一种通过检测生物液体中miRNA来鉴定患早期肺癌的无症状高风险个体的方法技术

一种从34种miRNA的组中选择至少5种血清miRNA的诊断和/或预后模型，所述miRNA在无症状高风险个体的群体中鉴定早期肺癌，即非小细胞肺癌（(NSCLC）具有80％准确性。所述模型还能区别良性和恶性损伤并对捕获疾病发作有足够的灵敏度。另外，所述模型还能诊断或确定诊断症状患者的肺癌，以及监控患有该肺癌的对象在外科手术和/或化疗和/或放疗治疗后的肺肿瘤状态。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】—种通过检测生物液体中miRNA来鉴定患早期肺癌的无症状高风险个体的方法
本专利技术涉及诊断和预后肺癌的方法和途径。更具体地，本专利技术涉及检测无症状对象中早期肺癌的生物液体miRNA测试。
技术介绍
肺癌，特别是非小细胞肺癌(NSCLC )是全球癌症死亡的首要元凶，主要由于缺乏有效的早期诊断工具。早期疾病(I期)就诊断出的患者预后相当好(5年后存活率为60-80%3)。不幸的是，所有NSCLC中只有20-25%被早期诊断4’5。烟草接触是肺癌的主要风险因素6。甚至在原吸烟者中，烟草相关的风险仍长期居高不下7。因此，早期检测NSCLC的有效工具，尤其在高风险个体中，极其需要。低剂量螺旋计算机断层扫描(LD-CT)已在前瞻性观察试验中测试，并已证明是小结节(甚至〈5_)和无症状肺癌诊断(主要(67-85%)在I期^1°)的有效检测方法。对于每年LD-CT筛选是否降低晚期疾病(II1-1V期)诊断和肺癌死亡n_13存在争论，并且以下情况的可能性已增加=LD-CT筛选可能导致过度诊断和过度治疗生物无痛性癌症，所述癌症可能很少达到临床相关性或造成对象的健康风险14’15。然而，最近已确定LD-CT的有效性，其作为一种大型随机试验(国家肺筛选试验16)基于“目前积累数据对研究的主要问题提供了统计学上有说服力的答案”过早停止(http: //www.cancer, gov/newscenter/pressreleases/NLSTresultsRelease)。如果早期诊断的确是降低肺癌死亡的有效方法，那么开发诊断性血液测试对执行有效人口筛选而言极其相关。特异性循环微小RNA (miRNA)的检测可用于该目的。实际上有证据支持该说法，即循环微小RNA对几乎每种恶性17_26和非恶性疾病27_31(包括肺癌32_34)而言有诊断潜力。现有技术一些现有技术公开了使用检测miRNA以诊断有症状癌症，也包括肺癌。然而，没有现有技术文献公开当对象仍然无症状时对早期疾病有作用的方法。现有技术文献包括:-Lu J 等，Nature, 2005 年 6 月 9 日；435 (7043): 834-8 指出癌症诊断中 miRNA 概况分析的可能性。-Chen X，等，Cell Research Cell Res.2008 年 10 月；18 (10): 997-1006 得出血清miRNA可用作检测各种癌症和其它疾病的潜在生物标记物。-Bishop Ja,等，Clinical Cancer Research, Clin Cancer Res.2010 年 I 月 15日；16(2):610-9描述了 miRNA方案是高度可靠的NSCLC分类策略。该测试基于来自活检/吸出物的RT-PCR并聚焦在hsa-miR-205。 -Gilad S，等，Plos One PLoS One.2008 年 9 月 5 日；3 (9): e3148 指出在血清和其它体液中miRNA测定的医学相关可能性。-Shen等，Lab Invest.2010年11月29日鉴定了肺NSCLC患者血浆中12个表达变化的miRNA。.-Keller 等，BMC Cancer, 2009 年 10 月 6 日；9:353 检测了在肺癌对象(NSCLC)的血细胞中下调的27种miRNA;通过使用其中24种miRNA，其能区分肿瘤患者和对照的血细胞样品，但没有公开无症状个体的早期诊断方法。-Yu S-L 等，Cancer Cell2008 年 I 月;13(1):48-57 研究了 miRNA 表法概况是否能预测NSCLC患者的临床结果。使用实时RT-PCR，其获得微小RNA在112名NSCLC患者中的表达，其中分为训练组和测试组。使用Cox回归和风险评分分析，其鉴定一个5种miRNA标识以用于预测训练组中NSCLC的治疗结果。通过测试组和独立组验证该微小RNA标识。该方法涉及预后标识，但没有用于诊断的数据。-Lebanony 等，J Clin Oncol.2009 年 4 月 20 日；27 (12): 2030-7 使用高通量微阵列来检测122名腺癌和鳞状NSCLC样品中微小RNA的表达水平。其鉴定hsa-miR-205是鳞状细胞肺癌的高度特异性标记物。-Boeri 等，Proc Natl Acad Sci U S A.2011 年 3 月 I 日;108 (9): 3713—8.电子Hi版于2011年2月7日描述了在高风险个体(重度吸烟者)中通过使用血浆样品中循环miRNA来诊断肺癌的方法。作者鉴定了循环微小RNA的四种标识以用于诊断和预后目的。所述四种不同的miRNA标识是:1.风险标识-鉴定对象所处发展肺癌的风险的miRNA标识。2.诊断标识-鉴定患者患有肺癌的miRNA标识。3.侵袭性疾病的风险标识一发展侵袭性肺癌风险的miRNA标识。4.存在侵袭性疾病的标识-鉴定患者患有侵袭性疾病的miRNA标识。以上标识中无一预期本专利技术的标识核心方法。此外，Boeri等没有表明“真正的”病例-对照研究，所述研究对精确限定所提出标识的准确度、灵敏度和特异性而言是必需的。实际上，使用非肺癌患者的血浆 池来替代对照个体，因此防止计算所述标识的“真正”特异性(即对照对象数预测为总数的负数)。-CN101638656公开了与非小细胞肺癌(SCLC)预后相关的血清/血浆miRNA标记物及其应用。-CN101307361公开了通过Solexa技术鉴定肺癌患者血清中miRNA的方法。-CN101608232公开制备新型用于筛选和鉴定低丰度小RNA表达概况的新型小RNA芯片及其应用。-US2007/050146 公开了微小 RNA 及其应用。-US2007/299030公开了用于人乳腺癌和肺癌的微小RNA生物标记物。-US2008/182237公开了与肺癌相关的核酸。-US2010/010072公开了用于人乳腺癌和肺癌的微小RNA生物标记物。-US2010/178653公开了癌症分类的基因表达标识。-W02007/081720公开了用于肺癌诊断、预后和治疗的基于微小RNA的方法和组合物。在肺癌细胞而非生物液体中测定微小RNA水平。-W02009/153775公开了区分肺癌特异类型的方法。-W02009/052386公开了微小RNA在肺疾病中的差异性表达及其应用。-W02009/070653公开了肺癌患者外周血中的一些微小RNA表达概况分析和靶向。-W02009/066291公开了用于测定肿瘤来源的微小RNA表达标识。-W02010/054233公开了外周血单核细胞中的生物标记物以用于在慢性阻塞性肺病或非小细胞肺癌患者对象中诊断或检测肺癌。-W02010/073248公开了用于分类肿瘤样品组织来源的基因表达标识。-W02010/109017公开了将miR661用作乳腺癌的诊断工具。-W02010/139810公开了通过血细胞中的miRNA表达概况确定肺癌诊断的方法。