一种鸡肿头综合症疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术的目的在于提供一种鸡肿头综合症疫苗及其制备方法，从而弥补现有技术的不足。本发明专利技术的鸡肿头综合症疫苗，是以保藏编号为CGMCC No.9001的禽肺病毒为抗原制备的。发明专利技术疫苗所使用的禽肺病毒具有安全性好，免疫原性高的特点。本发明专利技术的疫苗能提高SPF鸡的抗体，预防禽肺病毒引起的肿头、产蛋率下降等症状，此疫苗具有高效、安全性好的优点。使用效果表明，疫苗在14天就能达到100％阳性，而进口苗只有40％。且抗体均值本发明专利技术的疫苗达到5.7496，而进口苗为0.08707；21天抗体均值本发明专利技术的疫苗为11.9466，而进口苗为1.6595，高于国外疫苗5～10倍。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术的目的在于提供，从而弥补现有技术的不足。本专利技术的鸡肿头综合症疫苗，是以保藏编号为CGMCC?No.9001的禽肺病毒为抗原制备的。专利技术疫苗所使用的禽肺病毒具有安全性好，免疫原性高的特点。本专利技术的疫苗能提高SPF鸡的抗体，预防禽肺病毒引起的肿头、产蛋率下降等症状，此疫苗具有高效、安全性好的优点。使用效果表明，疫苗在14天就能达到100％阳性，而进口苗只有40％。且抗体均值本专利技术的疫苗达到5.7496，而进口苗为0.08707；21天抗体均值本专利技术的疫苗为11.9466，而进口苗为1.6595，高于国外疫苗5～10倍。【专利说明】
本专利技术属于疫苗制备
，具体涉及。
技术介绍
鸡肿头综合症(SwollenHead Syndrome, SHS)是由禽肺病毒(Avian Pneumovvirus,APV)引起并继发致病性大肠杆菌等感染的一种鸡的传染病，以肿头和特征性神经症状为主要特征，产蛋鸡还可发生产蛋下降，孵化率降低等特征。 禽肺病毒(APV)是火鸡鼻气管炎(TRT)和鸡肿头综合症感染的病原，在鸡感染后通常会发生肿头综合症(SHS)。APV分为A、B、C亚型，先后发生于欧洲、亚洲、南美洲和中美洲，当初根据糖蛋白基因(G)的差异仅发现2个血清型A和B，1996年美国爆发了该病，然后根据基质蛋白基因(M)和融合蛋白基因(F)的差异发现了第三种血清型C。 SHS首先报道于南非(Morley和Thomson, 1985)，它是南非经历1971?1972年新城疫(ND)大流行后开始出现的，起初认为是鸡新城疫的继发症，随着新城疫活疫苗的进一步使用，新城疫发生减少了，但这种症状一直到1974年还在广泛流行，而且似乎还在增多。到1979年，这种被看作是继发的综合症欲发展到相当严重程度时，才使人们承认它是一种独立的疾病。而后，英国、法国、荷兰、以色列及亚太地区(中国与日本)也相继报道了该病在各自国家与地区的发生与流行，并展开了病原学、流行病学、病理学、诊断学、免疫学等方面的研究。1993年在澳大利亚悉尼举行的第十届世界禽病会上，本病成为研讨的热点之一。我国近年来河北、山东、广西等地有了本病发生的报道，但还未波及全国。尽管如此，由于我国养禽数量大范围广，卫生管理及疾病预防水平相对比发达国家低，随着地区间的贸易发展，本病随时有波及全国的可能。 SHS主要危害鸡(肉用种鸡、商品蛋鸡、肉鸡均可发生)和火鸡。鸡和火鸡是已知的自然宿主。SHS主要通过接触水平传播，病鸡或康复鸡的消化道和鼻腔分泌物污染饮水及环境而成为传染源，该病传播速度较慢，目前尚无证据表明该病可以垂直传播。 该病出现的第一个症状是喷嚏，一天内发生眼结膜潮红，泪腺肿胀，在以后12?24h，头部开始出现皮下水肿，最先见于眼部周围，继而发展到头部，再波及下颌组织和肉垂。在早期，鸡以爪抓面部，表现出局部瘙痒，接着病鸡精神沉郁，不愿走动，食欲降低，死亡率1%?20%不等，对于肉用种鸡和商品蛋鸡，除观察到头肿现象外，还表现特异的神经症状，除部分病鸡只表现极度沉郁与昏迷外，大部分病例都出现脑的定向障碍，表现形式包括持续和重复的摇头，斜颈，运动失调，行动不稳及角弓反张等。一些鸡头往上仰，呈现“观星状”。病鸡不愿走动，部分鸡只因此不采食而死亡。产蛋鸡的产蛋率和孵化率也下降，但数天后恢复正常。 首先出现的病变是伴随打喷嚏而出现的鸡鼻甲骨黏膜轻微的瘀血，后发展到不严重的广泛的红色至紫色变化，在组织病理上，明显表现上皮变平，纤毛逐渐消失.