一种淫羊藿生产中总黄酮的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种淫羊藿生产中总黄酮的检测方法，包括以下步骤：（1）制备淫羊藿提取液，取样；（2）利用AOTF近红外光谱仪采集与光谱相对应的近红外光谱；（3）紫外分光光度法离线检测采集样品的总黄酮含量；（4）利用数学计量软件关联近红外光谱数据和离线检测数据，建立校正模型；（5）利用建立的校正模型在线检测生产过程中提取液中总黄酮含量。本发明专利技术采集提取工艺中的校正样品集，采用紫外分光光度法检测样品总黄酮含量，利用TheUnscambler分析软件建立校正模型，使用建立的好校正模型对生产过程中淫羊藿提取液总黄酮含量实时监测。本发明专利技术将近红外光谱技术成功运用于中药生产过程中，实现中药生产过程的实时、在线的质量控制。

【技术实现步骤摘要】

[〇〇〇1] 本专利技术涉及医药领域，具体地说，涉及。
技术介绍
淫羊藿为小檗科植物，具有很高的药用价值。味性归经：辛、甘，温。归肝、肾经主 治功能：补肾阳，强筋骨，祛风湿。其提取液中主要有含黄酮类化合物、木脂素、生物碱、挥 发油等。对淫羊藿提取液的评价主要以其中总黄酮的含量为标准，总黄酮的含量检测以分 光光度法计算而得。如要进一步得到其中淫羊藿苷的含量则需要使用高效液相色谱法，此 种方法需要消耗大量药品及试剂，检测时间较长，检测结果滞后，不能满足现代化大生产对 时效性的要求，及在线质量控制的需求。近红外光谱技术作为一种在线监测技术，具有快 速无无损的特点，已在众多领域得到广泛应用，本实验以声光可调滤光器（Acousto-Optic Tunable Filter，A0TF)近红外光谱仪在线采集提取工艺阶段管道中淫羊藿提取液的近红 外光谱，建立定量模型并预测，实现近红外对中药质控中快速检测及保障中药产品质量的 稳定。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种淫羊藿生产中总黄酮的检测方 法，以实现淫羊藿生产过程中总黄酮含量的在线质量控制。 为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案： -种淫羊藿生产中总黄酮的检测方法，包括以下步骤： (1)制备淫羊藿提取液，取样； (2)利用A0TF近红外光谱仪采集与光谱相对应的近红外光谱； (3)紫外分光光度法离线检测采集样品的总黄酮含量； (4)利用数学计量软件关联近红外光谱数据和离线检测数据，建立校正模型； [〇〇1〇] (5)利用建立的校正模型在线检测生产过程中提取液中总黄酮含量。 在上述淫羊藿生产中总黄酮的检测方法中，淫羊藿提取液的制备包括：将淫羊藿 25?50kg/罐投入多能提取罐，加水提取1?3次，第一次提取的加10?15倍体积量水， 第二、三次均加10倍体积量水，各沸腾1?2小时；提取液经60?100目筛粗，冷却至40? 60°C，离心液合并，备用。 在上述淫羊藿生产中总黄酮的检测方法中，取样方法包括：在提取罐体的管道上 安装的取样阀取样，记录取样时间，取样方案为前40分钟每分钟取一次样，后20分钟每5 分钟取一次样，每次取样50mL。 在上述淫羊藿生产中总黄酮的检测方法中，步骤（2)采集近红外光谱所使用的是 Brimrose公司的Luminar3060型近红外光谱仪，加装流体探头。步骤（2)生产全程采集光 谱，光谱采集采用Ratio mode通过连接于流体测样器的光纤探头以透视的方式对管道内 的淫羊藿水提液进行光谱采集。波长范围1100?2300 ;波长增量：2. Onm，扫描次数：200。 采用透射检测方式，光程为5nm。 在上述淫羊藿生产中总黄酮的检测方法中，步骤（4)所述的数学计量软件是CAMA 公司The Unscrambler分析软件。 在上述淫羊藿生产中总黄酮的检测方法中，步骤（3)紫外分光光度法为精密量取 淫羊藿水提液〇.5mL，置50mL容量瓶中。加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取淫羊 藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lmL含10 μ g的溶液，作为对照品溶液。分别取 供试品溶液和对照品溶液，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在270nm波长处 测定吸光度，计算，即得。 在上述淫羊藿生产中总黄酮的检测方法中，步骤（4)光谱采用一阶微分9点平滑 (Savitzy-golay)对原始光谱进行预处理。将经过处理的光谱数据和离线的检测数据相关 联，米用偏最小二乘法（PLS1)，交叉-验证法（Cross-validation)，用The Uscrambler定 量分析软件建立模型。 