事实上，所述方法已在以下患者的血细胞中测试:17名NSCLC患者(p.33，1.30-33),7名鳞状细胞癌、7名腺癌患者和3名其它癌亚型患者，或非癌症个体(19名个体)。微小RNA从血细胞中提取。通过商业化微阵列本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诊断无症状对象中肺肿瘤，或区分对象中良性和恶性肺结节，或对象中肺肿瘤预后的方法，包括以下步骤：a)在来自所述对象的生物液体样品中检测包含在下列34个miRNA中的至少5个miRNA：hsa‑let‑7a(MIMAT0000062,SEQ ID No.1);hsa‑let‑7b(MIMAT0000063,SEQ ID No.2);hsa‑let‑7d(MIMAT0000065,SEQ ID No.3);hsa‑miR‑103(MIMAT0000101,SEQ ID No.4);hsa‑miR‑126(MIMAT0000445,SEQ ID No.5);hsa‑miR‑133b(MIMAT0000770,SEQ ID No.6);hsa‑miR‑139‑5p(MIMAT0000250,SEQ ID No.7);hsa‑miR‑140‑5p(MIMAT0000431,SEQ ID No.8);hsa‑miR‑142‑3p(MIMAT0000434,SEQ ID No.9);hsa‑miR‑142‑5p(MIMAT0000433,SEQ ID No.10);hsa‑miR‑148a(MIMAT0000243,SEQ ID No.11);hsa‑miR‑148b(MIMAT0000759,SEQ ID No.12);hsa‑miR‑17‑5p(MIMAT0000070,SEQ ID No.13);hsa‑miR‑191(MIMAT0000440,SEQ ID No.14);hsa‑miR‑22(MIMAT0000077,SEQ ID No.15);hsa‑miR‑223(MIMAT0000280,SEQ ID No.16);hsa‑miR‑26a(MIMAT0000082,SEQ ID No.17);hsa‑miR‑26b(MIMAT0000083,SEQ ID No.18);hsa‑miR‑28‑5p(MIMAT0000085,SEQ ID No.19);hsa‑miR‑29a(MIMAT0000086,SEQ ID No.20);hsa‑miR‑30b(MIMAT0000420,SEQ ID No.21);hsa‑miR‑30c(MIMAT0000244,SEQ ID No.22);hsa‑miR‑32(MIMAT0000090,SEQ ID No.23);hsa‑miR‑328(MIMAT0000752,SEQ ID No.24);hsa‑miR‑331‑3p(MIMAT0000760,SEQ ID No.25);hsa‑miR‑342‑3p(MIMAT0000753,SEQ ID No.26);hsa‑miR‑374a(MIMAT0000727,SEQ ID No.27);hsa‑miR‑376a(MIMAT0000729,SEQ ID No.28);hsa‑miR‑432‑staR(MIMAT0002815,SEQ ID No.29);hsa‑miR‑484(MIMAT0002174,SEQ ID No.30);hsa‑miR‑486‑5p(MIMAT0002177,SEQ ID No.31);hsa‑miR‑566(MIMAT0003230,SEQ ID No.32);hsa‑miR‑92a(MIMAT0000092,SEQ ID No.33);hsa‑miR‑98(MIMAT0000096,SEQ ID No.34);以及b)将所述miRNA量与合适对照比较，其中所述比较可以诊断或预后肺肿瘤，或区分良性和恶性肺结节。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.03.30 EP 11160387.4;2010.12.30 US 61/428,3631.一种诊断无症状对象中肺肿瘤，或区分对象中良性和恶性肺结节，或对 象中肺肿瘤预后的方法，包括以下步骤: a)在来自所述对象的生物液体样品中检测包含在下列34个miRNA中的至少5个miRNA:hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2);hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3); hsa-miR-103(MIMAT0000101, SEQ ID N0.4);hsa-miR-126(MIMAT0000445, SEQ ID N0.5);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7);hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-142-3p(MIMAT0000434, SEQ ID N0.9);hsa-miR-142-5p(MIMAT0000433, SEQ ID N0.10);hsa-miR-148a(MIMAT0000243, SEQ ID N0.11);hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12);hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13);hsa-miR-191(MIMAT0000440, SEQ ID N0.14);hsa-miR-22(MIMAT0000077, SEQ ID N0.15);hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16);hsa-miR-26a(MIMAT0000082, SEQ ID N0.17);hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18);hsa-miR-28-5p(MIMAT0000085, SEQ ID N0.19);hsa-miR-29a(MIMAT0000086, SEQ ID N0.20);hsa-miR-30b(MIMAT0000420, SEQ ID N0.21);hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22);hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23);hsa-miR-328(MIMAT0000752, SEQ ID N0.24);hsa-miR-331-3p(MIMAT0000760, SEQ ID N0.25);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27);hsa-miR-376a(MIMAT0000729, SEQ ID N0.28);hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29);hsa-miR-484(MIMAT0002174, SEQ ID N0.30);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);hsa-miR-566(MIMAT0003230, SEQ ID N0.32);hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33);hsa-miR-98(MIMAT0000096, SEQ ID N0.34); 以及b)将所述miRNA量与合适对照比较，其中所述比较可以诊断或预后肺肿瘤，或区分良性和恶性肺结节。