上皮下充血和淋巴组织增生。上皮下充血与淋巴组织增生还见于浆细胞增多的泪腺。尽管上呼吸道可能观察到轻度瘀血斑点和纤毛运动性降低.但气管在急性期一般没有影响。病鸡肿头是由于眼眶周围皮下水肿并扩张所致。在一些严重病例中，还出现肉髯的发绀与肿胀。肿大的头，剥离皮肤后，可看到皮下组织黄色水肿至化脓，眼睛肉眼病变仍保持正常，但眼睑由于水肿和结膜炎而关闭。疾病的发展可产生气管炎，有时发生肺坏死，组织学检查发现，水肿部位有淋巴细胞和异嗜白细胞集结。 对于肉鸡，SHS的发病年龄在4?7周龄，而以5?6周龄为高峰，对于肉用种鸡和商品蛋鸡则可发生于各种年龄。在不予治疗的情况下，病程大约为10天，如果应用抗生素治疗并改善通风，病程一般可缩短到3?5天。近年来，该病呈慢性流行经过。常持续2?3周。该病发病率从1%?90%不等，肉鸡死亡率I %?20%不等，蛋鸡产蛋量下降2 0Z0?40%不等，产蛋鸡死亡率为0%?20%不等，肉用种鸡死亡率0%?10%不等。因此，筛选与免疫原性强的禽肺病毒来制备疫苗就成为免疫领域研究的热点之一。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，从而弥补现有技术的不足。 本专利技术的鸡肿头综合症疫苗，是以保藏编号为CGMCC N0.9001的禽肺病毒为抗原制备的。 上述的疫苗为灭活疫苗。 上述的灭活疫苗中禽肺病毒的含量为每毫升106_ 5TCID5tlt5 疫苗所使用的油相为白油95份、硬脂酸铝I份和5份的司本-80。 上述灭活疫苗的制备方法如下: I)油相制备:取兽用白油95份，硬脂酸铝I份，置于油相制备罐中加热至80°C后，再加5份的司本-80，至温度达到115°C时，维持30min，冷却后备用； 2)水相制备:将灭活的SHS/B株病毒液加入水中，使每0.2ml水中含SHS/B株病毒含量不低于105.5TCID50 ;取灭菌后的5份吐温-80,加入配液罐中，同时加入病毒液95份，搅拌20?30min，使吐温-80完全溶解； 3)乳化:取油相2份放于高速剪切机内，开动电机慢速转动搅拌，同时徐徐加入水相I份，以10000r/min,乳化5分钟，乳化后，取1ml,以3000r/min离心15分钟完成制备。 本专利技术疫苗所使用的禽肺病毒具有安全性好，免疫原性高的特点。本专利技术的疫苗能提高SPF鸡的抗体，预防禽肺病毒引起的肿头、产蛋率下降等症状，此疫苗具有高效、安全性好的优点。使用效果表明，疫苗在14天就能达到100%阳性，而进口苗只有40%。且抗体均值本专利技术的疫苗达到5.7496，而进口苗为0.08707 ；21天抗体均值本专利技术的疫苗为 11.9466，而进口苗为1.6595，高于国外疫苗5?10倍。 【专利附图】【附图说明】 图1:SHS/B株的F基因的序列进化树分析图； 图2:SHS/B株的情缘关系比较图； 图3:筛选毒株基因序列变异位点； 图4:疫苗免疫后抗体阳性率对比图； 图5:免疫后抗体滴度值对比图。 【具体实施方式】 下面结合实施例对本专利技术进行详细的描述。 一、禽肺病毒株的筛选及检测 1、毒株的筛选 从山东某鸡场发生鸡肿头综合症的鸡群中分离病原，个别鸡只病变表现典型，出现肿头症或面部蜂窝组织炎，眼结膜潮红，泪腺肿胀，头部出现皮下水肿，精神沉郁，不愿走动，食欲降低。经调查该鸡场早先免疫过进口厂家相关疫苗。 采集发病典型鸡只的鼻液，死亡鸡只鼻甲骨中的粘性分泌物，进行实验室病毒分离，在病料中分离到禽肺病毒和大肠杆菌、绿脓杆菌等，通过对禽肺病毒的鸡胚增殖、细胞传代培养后，进行分子生物学检测，该病毒为副粘病毒科，肺病毒亚科成员。结合中国家禽养殖现状，饲养本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸡肿头综合症疫苗，其特征在于，所述的疫苗是以保藏编号为CGMCC No.9001的禽肺病毒为抗原制备的。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：楚电峰，杜元钊，韩建文，刘相娥，康一岚，薄智勇，宫晓，刘秋云，
申请(专利权)人：青岛易邦生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37