【技术实现步骤摘要】
一种多糖
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载体蛋白缀合物及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及生物制药领域,具体提供一种多糖
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载体蛋白缀合物及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]破伤风毒素是由破伤风杆菌(Clostridium tetani)产生的一种分子量约150kD的蛋白质,是一种神经毒素。破伤风毒素全长1315个氨基酸,由A、B、C三部分组成,每部分分子量均约为50kDa。其中,重链的C端为破伤风毒素C片段(tetanus toxin fragment C,TTc),具有结合神经细胞的作用。
[0003]研究发现,传统破伤风类毒素通过甲醛脱毒制备,存在毒性逆转的可能,与之相比,TTc被证实具有完整的破伤风毒素结合神经节苷脂的能力,且不具备神经毒活性,具有制备为载体蛋白的潜在优势(Qazi O,Bolgiano B,Crane D,et al.J Mol Biol,2007,365(1):123
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134.)。由此制备的多糖
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载体蛋白缀合物,即是由多糖共价吸附在载体蛋白上构成。
[0004]目前,制备多糖
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载体蛋白缀合物首先要对纯化后的多糖进行化学修饰,以产生可与载体蛋白连接的反应基团。活化多糖常用的两种方法分别为邻羟基的高碘酸盐氧化和羟基的氰化,通常,活化多糖的结合率要低于20%(Frasch C E.Vaccine,2009,27(46):6468
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6470.)。此外,现有文献也提及了TTc作为 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种多糖
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载体蛋白缀合物,其特征在于,所述载体蛋白为氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的重组破伤风毒素C片段。2.如权利要求1所述的多糖
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载体蛋白缀合物,其特征在于,编码所述重组破伤风毒素C片段氨基酸序列的核苷酸序列为SEQ ID No.2。3.如权利要求1
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2任一项所述的多糖
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载体蛋白缀合物,其特征在于,所述多糖为荚膜多糖,优选选自肺炎链球菌荚膜多糖、脑炎奈瑟氏球菌荚膜多糖、b型流感嗜血杆菌(Hib)荚膜多糖。4.如权利要求3所述的多糖
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载体蛋白缀合物,其特征在于,所述多糖为Hib荚膜多糖。5.如权利要求4所述的多糖
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载体蛋白缀合物,其特征在于,所述Hib荚膜多糖与载体蛋白的投料质量比为1:1
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1.5;优选地,所述Hib荚膜多糖与载体蛋白的投料质量比为1:1.2
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1.3。6.如权利要求5所述的多糖
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载体蛋白缀合物,其特征在于,在所述多糖
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载体蛋白缀合物中,所述多糖的羟基与所述载体蛋白的羧基通过连接臂共价连接形成包括以下结构的多糖
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载体蛋白缀合物7.一种如权利要求1
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6任一项所述多糖
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载体蛋白缀合物的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
①
构建氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的重组破伤风毒素C片段作为载体蛋白;
②
制备多糖并进行纯化;
③
将纯化后的多糖与载体蛋白进行缀合。8.如权利要求7所述的制备...
【专利技术属性】
技术研发人员:李建强,王玺,葛君,石应辉,周童,王晓东,方侃,王瑶,张胜兰,吉枝丹,
申请(专利权)人:远大赛威信生命科学南京有限公司,
类型:发明
国别省市:
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