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少5个miRNA是: hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31); 且一个miRNA包含在下组: hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2); hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3); hsa-miR-103(MIMAT 0000101, SEQ ID N0.4); hsa-miR-126(MIMAT0000445, SEQ ID N0.5); hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7); hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8); hsa-miR-142-3p(MIMAT0000434, SEQ ID N0.9); hsa-miR-142-5p(MIMAT0000433, SEQ ID N0.10); hsa-miR-148a(MIMAT0000243, SEQ ID N0.11); hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12); hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13); hsa-miR-191(MIMAT0000440, SEQ ID N0.14); hsa-miR-22(MIMAT0000077, SEQ ID N0.15); hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16); hsa-miR-26a(MIMAT0000082, SEQ ID N0.17); hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18); hsa-miR-28-5p(MIMAT0000085, SEQ ID N0.19); hsa-miR-29a(MIMAT0000086, SEQ ID N0.20); hsa-miR-30b(MIMAT0000420, SEQ ID N0.21); hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22); hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23); hsa-miR-328(MIMAT0000752, SEQ ID N0.24); hsa-miR-331-3p(MIMAT0000760, SEQ ID N0.25); hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27); hsa-miR-376a(MIMAT0000729, SEQ ID N0.28); hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29); hsa-miR-484(MIMAT0002174, SEQ ID N0.30); hsa-miR-566(MIMAT0003230, SEQ ID N0.32); hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33); hsa-miR-98(MIMAT0000096, SEQ ID N0.34)。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少5个miRNA是:hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22);hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27);hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2);且一个miRNA包含在下组:hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3);hsa-miR-103(MIMAT0000101, SEQ ID N0.4);hsa-miR-126(MIMAT0000445, SEQ ID N0.5);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7);hsa-miR-142-3p(MIMAT0000434, SEQ ID N0.9);hsa-miR-142-5p(MIMAT0000433, SEQ ID N0.10);hsa-miR-148a(MIMAT0000243, SEQ ID N0.11);hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12);hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13);hsa-miR-191(MIMAT0000440, SEQ ID N0.14);hsa-miR-22(MIMAT0000077, SEQ ID N0.15);hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16);hsa-miR-26a(MIMAT0000082, SEQ ID N0.17);hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18);hsa-miR-28-5p(MIMAT0000085, SEQ ID N0.19);hsa-miR-29a(MI MAT0000086, SEQ ID N0.20);hsa-miR-30b(MIMAT0000420, SEQ ID N0.21);hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23);hsa-miR-328(MIMAT0000752, SEQ ID N0.24);hsa-miR-331-3p(MIMAT0000760, SEQ ID N0.25);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-376a(MIMAT0000729, SEQ ID N0.28);hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29);hsa-miR-484(MIMAT0002174, SEQ ID N0.30);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);hsa-miR-566(MIMAT0003230, SEQ ID N0.32);hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33);hsa-miR-98(MIMAT0000096, SEQ ID N0.34)。