【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种牡丹基因组DNA分子标记方法,其特征在于:其具体操作步骤为:步骤一、提取牡丹基因组DNA;步骤二、牡丹基因组DNA的酶切:用限制性内切酶Mse?I和限制性内切酶EcoR?I对上述步骤一所提取的基因组DNA进行酶切,得到基因组DNA酶切产物;步骤三、酶切产物和接头DNA连接:将所得基因组DNA酶切产物、Mse?I接头引物、EcoR?I接头引物、T4?DNA连接酶和稀释10倍后的连接缓冲液混合均匀后在温度为16℃的条件下保温30min,得到连接产物;所述的Mse?I接头引物序列包括Mse?I?5“端接头引物和Mse?I?3“端接头引物,其碱基序列如序列表序列1和序列2;所述的EcoR?I接头引物序列包括EcoR?I?5“端接头引物和EcoR?I?3“端接头引物,其碱基序列如序列表序列3和序列4;步骤四、连接产物的预扩增:(1)、取上述步骤三所得部分连接产物,将其与用双蒸水稀释10倍后的Buffer、含Mg2+的溶液、dNTPs、用双蒸水稀释至20μmol/L的Mse?I预扩增引物、Taq酶和双蒸水混合后,进行PCR扩增,得到Mse?I预扩增产物;(2)、取上述步骤三所得剩余连接产物,将 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:郭大龙,侯小改,段亚宾,魏冬峰,吕静霞,
申请(专利权)人:河南科技大学,
类型:发明
国别省市:
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