与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术实现了淫羊藿生产过程中对 总黄酮含量的实时在线检测。包括采集提取工艺中的校正样品集，采用紫外分光光度法检 测样品总黄酮含量，利用The Unscambler分析软件建立校正模型，使用建立的好校正模型 对生产过程中淫羊藿提取液总黄酮含量实时监测。本专利技术将近红外光谱技术成功运用于中 药生产过程中，实现中药生产过程的实时、在线的质量控制。 【附图说明】： 图1为提取第一次煎煮原始光谱图； 图2为提取第二次原始光谱图； 图3为提取三煎煮原始光谱图； 图4为提取一煎PLS1回归模型图； 图5为提取二煎PLS1回归模型图； 图6为提取三煎PLS1回归模型图。 【具体实施方式】： 实施例1 : 1、制备淫羊藿提取液 将淫羊藿25kg/罐投入多能提取罐，加水提取3次，第一次提取的加15倍量水，第 二、三次均加10倍体积量水，各沸腾1小时。提取液经60?100目筛粗，冷却至40?60°C， 离心液合并，备用。 2、取样方法 水提前40分钟每分钟去一次样，后20分钟每5分钟取一次样。每次取样50mL 3、总黄酮检测方法 精密量取淫羊藿水提液0. 5mL，置50mL容量瓶中。加甲醇至刻度，摇匀，作为供试 品溶液。另取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lmL含10 μ g的溶液，作为对照 品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法， 在270nm波长处测定吸光度，计算，即得。 4、光谱采集与处理 光谱采集采用Ratio mode通过连接于流体测样器的光纤探头以透视的方式对 管道内的淫羊藿水提液进行光谱采集。波长范围1100?2300 ;波长增量：2. Onm扫描次数： 200。采用透射检测方式，光程为5nm， 光谱采用一阶微分9点平滑（Savitzy-golay)对原始光谱进行预处理。将经 过处理的光谱数据和离线的检测数据相关联，采用偏最小二乘法（PLS1)，交叉-验证法 (Cross-validation)，用The Uscrambler定量分析软件建立模型。 5、预测 本次共建立三个模型，分别为提取第一次煎煮、提取第二次煎煮、提取第三次煎 煮，分别对参与建模样品和随机抽取的样品进行预测结果如表1、2、3、4。通过模型的内部 验证和外部验证，A0TF近红外光谱在线检测预测淫羊藿生产过程中总黄酮含量的相对偏差 在10%左右，在实际生产过程中可有效的实现实时在线的质量控制。在后期的研究中，将 投料的原料批次、产地等因素综合考虑建模，减小系统误差。后期模型维护需要加大数据采 集量，以丰富模型梯度，使得模型更加丰满，梯度得以展开，使模型适应性更好更加准确。图 1为提取第一次煎煮原始光谱图；图2为提取第二次原始光谱图；图3为提取三煎煮原始光 谱图；图4为提取一煎PLS1回归模型图；图5为提取二煎PLS1回归模型图；图6为提取三 煎PLS1回归模型图。[〇〇36] 表1第一次煎煮模型的内部验证结果本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种淫羊藿生产中总黄酮的检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）制备淫羊藿提取液，取样；（2）利用AOTF近红外光谱仪采集与光谱相对应的近红外光谱；（3）紫外分光光度法离线检测采集样品的总黄酮含量；（4）利用数学计量软件关联近红外光谱数据和离线检测数据，建立校正模型；（5）利用建立的校正模型在线检测生产过程中提取液中总黄酮含量。

【技术特征摘要】
1. 一种淫羊藿生产中总黄酮的检测方法，其特征在于包括以下步骤： (1) 制备淫羊藿提取液，取样； (2) 利用AOTF近红外光谱仪采集与光谱相对应的近红外光谱； (3) 紫外分光光度法离线检测采集样品的总黄酮含量； (4) 利用数学计量软件关联近红外光谱数据和离线检测数据，建立校正模型； (5) 利用建立的校正模型在线检测生产过程中提取液中总黄酮含量。2. 根据权利要求1所述的淫羊藿生产中总黄酮的检测方法，其特征在于淫羊藿提取 液的制备包括：将淫羊藿25飞0 kg/罐投入多能提取罐，加水提取1~3次，第一次提取的加 ΚΓ15倍体积量水，第二、三次均加10倍体积量水，各沸腾广2小时；提取液经60?100目 筛粗，冷却至40?60 °C，离心液合并，备用。3. 根据权利要求1所述的淫羊藿生产中总...

【专利技术属性】
技术研发人员：许定舟，李菁，刘翠红，杨丽，李宇，钟鸣，
申请(专利权)人：广州白云山汉方现代药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44