgS、MgSe、MgTe、CaS, CaSe, CaTe, SrS, SrSe, SeTe、BaS、BaSe> BaTe> CdS:Mn> ZnS:Mn> CdS:Cu> ZnS:Cu> CdS:Tb> ZnS:Tb 中的任意一种或任意几种纳米粒子的组合，以及由上述任意一种量子点为核、二氧化硅为壳的核-壳型纳米复合粒子。 本专利技术所述的能定量检测血液传染病多指标的量子点标记试条的制备方法包括下述步骤:A.量子点偶联相关抗体/抗原:a)取水溶性量子点用磷酸缓冲液(PBS)调pH=6-9，加入EDC(1_(3_ 二甲基氨丙基)-3-乙基碳二胺盐酸盐)和NHS (N-羟基硫代琥珀酸亚胺)室温活化10-60min ；b)加被检物相应抗体/抗原旋涡振荡反应0.5-3h ；c)加入牛血清白蛋白(BSA)，避光封闭反应0.5-2h;d)离心纯化产物； 取沉淀用PBS缓冲液重悬分散，4°C保存。 B.试条组件制备: a)样品垫1:选用纤维素膜作材料切成一定规格的膜块，将该膜块放入含有 0.1%-10%BSA和0.01%-10%Tween 20的磷酸缓冲液(PBS)中浸泡，取出，干燥备用。 b)红细胞滤膜2:选红细胞滤膜切成一定规格膜块，干燥备用。 c)标记垫3:选用玻璃纤维膜切成一定规格的膜块,加量子点a标记的HBsAg单抗、量子点b标记的HIVAg、量子点c标记的HCVAg和量子点d标记的TPAg的混合物溶液于该膜块上，干燥膜块备用。 d)分析膜7:选用纤维素膜切成一定规格的膜块，自膜块底边起由下自上相隔一定距离分别喷点HBsAg单抗(0.5-10mg/ml)、HIVAg (0.5-lOmg/ml)、鼠抗人抗体(0.5-10mg/ml)和 TPAg (0.5-lOmg/ml)的混合物作 T 带 4,喷点 0.5-lOmg/ml 二抗作 C 带5，干燥膜块备用。 吸水垫6:选用具有吸水作用的纤维膜切成一定规格的膜块，干燥备用。 C.试条组件组装:上述制备好的试条组件按样品垫1、红细胞滤膜2、标记垫3、分析膜7、吸水垫6顺次搭接粘贴于底衬8上，切成一定规格的试条，装入塑料盒中，与干燥剂一起装入铝箔袋内密封储存。 本专利技术所述的能定量检测血液传染病多指标的量子点标记试条定量检测血液传染病4项指标用的标准曲线的制备方法包括如下步骤:Ca)配制HBsAg、HIVAb, HCVAb、TPAb标准品系列浓度，并滴加到量子点免疫层析试条上。 (b)用检测仪分别读取T带的荧光强度(ODt)和C带的荧光强度(0D。)，计算获得ODtADc 比值或 ODt/ (0Dt+0Dc)比值。 rc；以标准品系列浓度作X轴，0Dt/0Dc比值作Y轴，或以标准品系列浓度作X轴，ODt/ (0Dt+0Dc)比值作本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种能定量检测血液传染病多指标的量子点标记试条，包括顺次搭接固定在底衬（8）上的样品垫（1）、红细胞滤膜（2）、标记垫（3）、分析膜（7）、吸水垫（6），分析膜（7）具有T带（4）和C带（5），其特征在于：标记垫（3）包被有量子点a标记的HBsAg单抗、量子点b标记的HIVAg、量子点c标记的HCVAg和量子点d标记的TPAg的混合物，分析膜（7）的T带（4）包被有HBsAg单抗、HIVAg、鼠抗人抗体和TPAg的混合物，分析膜（7）的C带（5）包被有二抗。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：侯飞，王春英，马义才，熊妮娅，
申请(专利权)人：成都领御生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51
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