4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于，所述至少5个miRNA是:hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7); 或者hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1); hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16); 或者hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2)。5.如权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述至少5个miRNA是: hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22);hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27);hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2);hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16); 或者hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22);hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27);hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2);hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3)。6.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述检测步骤a)包括在来自所述对象的生物液体样品中检测至少10个miRNA，其中所述10个miRNA是:hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31); 且其它6个miRNA包含在下组中: hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2); hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3); hsa-miR-103(MIMAT0000101, SEQ ID N0.4); hsa-miR-126(MIMAT0000445, SEQ ID N0.5); hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7); hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-142-3p(MIMAT0000434, SEQ ID N0.9);hsa-miR-142-5p(MIMAT0000433, SEQ ID N0.10);hsa-miR-148a(MIMAT0000243, SEQ ID N0.11);hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12);hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13);hsa-miR-191(MIMAT0000440, SEQ ID N0.14);hsa-miR-22(MIMAT0000077, SEQ ID N0.15);hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16);hsa-miR-26a(MIMAT0000082, SEQ ID N0.17);hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18);hsa-miR-28-5p(MIMAT 0000085, SEQ ID N0.19);hsa-miR-29a(MIMAT0000086, SEQ ID N0.20);hsa-miR-30b(MIMAT0000420, SEQ ID N0.21);hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22);hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23);hsa-miR-328(MIMAT0000752, SEQ ID N0.24);hsa-miR-331-3p(MIMAT0000760, SEQ ID N0.25);hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27);hsa-miR-376a(MIMAT0000729, SEQ ID N0.28);hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29);hsa-miR-484(MIMAT0002174, SEQ ID N0.30);hsa-miR-566(MIMAT0003230, SEQ ID N0.32);hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33);hsa-miR-98(MIMAT0000096, SEQ ID N0.34)。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述至少10个miRNA是: hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6);hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7);hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12);hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18);hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31)?8.