一种牡丹基因组DNA分子标记方法技术

技术编号:10098984 阅读:290 留言:0更新日期:2014-05-30 00:22
一种牡丹基因组DNA分子标记方法,提取牡丹基因组DNA进行酶切,将酶切产物和接头DNA连接;将连接产物与预扩增引物进行PCR扩增,得到预扩增产物;取所得到预扩增产物与用内切酶接头选择性扩增引物iPBS引物进行PCR扩增,得PCR选择性扩增产物;然后取PCR选择性扩增产物,加入染色液并点样进行电泳,电泳完成后,银染,观察、拍照,分析结果。本发明专利技术是建立在PCR与酶切基础上的分子标记技术,操作简单;成本低,适用性强;针对牡丹基因组研究技术而设计,开发了一种新的基于反转录转座子的分子标记体系,为牡丹的种质资源遗传变异和进化研究提供新的技术手段。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种牡丹基因组DNA分子标记方法,其特征在于:其具体操作步骤为:步骤一、提取牡丹基因组DNA;步骤二、牡丹基因组DNA的酶切:用限制性内切酶Mse?I和限制性内切酶EcoR?I对上述步骤一所提取的基因组DNA进行酶切,得到基因组DNA酶切产物;步骤三、酶切产物和接头DNA连接:将所得基因组DNA酶切产物、Mse?I接头引物、EcoR?I接头引物、T4?DNA连接酶和稀释10倍后的连接缓冲液混合均匀后在温度为16℃的条件下保温30min,得到连接产物;所述的Mse?I接头引物序列包括Mse?I?5“端接头引物和Mse?I?3“端接头引物,其碱基序列如序列表序列1和序列2;所述的EcoR?I接头引...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:郭大龙侯小改段亚宾魏冬峰吕静霞
申请(专利权)人:河南科技大学
类型:发明
国别省市:

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