一种抗乳腺癌的青龙藤提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种抗乳腺癌的青龙藤提取物及其制备方法和应用，所述的青龙藤提取物为青龙藤叶的乙醇提取物，制备方法为：将青龙藤叶粉碎后加无水乙醇回流提取1-3次，每次2-4h，提取温度40-45℃，所得提取液在45℃以下减压浓缩并回收乙醇至无醇味，冷冻干燥，得青龙藤提取物。该提取物在抗乳腺肿瘤增殖方面具有非常明显的生物活性，可作为抗乳腺癌的候选药物进行开发。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种抗乳腺癌的青龙藤提取物及其制备方法和应用，所述的青龙藤提取物为青龙藤叶的乙醇提取物，制备方法为：将青龙藤叶粉碎后加无水乙醇回流提取1-3次，每次2-4h，提取温度40-45℃，所得提取液在45℃以下减压浓缩并回收乙醇至无醇味，冷冻干燥，得青龙藤提取物。该提取物在抗乳腺肿瘤增殖方面具有非常明显的生物活性，可作为抗乳腺癌的候选药物进行开发。【专利说明】一种抗乳腺癌的青龙藤提取物及其制备方法和应用
本专利技术属于中药材提取
，涉及一种抗乳腺癌的青龙藤提取物及其制备方 法和应用。
技术介绍
全球每年约有138万妇女被诊断为乳腺癌，有45万死于该病，且其发病率呈逐年 上升趋势。随着经济发展、生活方式改变，我国乳腺癌发病表现出接近西方国家的趋势，在 大中城市占女性恶性肿瘤发病的首位。由于复发、转移等问题，最终60%的乳腺癌患者死 于该病，尤其是雌激素受体、孕激素受体阴性，人类表皮生长因子受体-2阳性患者，肿瘤侵 袭性强，无法接受针对雌激素受体、孕激素受体的内分泌治疗和针对人类表皮生长因子受 体-2的分子靶向治疗，是临床治疗的难题。目前公认有效的全身治疗只有化疗，但反复化 疗副反应带来的损害给患者造成巨大痛苦。乳腺癌的治疗亟待疗效好、副作用小、能够长期 应用的药物，而国内外许多研究人员将目光聚焦于我国的中医药。 青龙藤又名捆仙丝，为萝蘑科青龙藤属植物青龙藤Biondia henryi (Warb. ex Schltr. et Diels) Tsiang et P. T. Li ，一般以带根全草入药，全年可采，鲜用或晒干。目前，青龙藤被报道具有活血舒筋， 理气祛风的生物活性，主要用于跌打损伤，下肢冷痛麻木，风湿手足麻木，牙痛，尚无文献报 道青龙藤或其提取物具有抗癌尤其是乳腺癌的功效。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种以青龙藤作为原料制备的抗乳腺癌的青龙藤提取物 及其制备方法和应用。 为了实现本能专利技术的目的，专利技术人通过大量试验研究并不懈探索，最终获得了如 下技术方案： 一种抗乳腺癌的青龙藤提取物，所述的青龙藤提取物为青龙藤的无水乙醇提取物。 需要说明的是，本专利技术所采用的中药材青龙藤选用萝蘑科青龙藤属植物青龙藤Biondia henryi (Warb. ex Schltr. et Diels) Tsiang et P. T. Li 的干燥嫩叶。 另外，本专利技术还提供了一种上述抗乳腺癌的青龙藤提取物的制备方法，采用该方 法制备的提取物具有非常显著的抗乳腺癌活性。具体地，该方法包括如下步骤：将青龙藤叶 粉碎后加无水乙醇回流提取1-3次，每次2-4h，提取温度40-45°C，所得提取液在45°C以下 减压浓缩并回收乙醇至无醇味，冷冻干燥，得青龙藤提取物。 优选地，如上所述抗乳腺癌的青龙藤提取物的制备方法，其中优选每次回流提取 时无水乙醇的用量为青龙藤叶质量的4-8倍（v/w)。 在本专利技术的一个最优选的实施例中，如上所述抗乳腺癌的青龙藤提取物的制备方 法，其中青龙藤叶原料需要研成粉末，然后置于回流提取装置中，加入5倍质量无水乙醇后 于45°C加热回流2h，共提取3次，过滤，合并3次滤液，将滤液在40°C条件下减压浓缩并回 收乙醇至无醇味，然后放入冷冻干燥箱进行干燥，得到干浸膏，将干浸膏粉碎成细粉，过筛， 得青龙藤叶乙醇提取物干粉。 本专利技术采用绿色荧光蛋白基因转染的激素受体阴性的MDA-MB-231乳腺癌裸鼠模 型，进行青龙藤乙醇提取物的抗乳腺癌研究实验。