如权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述检测步骤a)包括在来自所述对象的生物液体样品中检测至少10个miRNA，其中所述至少10个miRNA是:hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22);hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27);hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2); 且其它6个miRNA包含在下组中: hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1); hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3); hsa-miR-103(MIMAT0000101, SEQ ID N0.4); hsa-miR-126(MIMAT0000445, SEQ ID N0.5); hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6); hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7); hsa-miR-142-3p(MIMAT0000434, SEQ ID N0.9); hsa-miR-142-5p(MIMAT0000433, SEQ ID N0.10); hsa-miR-148a(MIMAT0000243, SEQ ID N0.11); hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12); hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13); hsa-miR-191(MIMAT0000440, SEQ ID N0.14); hsa-miR-22(MIMAT0000077, SEQ ID N0.15); hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16); hsa-miR-26a(MIMAT0000082, SEQ ID N0.17); hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18); hsa-miR-28-5p(MIMAT0000085, SEQ ID N0.19); hsa-miR-29a(MIMAT0000086, SEQ ID N0.20); hsa-miR-30b(MIMAT0000420, SEQ ID N0.21); hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23); hsa-miR-328(MIMAT0000752, SEQ ID N0.24); hsa-miR-331-3p(MIMAT0000760, SEQ ID N0.25); hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26); hsa-miR-376a(MIMAT0000729, SEQ ID N0.28); hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29); hsa-miR-484(MIMAT0002174, SEQ ID N0.30); hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31); hsa-miR-566(MIMAT0003230, SEQ ID N0.32); hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33); hsa-miR-98(MIMAT0000096, SEQ ID N0.34)。9.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述检测步骤a)包括在来自所述对象 的生物液体样品中检测至少15个miRNA，其中所述至少15个miRNA是: hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1); hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6); hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26); hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);且其它11个miRNA包含在下组中:hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2);hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3);hsa-miR-103(MIMAT0000101, SEQ ID N0.4);hsa-miR-126(MIMAT0000445, SEQ ID N0.5);hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7);hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-142-3p(MIMAT0000434, SEQ ID N0.9);hsa-miR-142-5p(MIMAT0000433, SEQ ID N0.10);hsa-miR-148a(MIMAT0000243, SEQ ID N0.11);hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12);hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13);hsa-miR-191(MIMAT0000440, SEQ ID N0.14);hsa-miR-22(MIMAT0000077, SEQ ID N0.15);hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16);hsa-miR-26a(MIMAT0000082, SEQ ID N0.17);hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18);hsa-miR-28-5p(MIMAT0000085, SEQ ID N0.19);hsa-miR-29a(MIMAT0000086, SEQ ID N0.20);hsa-miR-30b(MIMAT0000420, SEQ ID N0.21);hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22);hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23);hsa-miR-328(MIMAT0000752, SEQ ID N0.24);hsa-miR-331-3p(MIMAT0000760, SEQ ID N0.25);hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27);hsa-miR-376a(MIMAT0000729, SEQ ID N0.28);hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29);hsa-miR-484(MIMAT0002174, SEQ ID N0.30);hsa-miR-566(MIMAT0003230, SEQ ID N0.32);hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33);hsa-miR-98(MIMAT0000096, SEQ ID N0.34)。