本发明专利技术属于生物医疗领域，具体公开了Sema4D/PlexinB1抑制剂在制备治疗及预防眼底血管疾病药物中的应用，申请人发现Sema4D在糖尿病视网膜病变患者眼房水中增加，Sema4D水平与患者对anti‑VEGF的反应呈负相关，Sema4D/PlexinB1信号通路一方面可以作用于内皮细胞促进其迁移、管腔形成，一方面通过促进周细胞迁移加重渗漏，抑制Sema4D/PlexinB1信号通路，可有效抑制眼底血管新生及渗漏，为糖尿病视网膜病变等眼底血管增生、渗漏性疾病提供了新的思路。
Application of Sema4D/PlexinB1 Inhibitors in the Preparation of Drugs for the Treatment and Prevention of Fundus Vascular Diseases
The invention belongs to the field of biomedical treatment, and specifically discloses the application of Sema4D/PlexinB1 inhibitor in the preparation of drugs for treatment and prevention of fundus vascular diseases. The applicant found that Sema4D increased in aqueous humor of patients with diabetic retinopathy, and the level of Sema4D was negatively correlated with the response of patients to anti-VEGF. Sema4D/PlexinB1 signaling pathway can act on endothelial cells to promote their migration on the one hand. On the one hand, migration and lumen formation can effectively inhibit fundus angiogenesis and leakage by promoting pericyte migration, aggravating leakage and inhibiting Sema4D/PlexinB1 signaling pathway, which provides a new idea for fundus vascular proliferation and leakage diseases such as diabetic retinopathy.
【技术实现步骤摘要】
Sema4D/PlexinB1抑制剂在制备治疗及预防眼底血管疾病药物中的应用
本专利技术属于生物医疗领域，具体涉及Sema4D/PlexinB1抑制剂在制备治疗及预防眼底血管疾病药物中的应用。
技术介绍
糖尿病视网膜病变(DR)作为20-75岁成年人致盲的第一位原因，在1型及2型糖尿病患者中患病率高，全球：DR在糖尿病人群中患病率达35.4％，其最严重阶段增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)的患病率达7.5％(2017DiabetesCareIF＝13.397)，在中国：不同阶段DR在糖尿病人群中患病率也高达24.7％-37.5(2014指南)，世界卫生组织(WHO)估计，至2025年，全球将糖尿病患者将突破增值300亿(2009EYE)，可见DR患者的数目将进一步增加。DR的治疗自1990年开展糖尿病视网膜病变玻璃体切割术研究(DRVS研究)至今主要为三类治疗：①激光光凝治疗②玻璃体切割术③抗血管新生药物的应用(主要为多种方式的抗-VEGF治疗,2004年-今)，激光光凝治疗为弃车保帅的治疗方法，牺牲周边视野保留中央视野，而接受抗-VEGF治疗的患者中仅30％有效，可见，anti-VEGF治疗抵抗、反复给药并发的感染、神经元毒性、沉重的经济负担都为治疗带来不便和风险，迫切要求我们研发新的治疗策略。DR的病理过程不同于肿瘤血管新生，其治疗有一定的特殊性，DR的始发因素为眼底血管流速减慢，导致局部代谢改变，激活炎症及相关信号通路，导致血管渗漏、血-视网膜屏障破坏，壁细胞脱失，细胞基质破坏，从而使血管失去功能，局部形成缺氧区域，导致代偿性异常血管增生，加重渗漏甚至功能不全的异常新生血管造成眼底出血、视网膜脱离(CurrDiabRep2011；Diabetes.2006)。而在肿瘤中血管新生始发于促血管新生因子及低氧的诱导，经过内皮细胞激活伸出伪足，周围壁细胞的贴附及与邻近新生管腔的融合，形成血管网。肿瘤中血管新生的目的是为肿瘤生长供养，因此肿瘤中针对血管新生的治疗重点为单纯的抑制血管新生，而在眼底却不同，其抑制血管新生治疗的目的在于抑制异常血管的同时恢复正常血管功能，提供该区域血供并减轻渗漏，可见，虽然两种疾病同为抑制血管新生，但是治疗结果可截然不同。Semaphorin蛋白家族作为在神经系统发育过程扮演重要角色的蛋白，目前被认为在血管新生及血管发育机制上同样发挥重要作用，其中单次跨膜蛋白Sema4D(Class4semaphorins)在血管新生中被热议，其起作用的胞外游离Sema4D片段主要来源于多种细胞的MMP-MT1切割或血小板中ADAM17切割，参与于肿瘤、骨、外伤模型血管新生，在不同的组织、细胞中其作用存在特异性，在肿瘤中，Sema4D通过结合PlexinB受体促进Met和Ron的磷酸化促进细胞迁移、血管新生导致肿瘤细胞转移(2009Valente)，然而，在肺癌中，Sema4D结合PlexinB1与ERBB2形成复合物可通过抑制Met抑制细胞迁移(Swiercz2008)，可见Sema4D在不同组织不同疾病中作用不同。