一种大豆花粉的真空保存方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种大豆花粉的真空保存方法及应用。该方法的具体操作步骤：将花蕾放入真空袋中，将袋中空气抽干净，真空袋封口，将真空袋放于4℃保存。本发明专利技术通过实验证明，采用真空保存方法对大豆花粉进行保存，使花粉活力保存时间由原来的2-4小时延长至48小时，延长了有效授粉的时间，增加了授粉时间的自由度，避开了受精卵发育的不利环境，降低了劳动强度，提高了工作效率，为杂交制种、遗传研究奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种大豆花粉的真空保存方法及应用。该方法的具体操作步骤：将花蕾放入真空袋中，将袋中空气抽干净，真空袋封口，将真空袋放于4℃保存。本专利技术通过实验证明，采用真空保存方法对大豆花粉进行保存，使花粉活力保存时间由原来的2-4小时延长至48小时，延长了有效授粉的时间，增加了授粉时间的自由度，避开了受精卵发育的不利环境，降低了劳动强度，提高了工作效率，为杂交制种、遗传研究奠定基础。【专利说明】
本专利技术涉及植物生理学领域，具体为一种大豆花粉的真空保存方法及其应用。 一种大豆花粉的真空保存方法及其应用
技术介绍
杂交育种是作物改良的主要途径之一。大豆为自花授粉植物，杂交制种均通过人 工去雄授粉完成。通常采用的方法是：授粉前一天下午16-19时或授粉当天上午8-11时于 母本植株上选取次日即将开花的花蕾，用镊子除去萼片、花冠和雄蕊，授粉当天上午7-8时 于父本植株上取当天即将盛开的花朵，取出雄蕊，将花粉点在已去雄的母本雌蕊上。常规方 法的缺陷在于：1)大豆花粉活力在自然条件下仅能维持2-4个小时，因此大豆杂交的授粉 时间仅限于授粉当天上午的2-4个小时，如遇到阴雨、露水天气，授粉时间也会缩短，影响 授粉效率。2)授粉后的雌蕊要经过整个下午的日晒，特别是在南方高温高湿的夏季，白天高 温持续时间长，裸露的雌蕊由于没有花冠的保护容易干枯死亡。因此，如果能延长大豆花粉 活力的保持时间，在授粉后避开白天的高温时段，则可以有效提高杂交成活率。 植物生理学研究表明：植物细胞在真空低温环境下，呼吸作用接近停滞，但其活力 仍能保持一段时间。当植物细胞回到适宜环境中时，其活力恢复，细胞重新行使其原有的功 能。花粉真空低温保存是植物异地授粉、花期不遇授粉以及种质资源保存的方法之一，但由 于真空要求高，且低温通常在-70°c以下，保存成本昂贵，通常花粉真空低温保存方法仅用 于珍稀植物，在常规作物杂交制种中并不普及。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种大豆花粉的真空保存方法。 本专利技术所提供的大豆花粉的真空保存方法包括如下步骤：将花蕾放入真空袋中， 将袋中空气抽干净，真空袋封口，将真空袋放于4°C保存。 上述所述的方法中，将袋中空气抽干净是通过使用家用真空包装机实现的。 上述方法中，所述的花蕾为当天即将开放的花蕾。 上述所述的方法中，在将花蕾放入真空袋前，用吸水纸将花蕾水分吸干。 上述所述的方法中，在将花蕾放入真空袋中前还包括如下步骤：将所述花蕾置于 培养皿中，再一起装入真空袋。 上述所述的方法中，每个所述真空袋中放50个花蕾，50个花蕾全部置于一个培养 皿内，真空袋的规格为15*15cm，培养皿的规格为9*2. 5cm。 上述所述大豆的品种为天隆1号、豫豆1号、中豆40号或巴西10号。 上述所述的方法中，花粉的保存时间为1-60小时、1-48小时、1-36小时或1-24小 时。 上述所述的方法在大豆杂交制种中的应用。 本专利技术的另一个目的是提供一种植物杂交制种的方法。 本专利技术的所提供的植物杂交制种的方法的具体步骤包括： (1)按照上述任一所述的方法保存大豆花粉； (2)将花蕾从真空袋中取出，置60W白炽灯下20cm处照射20分钟，然后检查花粉 是否已从花药中散出，用花粉已从花药中散出的花蕾中的花粉进行授粉，如没有散出，则继 续用白炽灯照射。 上述所述检查花粉是否已从花药中散出为每隔5分钟检查一次。 