10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述至少15个miRNA是:hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1);hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2);hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3);hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6); hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7);hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8);hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12);hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13);hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18);hsa-miR-29a(MIMAT0000086, SEQ ID N0.20);hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23);hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26);hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33)?11.如权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述检测步骤a)包括在来自所述对象 的生物液体样品中检测至少15个miRNA，其中所述至少15个miRNA是: hsa-miR-140-5p(MIMAT0000431, SEQ ID N0.8); hsa-miR-30c(MIMAT0000244, SEQ ID N0.22); hsa-miR-374a(MIMAT0000727, SEQ ID N0.27); hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2); 且其它11个miRNA包含在下组中: hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1); hsa-let-7d(MIMAT0000065, SEQ ID N0.3); hsa-miR-103(MIMAT0000101, SEQ ID N0.4); hsa-miR-126(MIMAT0000445, SEQ ID N0.5); hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6); hsa-miR-139-5p(MIMAT0000250, SEQ ID N0.7); hsa-miR-142-3p(MIMAT0000434, SEQ ID N0.9); hsa-miR-142-5p(MIMAT0000433, SEQ ID N0.10); hsa-miR-148a(MIMAT0000243, SEQ ID N0.11); hsa-miR-148b(MIMAT0000759, SEQ ID N0.12); hsa-miR-17-5p(MIMAT0000070, SEQ ID N0.13); hsa-miR-191(MIMAT0000440, SEQ ID N0.14); hsa-miR-22(MIMAT0000077, SEQ ID N0.15); hsa-miR-223(MIMAT0000280, SEQ ID N0.16); hsa-miR-26a(MIMAT0000082, SEQ ID N0.17); hsa-miR-26b(MIMAT0000083, SEQ ID N0.18); hsa-miR-28-5p(MIMAT0000085, SEQ ID N0.19); hsa-miR-29a(MIMAT0000086, SEQ ID N0.20); hsa-miR-30b(MIMAT0000420, SEQ ID N0.21); hsa-miR-32(MIMAT0000090, SEQ ID N0.23); hsa-miR-328(MIMAT0000752, SEQ ID N0.24); hsa-miR-331-3p(MIMAT0000760, SEQ ID N0.25); hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26); hsa-miR-376a(MIMAT0000729, SEQ ID N0.28);hsa-miR-432-staR(MIMAT0002815, SEQ ID N0.29);hsa-miR-484(MIMAT0002174, SEQ ID N0.30);hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31);hsa-miR-566(MIMAT0003230, SEQ ID N0.32);hsa-miR-92a(MIMAT0000092, SEQ ID N0.33);hsa-miR-98(MIMAT0000096, SEQ ID N0.34)。12.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述检测步骤a)包括在来自所述对象 的生物液体样品中检测至少20个miRNA，其中所述至少20个miRNA是: hsa-let-7a(MIMAT0000062, SEQ ID N0.1); hsa-miR-133b(MIMAT0000770, SEQ ID N0.6); hsa-miR-342-3p(MIMAT0000753, SEQ ID N0.26); hsa-miR-486-5p(MIMAT0002177, SEQ ID N0.31); 且其它16个miRNA包含在下组中: hsa-let-7b(MIMAT0000063, SEQ ID N0.2); ...

【专利技术属性】
技术研发人员：F·比安基，F·尼卡西奥，M·J·L·N·马尔奇，P·迪费奥雷，
申请(专利权)人：意大利癌症研究基金会分子肿瘤学研究所IFOM，欧洲肿瘤研究所有限公司，米兰大学，
类型：发明
国别省市：意大利;IT