结果显示，本专利技术的青龙藤提取物在抗乳 腺肿瘤增殖方面具有非常明显的生物活性，可作为抗乳腺癌的候选药物进行开发。 【专利附图】【附图说明】 图1为试验过程中各组乳腺MDA-MB-231-GFP肿瘤组织块大小变化曲线图。 【具体实施方式】 以下是本专利技术青龙藤乙醇提取物的制备实施例和动物试验例，对本专利技术做进一步 说明和阐述。但是，本专利技术的保护范围并不受限于以下实施例，凡是基于本专利技术上述内容所 实现的技术均属于本专利技术的范围。 实施例1青龙藤叶乙醇提取物的制备 称取500g青龙藤的干燥嫩叶，研成粉末，置于回流提取装置中，加入3L无水乙醇，45°C 加热回流3h，共提取2次，过滤，合并2次滤液，将滤液在40°C条件下减压浓缩并回收乙醇 至无醇味，然后放入冷冻干燥箱进行干燥，得到43. 15g干浸膏，得率为8. 63%，将干浸膏粉 碎成细粉，过100目筛，得青龙藤叶乙醇提取物干粉。 实施例2青龙藤叶乙醇提取物的制备 称取500g青龙藤的干燥嫩叶，研成粉末，置于回流提取装置中，加入2. 5L无水乙醇， 45°C加热回流2h，共提取3次，过滤，合并3次滤液，将滤液在40°C条件下减压浓缩并回收 乙醇至无醇味，然后放入冷冻干燥箱进行干燥，得到46. 90g干浸膏，得率为9. 38%，将干浸 膏粉碎成细粉，过100目筛，得青龙藤叶乙醇提取物干粉。 对比例1采用乙醇水溶液代替无水乙醇 称取500g青龙藤的干燥嫩叶，研成粉末，置于回流提取装置中，加入2. 5L体积浓度为 80%的乙醇溶液，45°C加热回流2h，共提取3次，过滤，合并3次滤液，将滤液在40°C条件下 减压浓缩并回收乙醇至无醇味，然后放入冷冻干燥箱进行干燥，得到63. 55g干浸膏，得率 为12. 71%，将干浸膏粉碎成细粉，过100目筛，得青龙藤叶乙醇提取物干粉。 实施例3青龙藤提取物抗乳腺癌的试验研究 5-6周龄的雌性裸鼠 50只，应用外科原位移植方法，将源自同系小鼠的1_3大小的人 乳腺癌细胞株MDA-MB-231-GFP (已转染了绿色荧光蛋白，由北京安泰康生物技术有限公司 提供）肿瘤组织块种植到实验小鼠左侧第二乳头附近的乳房脂肪垫上，建立绿色荧光蛋白 标记的人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型。建模后第3天，以FluorVivo-Model-100荧光 成像仪对所有小鼠进行全身成像。 剔除瘤负荷离均值较大的荷瘤小鼠后，将挑选出的40只小鼠随机分为4组：阴性 对照组、阳性对照组、试验A组和试验B组。阴性对照组每日以0. 9%氯化钠溶液0. lmL/10g 灌胃，连续3周。阳性对照组每3天经腹腔注射紫衫醇1次（20mg/kg)，共给药7次。试验 A组每日以实施例2制备的青龙藤提取物56. 5mg/kg灌胃，试验B组每日以对比例1制备的 青龙藤提取物56. 5mg/kg灌胃，两个试验组均连续给药21d。每周2次通过FluorVivo成像 系统观察实验小鼠的肿瘤负荷情况，记录肿瘤大小。 给药21d后，所有的裸鼠均通过C02吸入的方法处死。所有实验动物的荷瘤小鼠 的肿瘤和主要脏器均被解剖并取出，通过FluorVivo成像系统观察实验小鼠的肿瘤负荷情 况和肿瘤的转移情况。所有的肿瘤重量均被称量和记录。各组肿瘤均在在同等曝光条件下 成像。肿瘤抑制率以下列公式计算：肿瘤抑制率（％)= (1-治疗组/阴性对照组）Χ1〇〇%。 处置后荷瘤小鼠的肿瘤负荷情况如图1、表1所示，各组肿瘤均较阴性对照组 有所减小，其中，阳性对照组和试验A组的肿瘤与阴性对照组相比，有非常明显的缩小(产 < 0. 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗乳腺癌的青龙藤提取物，其特征在于：所述的青龙藤提取物为青龙藤叶的无水乙醇提取物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孔令禹，
申请(专利权)人：崔银方，
类型：发明
国别省市：山东;37