一种细胞拆分装置和细胞拆分方法制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种细胞拆分装置和细胞拆分方法。细胞拆分装置包括带内芯的离心管和细胞培养板；离心管内腔设有内芯，内芯设有带凸起的沿口部和封闭的尖形底部；培养板为与离心管内径相适配的圆形平板，圆形平板的正面边缘处设有撑脚，培养板正面朝下倒扣在内芯上方且撑脚抵在内芯的沿口部。细胞拆分方法包括细胞培养、细胞拆分、细胞核收集、细胞质收集。本发明专利技术通过设计适于拆分贴壁生长的细胞的细胞离心拆分装置，在常规离心速度11000～12000r/min的情况下，离心拆分细胞的效率达到90～95%。该细胞离心拆分装置的结构简单，离心拆分细胞方法方便高效且容易实现。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞工程，尤其涉及。
技术介绍
在生命科学迅速发展的当今社会，动物克隆、干细胞、乳腺生物反应器转基因动物、人造组织和器官等重大科学进展都离不开细胞工程所建立的平台。细胞工程是人类按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官，甚至个体，从而培育创造优秀品种或产品的综合性生物工程。当前细胞工程所涉及的主要
有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。细胞工程已经渗透到人类生活衣食住行等许多领域，如治疗疾病的药物、预防疾病的疫苗、美容的化妆品、吃的食物等。在当今的生命科学技术中，细胞的拆分和重组日益成为细胞工程的重要组成部分。细胞是由细胞质和细胞核组成的，通过分离拆分细胞的细胞质和细胞核，然后根据生命科技发展的要求，重组成不同细胞组分来源组成的重组细胞，从而能够培育出新的品种和个体服务于人类。目前拆分细胞质和细胞核的方法是采用高速离心的方法，即使用速度达到30000~40000r/min的超高速离心机。超高速离心机常用于病毒等超小颗粒方面的研究，而且超高速离心机的价格昂贵，维护成本高，对于常规的实验室而言难以具备，并且使用超高速离心机的细胞拆分效 率只能达到40~50%。目前，实验室常规高速离心机为12000r/min的普通离心机，该离心机价格便宜，维护成本低，在不借助细胞拆分装置的情况下，细胞拆分效率只能达到6~10%。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种细胞拆分装置。本专利技术要解决的另外一个技术问题是提供一种细胞拆分方法。对于细胞拆分装置，本专利技术采用的技术方案是:一种细胞拆分装置，包括带内芯的离心管和细胞培养板；离心管内腔设有内芯，内芯设有带凸起的沿口部和封闭的尖形底部；培养板为与离心管内径相适配的圆形平板，圆形平板的正面边缘处设有撑脚，培养板正面朝下倒扣在内芯上方且撑脚抵在内芯的沿口部。作为优选，内芯为外径与离心管内径相适配的小管。作为优选，培养板的正面用细胞粘附剂处理。作为优选，培养板的两端设有用于夹取的内凹的缺口。作为优选，培养板为塑料制成。作为优选，塑料是聚苯乙烯或聚丙烯材料。对于细胞拆分方法，本专利技术采用的技术方案是包括以下步骤:(I)细胞培养接种细胞于细胞培养板的正面，细胞培养板放置在含有细胞培养液的细胞培养皿中，并置于细胞培养箱中进行培养；当贴壁培养的细胞生长处于对数生长期时，更换成含有细胞松弛素的细胞培养液，培养箱中继续培养I小时，把粘附生长细胞的细胞培养板从细胞培养皿中取出；(2)细胞拆分把细胞离心拆分装置的离心管内芯中添加细胞培养液，在细胞培养板细胞粘附面向下倒扣至离心管内芯上，使内芯中的细胞培养液浸没倒扣的细胞培养板，盖上离心管盖子，放入离心机中离心；(3)细胞核收集离心完毕后，取出倒扣的细胞培养板，吸出离心管内芯中的细胞培养液，将离心管内芯底部沉淀的细胞核取出；(4)细胞质收集离心完毕后，将取出的细胞培养板放入胰酶消化液中，经过短暂消化处理，将从细胞培养板上消化脱落的细胞质收集。作为优选，细胞培养液为DMEM液+10%FBS+100U/ml青霉素+100mg/ml链霉素。作为另一个优选，离心机是转速为11000~12000r/min的常规高速离心机。