【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于产生甲基丙烯酸酯的方法
[0001]引言
[0002]甲基丙烯酸甲酯(methyl methacrylate,MMA)是化学工业中的重要单体。MMA的主要用途是生产多种应用的塑料;然而,MMA也可以用于在骨科手术中使用的骨水泥(bone cement)。最重要的聚合应用是聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)的铸造、模塑或挤出(extrusion),以生产高光学透明度塑料。PMMA的全球消耗估计为每年约210万吨。
[0003]虽然最广泛使用的甲基丙烯酸酯是MMA,但是也可以使用甲基丙烯酸或MMA分别通过直接酯化或通过酯交换产生其他甲基丙烯酸酯。实例是2-甲基丙-2-烯酸丁酯(BMA,具有化学式C8H
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O2的甲基丙烯酸酯)、甲基丙烯酸异丁酯(iBMA)、甲基丙烯酸乙酯(EMA)和甲基丙烯酸2-乙基己酯(2EHMA)。BMA由MMA与丁醇进行酯交换产生。所有这些酯和PMMA都具有许多的应用,即在制造纺织品、涂料和粘合剂、包装、润滑剂、汽车设备、LCD屏幕、医疗设备和家用物品中的应用。
[0004]MMA目前仅通过化学手段产生,并且目前用于产生MMA的方法包括丙酮氰醇(ACH)途径和从多种C
2-C4前体开始的其他途径。用于产生MMA的最成功的方法之一是
‘
Alpha方法
’
,其中MMA通过丙酸甲酯这种酯与甲醛的无水反应获得。在Alpha方法中,丙酸甲酯通过乙烯的羰基化产生。这种乙烯原料来源于化石燃料。与MMA产生中常用的其他方法相比,Alpha方法提供了许多优势。这些优
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于产生甲基丙烯酸酯的方法,所述方法包括:a)在发酵培养基中提供与野生型微生物相比具有增加的对甲基丙烯酸C
3-C
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酯的耐受性的遗传修饰的微生物,和b)使所述微生物在产生甲基丙烯酸C
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酯的条件下生长。2.根据权利要求1所述的方法,其中所述微生物当在约37℃在液体培养基中生长时耐受至少20%v/v的甲基丙烯酸C
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酯。3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述微生物是细菌。4.根据前述权利要求所述的方法,其中所述微生物选自肠杆菌科(Enterobacteriaceae)。5.根据前述权利要求所述的方法,其中所述细菌选自以下属:埃希氏菌属(Escherichia)、肠杆菌属(Enterobacter)、泛菌属(Pantoea)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、沙雷氏菌属(Serratia)、欧文氏菌属(Erwinia)、沙门氏菌属(Salmonella)、摩根氏菌属(Morganella)、短杆菌属(Brevibacterium)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、微杆菌属(Microbacterium)、脂环酸芽孢杆菌属(Alicyclobacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、氢杆菌属(Hydrogenobacter)、甲烷球菌属(Methanococcus)、醋杆菌属(Acetobacter)、不动杆菌属(Acinetobacter)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、固氮根瘤菌属(Axorhizobium)、固氮菌属(Azotobacter)、无形体属(Anaplasma)、拟杆菌属(Bacteroides)、巴尔通体属(Bartonella)、鲍特菌属(Bordetella)、疏螺旋体属(Borrelia)、布鲁氏菌属(Brucella)、伯克霍尔德菌属(Burkholderia)、荚膜杆菌属(Calymmatobacterium)、弯曲菌属(Campylobacter)、衣原体属(Chlamydia)、嗜衣原体属(Chlamydophila)、梭菌属(Clostridium)、柯克斯体属(Coxiella)、贪铜菌属(Cupriavidus)、埃立克体属(Ehrlichia)、肠球菌属(Enterococcus)、弗朗西斯氏菌属(Francisella)、梭杆菌属(Fusobacterium)、加德纳菌属(Gardnerella)、嗜血杆菌属(Haemophilus)、螺杆菌属(Helicobacter)、甲烷杆菌属(Methanobacterium)、微球菌属(Micrococcus)、莫拉菌属(Moraxella)、分支杆菌属(Mycobacterium)、支原体属(Mycoplasma)、奈瑟菌属(Neisseria)、巴斯德菌属(Pasteurella)、消化链球菌属(Peptostreptococcus)、卟啉单胞菌属(Porphyromonas)、普氏菌属(Prevotella)、假单胞菌属(Pseudomonas)、根瘤菌属(Rhizobium)、立克次氏体属(Rickettsia)、罗沙利马体属(Rochalimaea)、罗氏菌属(Rothia)、志贺菌属(Shigella)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、链球菌属(Streptococcus)、密螺旋体属(Treponema)、弧菌属(Vibrio)、沃尔巴克氏体属(Wolbachia)、耶尔森菌属(Yersinia)。6.根据权利要求5所述的方法,其中所述细菌是大肠杆菌(E.coli)。7.根据前述权利要求所述的方法,其中所述遗传修饰的微生物在编码调节氧化应激响应和细菌多药耐药系统或形成氧化应激响应和细菌多药耐药系统的一部分的蛋白的一种或更多种核酸中包含突变。8.根据前述权利要求所述的方法,其中所述遗传修饰的微生物在一种或更多种以下核酸序列中包含突变:soxR核酸序列、acrR核酸序列、rob核酸序列和/或marR核酸序列。9.根据权利要求8所述的方法,其中所述soxR核酸序列包含SEQ ID NO.1或其同源物,所述acrR核酸序列包含SEQ ID NO.2或其同源物,所述rob核酸序列包含SEQ ID NO.5或其