在本专利技术中，申请人明确了抑制Sema4D/PlexinB1信号通路可有效抑制眼底血管新生并减轻眼底血管渗漏，更重要的是早期抑制Sema4D/PlexinB1信号通路可有效减轻周细胞脱失，有助于保护及恢复眼底血管功能，可一定程度延长治疗效果，减少给药次数，为眼底血管新生及渗漏的治疗提供新的策略。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供Sema4D/PlexinB1抑制剂在制备治疗及预防眼底血管疾病药物中的应用，所述的眼底血管疾病包括但不限于眼底血管新生或眼底血管渗漏或周细胞脱失。为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：针对目前眼底血管新生及渗漏的治疗手段有限的情况，申请人取糖尿病视网膜病变患者房水，筛选与血管新生密切相关的成员，发现Sema4D/PlexinB1信号通路抑制剂可有效抑制眼底血管新生及渗漏。Sema4D/PlexinB1信号通路抑制剂在制备治疗及预防眼底血管疾病药物中的应用，所述的抑制剂包括但不限于Sema4D/PlexinB1信号通路抑制病毒，或是Sema4D/PlexinB1信号通路中和抗体，或是抑制Sema4D/PlexinB1信号通路功能的化合物。以上所述的应用中，优选的，所述的眼底血管新生及渗漏是由糖尿病引起的。一种治疗眼底血管疾病的方法，所述的方法为向眼玻璃体中注射Sema4D蛋白的抑制剂；一种治疗眼底血管疾病的方法，所述的方法为向眼玻璃体中注射Sema4D蛋白的抑制剂和anti-VEGF。所述的的眼底血管疾病包括但不限于眼底血管新生或眼底血管渗漏或周细胞脱失。以上所述的方法中，优选的，所述的抑制剂为Sema4D蛋白的中和抗体或Sema4D/PlexinB1信号通路抑制剂。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：针对目前眼底血管新生及渗漏的治疗手段有限的情况，现有的主要治疗手段为①激光光凝治疗②玻璃体切割术③抗血管新生药物的应用，其中抗血管新生药物主要为anti-VEGF眼底注射，但接受抗-VEGF治疗的患者中仅30％有效，申请人针对目前治疗的局限性，取糖尿病视网膜病变患者房水，筛选与血管新生密切相关的Sema家族成员，发现Sema4D/PlexinB1信号通路抑制剂可有效抑制眼底血管新生及渗漏，并在体内、外及基因敲除小鼠中证明了抑制Sema4D/PlexinB1信号通路对眼底病理性血管新生、渗漏的作用并明确相关机制。附图说明图1为Sema4D与DR密切相关结果示意图；其中，A：光学相干断层扫描仪(OCT)示意图；B-C.DR患者房水中Sema4D表达明显增高(WesternBlot)D.DR患者房水中Sema4D表达明显增高(ELISA检测)E-F.DR患者房水中游离Sema4D与患者接受anti-VEGF治疗3月后视网膜黄斑中央凹厚度(CST)及视网膜黄斑体积改变(MV)呈负相关(由武汉协和医院眼科数据库获取后统计)图2为小鼠OIR及STZ模型中Sema4D表达升高示意图；其中，A：OIR模型小鼠视网膜Sema4D的mRAN表达升高(q-PCR)；B：WesternBlot结果显示OIR模型小鼠视网膜Sema4D蛋白表达升高；C-D：WesternBlot显示STZ模型小鼠视网膜3个月、6个月Sema4D蛋白表达升高。图3为Sema4D基因敲除抑制眼底血管新生示意图；其中，A-C：基因敲除小鼠验证；D-H：免疫荧光染色，伊文氏蓝渗漏实验，HE染色结果显示Sema4D基因敲除可显著抑制眼底病理性血管新生、血管渗漏。图4为Sema4D/PlexinB1信号通路可促进内皮细胞管腔形成及渗漏的示意图；其中，A-B：划痕实验证实Sema4D可促进内皮细胞迁移；C-D：管腔形成实验证实Sema4D可促进内皮细胞管腔形成；E：TEER实验证实Sema4D可促进内皮细胞渗漏；F：荧光素渗漏实验证实Sema4D可促进内皮细胞渗漏；G：PlexinB1下调验证；H-I：划痕实验证实阻断沉默PlexinB1受体可阻断Sema4D促内皮细胞迁移作用；J-K：管腔形成实验证实沉默PlexinB1受体可阻断Sema4D促内皮细胞管腔形成作用；L-M：TEER和荧光素渗漏实验证实沉默本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.Sema4D或PlexinB1抑制剂在制备治疗及预防眼底血管疾病药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.Sema4D或PlexinB1抑制剂在制备治疗及预防眼底血管疾病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述的眼底血管疾病为眼底血管新生、眼底血管渗漏或周细胞脱失。3.根据权利要求1所述的应用，所述的抑制剂为Sema4D的抗体、抑制Sema4D或PlexinB1基因表达的病毒或Sema4D/PlexinB1信号通路抑制剂。4.根据权利要求1所述的应用，所述的眼底血管疾病是由糖...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡波，李亚男，吴介洪，陈安琪，洪灿东，岳振宇，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：湖北,42
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