本专利技术的有益效果是:通过设计一种适于拆分贴壁生长的细胞的离心拆分装置，在常规离心速度11000~12000r/min的情况下，离心拆分细胞的效率达到90~95%。该细胞离心拆分装置的结构简单，离心拆分细胞方法方便高效且容易实现。【附图说明】下面结合附图和【具体实施方式】对本专利技术作进一步详细的说明。图1是本专利技术细胞拆分装置实施例1的结构示意图。图2是本专利技术细胞拆分装置实施例1的培养板主视图。图3是本专利技术细胞拆分装置实施例1的培养板俯视图。图4是本专利技术细胞拆分装置实施例1的培养板仰视图。图5是本专利技术细胞拆分装置实施例2的结构示意图。图中，1-尚心管，2_内芯，3_培养板，4_缺口，5_撑脚。【具体实施方式】实施例1一种细胞拆分装置，由带内芯2的离心管I和细胞培养板3组成。在图1中，内芯为外径与离心管内径相适配的小管且设置在离心管内腔的中部，内芯设有封闭的尖底和凸起的上沿口。图2中，培养板3是用聚苯乙烯或聚丙烯材料制成的圆形平板，培养板3的直径可以放置在离心管内腔中且与离心管I内径相适配。为了使得细胞更好地在培养板上粘附生长，将培养板的正面经过细胞粘附剂处理，培养板两端设有用于夹取的内凹的缺口 4(图3)，在正面的边缘处设有3个撑脚(图4)。以下是将该细胞拆分装置用于细胞拆分的使用方法:(I)细胞培养先将细胞培养板的正面经过细胞粘附剂处理后，接种细胞于细胞培养板的正面，细胞培养板放置在含有细胞培养液的细胞培养皿中，并置于细胞培养箱中进行培养；当贴壁培养的细胞生长处于对数生长期时，更换成含有细胞松弛素的细胞培养液，培养箱中继续培养I小时，把粘附生长细胞的细胞培养板从细胞培养皿中取出；其中细胞培养液为DMEM 液 +10%FBS+100U/ml 青霉素 +100mg/ml 链霉素。(2)细胞拆分把细胞离心拆分装置的离心管内芯中添加细胞培养液，将从细胞培养皿中取出的粘附生长细胞的细胞培养板3的正面朝下倒扣置于离心管I内的内芯2上方，并且使撑脚抵在内芯的上沿口，使内芯中的细胞培养液浸没倒扣的细胞培养板，盖上离心管盖子，放入离心机中离心；其中细胞培养液为DMEM液+10%FBS+100U/ml青霉素+100mg/ml链霉素。(3)细胞核收集离心完毕后，取出倒扣的细胞培养板，吸出离心管内芯中的细胞培养液，将沉淀在离心管内芯尖形底部的细胞核取出。(4)细胞质收集离心完毕后，将取出的细胞培养板放入胰酶消化液中，经过短暂消化处理，将从细胞培养板上消化脱落的细胞质收集。实施例2如图5所示，细胞拆分装置同样由带内芯2的离心管I和细胞培养板3组成，但内芯2与离心管I是用聚苯乙烯或聚丙烯塑料一体制作而成。本实施例的其他结构与使用方法与实施例1相同。以上所述的本专利技术实施方式，并不构成对本专利技术保护范围的限定。任何在本专利技术的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的权利要求保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞拆分装置，其特征在于：包括带内芯的离心管和细胞培养板；所述离心管内腔设有内芯，所述内芯设有带凸起的沿口部和封闭的尖形底部；所述培养板为与离心管内径相适配的圆形平板，所述圆形平板的正面边缘处设有撑脚，所述培养板正面朝下倒扣在内芯上方且撑脚抵在内芯的沿口部。

【技术特征摘要】
1.一种细胞拆分装置，其特征在于:包括带内芯的离心管和细胞培养板；所述离心管内腔设有内芯，所述内芯设有带凸起的沿口部和封闭的尖形底部；所述培养板为与离心管内径相适配的圆形平板，所述圆形平板的正面边缘处设有撑脚，所述培养板正面朝下倒扣在内芯上方且撑脚抵在内芯的沿口部。2.根据权利要求1所述的细胞拆分装置，其特征在于:所述内芯为外径与离心管内径相适配的小管。3.根据权利要求1所述 的细胞拆分装置，其特征在于:所述培养板的正面用细胞粘附剂处理。4.根据权利要求1所述的细胞拆分装置，其特征在于:所述培养板的两端设有用于夹取的内凹的缺口。5.根据权利要求1所述的细胞拆分装...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹鸿国，章孝荣，张飞，卞雅妮，李运生，刘亚，张运海，方富贵，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34