同源物,并且所述marR核酸序列包含SEQ ID NO.7或其同源物。10.根据权利要求8或9所述的方法,其中突变体soxR核酸序列编码在DNA结合结构域或FE-S簇结构域中具有突变的突变体SoxR蛋白。11.根据权利要求10所述的方法,其中所述突变选自以下之一:根据SEQ ID NO.2中列出的SoxR中R20被另一种氨基酸的取代、R20被另一种氨基酸的取代、残基146的缺失或残基139处的截短。12.根据权利要求权利要求8至11中任一项所述的方法,其中突变体acrR核酸序列编码在DNA结合结构域或配体结合结构域中具有突变的突变体AcrR蛋白。13.根据权利要求12所述的方法,其中所述突变选自以下之一:根据SEQ ID NO.3中列出的AcrR中V29被另一种氨基酸的取代,T32、A191或位置49处的移码突变。14.根据权利要求8至13所述的方法,其中突变体rob核酸序列编码在N末端DNA结合结构域或C末端结构域中具有突变的突变体Rob蛋白。15.根据权利要求14所述的方法,其中所述突变选自以下之一:根据SEQ ID NO.5中列出的Rob中A70被另一种氨基酸的取代或R156被另一种氨基酸的取代。16.根据权利要求8至15中任一项所述的方法,其中突变体marR核酸序列编码在DNA结合结构域中具有突变的MarR蛋白。17.根据权利要求16所述的方法,其中所述突变是根据SEQ ID NO.7中列出的MarR中V84被另一种氨基酸的取代。18.根据前述权利要求所述的方法,其中所述遗传修饰的微生物在acrR核酸序列和一个或更多个以下列核酸序列中包含突变:soxR核酸序列、rob核酸序列和/或marR核酸序列。19.根据前述权利要求所述的方法,其中所述遗传修饰的生物体包含一个或更多个另外的突变,例如选自表1a或1b的突变。20.根据权利要求19所述的方法,其中所述一个或更多个另外的突变处于编码调节氧化应激响应和细菌多药耐药系统或形成氧化应激响应和细菌多药耐药系统的一部分的蛋白的核酸中。21.根据前述权利要求所述的方法,其中所述微生物还包含编码甲基丙烯酸C
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酯生物合成途径的酶的载体或构建体。22.根据前述权利要求所述的方法,其中所述微生物还包含增强甲基丙烯酸C
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酯的产生的载体或构建体。23.根据前述权利要求所述的方法,所述方法包括从所述发酵培养基中取出所述甲基丙烯酸C
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酯和使所取出的甲基丙烯酸C
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酯与甲醇进行酯交换的步骤。24.根据前述权利要求所述的方法,其中所述甲基丙烯酸C
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酯是BMA。25.一种用于增加微生物对甲基丙烯酸C
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酯的耐受性的方法,所述方法包括将突变引入编码调节氧化应激响应和细菌多药耐药系统或形成氧化应激响应和细菌多药耐药系统的一部分的蛋白的核酸中。26.一种用于使微生物在甲基丙烯酸C
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酯存在下生长或维持的方法,所述方法包括在产生甲基丙烯酸C
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酯的条件下,在发酵培养基中提供与野生型微生物相比具有增加的对甲基丙烯酸C
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酯的耐受性的遗传修饰的微生物。27.一种发酵培养基,所述发酵培养基包含甲基丙烯酸C
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酯和与野生型微生物相比
具有增加的对甲基丙烯酸C
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酯的耐受性的遗传修饰的微生物。28.与野生型微生物相比具有增加的对甲基丙烯酸C
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酯的耐受性的遗传修饰的微生物用于产生甲基丙烯酸C
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酯的用途。29.根据权利要求28所述的用途,其中所述微生物选自肠杆菌科。30.根据权利要求28或29所述的用途,其中所述细菌选自以下属:埃希氏菌属、肠杆菌属、泛菌属、克雷伯氏菌属、沙雷氏菌属、欧文氏菌属、沙门氏菌属、摩...
【专利技术属性】
技术研发人员:佐伊,
申请(专利权)人:三菱化学英国有限公司,
类型:发明
国别省市:
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