一种荜茇组织培养的快速繁殖方法技术

本发明专利技术研究了一种荜茇组织培养的快速繁殖方法，包括荜茇无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽等步骤，本发明专利技术方法所制备的荜茇生产周期短，增值率高，可以在短期内获得大量的荜茇幼苗。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术研究了，包括荜茇无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽等步骤，本专利技术方法所制备的荜茇生产周期短，增值率高，可以在短期内获得大量的荜茇幼苗。【专利说明】
本专利技术涉及荜茇组织培养的快繁方法，属于植物
。
技术介绍
胃，Piper longum L.，又名:荜拨梨、阿梨诃他、椹圣，胡椒科，攀援藤本，长达数米；枝有粗纵棱和沟槽，幼时被极细的粉状短柔毛，毛很快脱落。原产热带，喜高温潮湿气候，中国主产地云南省盈江县，年平均气温19.3°C，最低月平均气温11.6°C，极端显低气温-1.2°C。幼苗需适度遮荫，否则因光照太强抑制生长，影响产量。花果期需充足光照。宜选山间、盆地、沟边湿润、疏松、肥沃的壤上种植。产于云南东南至西南部，广西、广东和福建有栽培。生子疏荫杂木林中，海拔约580米。尼泊尔、印度、斯里兰卡、越南及马来西亚也有分布。用于脘腹冷痛、呕吐、泄泻、偏头痛、鼻渊、外治牙痛、冠心病、心绞痛。治心腹冷痛，呕吐吞酸，肠鸣泄泻，冷痢，阴疝，头痛，鼻渊，齿痛，用扦插、压条繁殖。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种荜茇的快速繁殖方法，由该方法所制备的荜茇，生产周期短，增殖率高，可以短期内获得大量的荜茇幼苗。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:取荜发幼嫩的叶片，流水冲洗18min,超净工作台上10%的次氯酸钠处理1min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的荜茇幼嫩叶片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%苹果汁培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度26±2°C，湿度75%，诱导出来的愈伤组织放入培养基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.1-0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照18001x，温度26±2°C，30天后开始分化变绿的愈伤组织逐渐形成不定芽，分化出来的3-4cm的芽接入培养基1/2MS+KT1-1.2mg/L+NAAl-l.2mg/L 中进行生根诱导，附加蔗糖 20g/L，琼脂 6g/L，pH5.8，光照10000lx，温度26 ±2°C，分化出来的芽接入生根培养基培养I周后，诱导出根，待10天后每株长出5条根,根长约3cm,植株健壮,叶色浓绿,去掉盖子，实验室炼苗4天,洗去培养基，移栽到花盆中放入温控培养箱中培养。 采用本专利技术制备的荜茇成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1取荜发幼嫩的叶片，流水冲洗18min,超净工作台上10%的次氯酸钠处理1min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的荜茇幼嫩叶片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%苹果汁培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度26±2°C，湿度75%，诱导出来的愈伤组织放入培养基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.lmg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照18001χ，温度26 ±2。。，30天后开始分化变绿的愈伤组织逐渐形成不定芽，分化出来的3-4cm的芽接入培养基l/2MS+KTlmg/L+NAAlmg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L,琼脂6g/L，ρΗ5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ,温度26±2°C，分化出来的芽接入生根培养基培养I周后，诱导出根，待10天后每株长出5条根，根长约3cm，植株健壮，叶色浓绿，去掉盖子，实验室炼苗4天，洗去培养基，移栽到花盆中放入温控培养箱中培养，成活率88%。 实施例2取荜发幼嫩的叶片，流水冲洗18min,超净工作台上10%的次氯酸钠处理1min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的荜茇幼嫩叶片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%苹果汁培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度26±2°C，湿度75%，诱导出来的愈伤组织放入培养基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照18001χ，温度26 ±2。。，30天后开始分化变绿的愈伤组织逐渐形成不定芽，分化出来的3-4cm的芽接入培养基1/2MS+KT1.2mg/L+NAA1.2mg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L,琼脂6g/L，ρΗ5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ,温度26±2°C，分化出来的芽接入生根培养基培养I周后，诱导出根，待10天后每株长出5条根，根长约3cm，植株健壮，叶色浓绿，去掉盖子，实验室炼苗4天，洗去培养基，移栽到花盆中放入温控培养箱中培养，成活率91%。 实施例3取荜发幼嫩的叶片，流水冲洗18min,超净工作台上10%的次氯酸钠处理1min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的荜茇幼嫩叶片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%苹果汁培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度26±2°C，湿度75%，诱导出来的愈伤组织放入培养基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照18001χ，温度26 ±2。。，30天后开始分化变绿的愈伤组织逐渐形成不定芽，分化出来的3-4cm的芽接入培养基1/2MS+KT1.2mg/L+NAAlmg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L,琼脂6g/L，ρΗ5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ,温度26±2°C，分化出来的芽接入生根培养基培养I周后，诱导出根，待10天后每株长出5条根，根长约3cm，植株健壮，叶色浓绿，去掉盖子，实验室炼苗4天，洗去培养基，移栽到花盆中放入温控培养箱中培养，成活率89%。【权利要求】1.，包括荜茇无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取荜茇幼嫩的叶片，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的荜茇幼嫩叶片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%苹果汁培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度26±2°C，湿度 75%; (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.1-0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照18001x，温度26±2°C，30天后开始分化变绿的愈伤组织逐渐形成不定芽； (4)取步骤(3)分化出来的3-4cm的芽接入培养基1/2MS+KT1-1.2mg/L+NAAl-l.2mg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6g/L，pH5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ，温度26±2°C ； (5)取步骤(4)生根的试管苗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荜茇组织培养的快速繁殖方法，包括荜茇无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下：（1）取荜茇幼嫩的叶片，对其进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的荜茇幼嫩叶片接入MS+6‑BA0.5mg/L+2，4‑D1mg/L+10%苹果汁培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度26±2℃，湿度75%；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基1/2MS+6‑BA0.5mg/L+ABA0.1‑0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1800lx，温度26±2℃，30天后开始分化变绿的愈伤组织逐渐形成不定芽；（4）取步骤（3）分化出来的3‑4cm的芽接入培养基1/2MS+KT1‑1.2mg/L+NAA1‑1.2mg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂6g/L，pH5.8，光照10000lx，温度26±2℃；（5）取步骤（4）生根的试管苗进行炼苗移栽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨存，
申请(专利权)人：南京通泽农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32