上述所述植物为豆科植物；所述豆科植物具体为大豆。 本专利技术与常规花粉保存方法相比具有如下优点： (1)简单易行、经济实惠：常规花粉保存需要超低温冰箱以及工业真空机，设备要 求高，保存成本高；本专利技术中所采用的真空机和冰箱均为家用，不需要任何昂贵设备和特殊 保存条件，任何育种单位均能够接受，适合学校、研究所和基层育种单位应用。 (2)花粉活力保存时间长：大豆花粉在常温下活力仅能维持3-4个小时，而采用本 专利技术方法保存的花粉活力能够保持48小时。 (3)延长了大豆授粉时间：大豆雌蕊于开花前24小时就已发育成熟，在开花后的 48小时内仍具有良好的接受花粉的能力，但大豆花粉在常温下的活力仅能维持3-4个小 时，使得大豆授粉时段非常有限，仅限于上午7-11时，这个时段外花粉因活力迅速丧失而 无法成功授粉，限制了授粉的规模。真空低温花粉保存延长了花粉活力，大豆花粉活力的延 长使大豆授粉时段增加了 3-4倍，使得授粉时段由原来的7-11时延长到下午19时，组合配 制数量也相应增加3-4倍，有利于集中人力大规模配制杂交组合。扩大了大豆授粉时间的 自由度，有效避开不利授粉的环境条件。 (4)降低劳动强度：大豆花期为盛夏季节，在常规杂交制种方法中，操作者的授粉 时间只限定上午7-11时，高温增加了操作者的劳动强度；真空保存方法使花粉活力保持时 间大大延长，操作者可根据当地气候的条件灵活选取授粉时间，避开高温时段，降低劳动强 度。 (5)提高授粉效率：常规大豆杂交，授粉限定于上午7-11时，授粉后的柱头需经过 整个下午的高温过程，特别是在高温高湿的南方地区，人工授粉后的柱头由于缺少萼片和 花冠的保存极易干枯死亡，采用真空保存的花粉授粉，可将授粉改至下午气温降低后进行， 为授粉提供一个相对温和的环境，有利于提商授粉效率。 【专利附图】【附图说明】 图1为在自然条件下不同保存时间的大豆花粉活力的观察结果。1、采集3小时后； 2、米集6小时后；3、米集24小时后；4、米集48小时后。 图2为在真空低温条件下不同保存时间的大豆花粉活力的观察结果。1、保存后1 小时；2、保存后6小时；3、保存后24小时；4、保存后36小时；5、保存后48小时；6、保存后 60小时。 【具体实施方式】 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。 春大豆品种：天隆1号和中豆40公众可从中国农业科学院油料作物研究所大豆室 购得；豫豆22号公众可从河南省农业科学院作物所购得；巴西10号公众可从华南农业大 学大豆改良中心购得。 实施例1、本专利技术花粉保存的方法及保存后花粉活力的检测 一、保存方法 在武汉地区，选取春大豆品种天隆1号和豫豆22号，于4月3号播种，5月20号进 入盛花期。于早上7-8时在父本植株上选取当天即将开放的花蕾，放于9*2. 5cm培养皿中， 取回的花蕾用吸水纸将花蕾上的水分吸干，每皿50个花蕾。 将装有花蕾的培养皿放入15*15cm的真空袋中，用Prestige家用真空包装机将袋 中空气抽干净、封口，将真空袋放于4°C冰箱保存。 二、花粉活力检测 于不同时间后从真空袋中取出花粉，置于载玻片上，滴上一滴培养液（200mg/L的 硼酸溶液+2%的蔗糖溶液），10分钟后在显微镜下检查花粉萌发率，每个时间段检测10朵 花，取平均值为该时间点的花粉萌发率，以自然条件下保存的花朵为对照。各处理的花粉活 力的观察情况如图1-2所示、花粉萌发率如表1所示。结果表明：自然条件下花粉活力仅能 维持3个小时左右，之后花粉本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大豆花粉的真空保存方法，包括如下步骤：将花蕾放入真空袋中，将袋中空气抽干净，真空袋封口，将真空袋放于4℃保存。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：单志慧，杨中路，陈海峰，沙爱华，邱德珍，张婵娟，陈李淼，袁松丽，周蓉，陈水莲，周新安，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42