一种快速制备蛋白变性或非变性电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法属于生物学分析领域，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68‑0.72g的KH2PO4。蛋白非变性电泳缓冲液的预制试粉的组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、0.80‑0.84g的KH2PO4。使用时，室温下，将每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶，即得到1L 1×浓度的电泳缓冲液。本发明专利技术的预制试粉使用方法简便快速，制备过程在5‑10分钟内完成，提高蛋白电泳实验的整体效率；所制备的缓冲液，具有较长的电泳寿命和较好的蛋白稳定性。
【技术实现步骤摘要】
一种快速制备蛋白变性或非变性电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法
本专利技术属于生物学分析领域，提供一种生物化学实验分析中，用于蛋白质电泳缓冲液快速制备的预制试粉及其使用方法。
技术介绍
蛋白变性和非变性电泳检测在蛋白的生物化学分析实验中，具有重要地位，是蛋白质量和浓度检测的常规方法之一，是分析蛋白片段大小、质量浓度和纯度的重要依据。常规的蛋白电泳经常使用Tris碱-甘氨酸体系，并在变性电泳缓冲液中，添加SDS变性剂，在非变性电泳中不加变性剂。而传统的蛋白电泳缓冲液的制备需要实验工作人员自主完成，包括称量多项药品、准确调节pH值、适当稀释缓冲液等多项步骤。配制过程耗时耗力，且pH值调节过程增加了实验时间和误差，不利于蛋白电泳实验的快速开展。本专利技术提供了一种供蛋白变性和非变性电泳使用的缓冲液预制试粉，无需称量步骤，无需pH值调节，仅需取一至几份封装在塑料容器或袋中的预制试粉，与一定体积的去离子水混合，即可制得固定浓度和pH值(8.3±0.1)的蛋白电泳缓冲液，减轻了缓冲液配制的人力，提高了缓冲液制备的效率和准确性。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了两种快速制备蛋白电泳缓冲液的预制试粉。该试粉的主要成分包括Tris碱(三羟甲基氨基甲烷)、甘氨酸、SDS(十二烷基硫酸钠)、以及KH2PO4(磷酸二氢钾)。使用该试粉所制得的电泳缓冲液，能够省略称量与pH值调节步骤，通过与一定体积的去离子水混合互溶，快速制备固定浓度、固定pH值的变性和非变性的蛋白电泳缓冲液。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种快速制备蛋白变性电泳缓冲液的预制试粉，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68-0.72g的KH2PO4。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L，KH2PO45.0-5.3mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间。试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。所述的KH2PO4可以被其他含不同结晶水的KH2PO4所代替，但KH2PO4的质量浓度保持不变。所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉中KH2PO4的质量优选为0.7g。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L，KH2PO45.1mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间。一种快速制备蛋白非变性电泳缓冲液的预制试粉，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、0.80-0.84g的KH2PO4。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、KH2PO45.88-6.17mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间。试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。所述的KH2PO4可以被其他含不同结晶水的KH2PO4所代替，但KH2PO4的质量浓度保持不变。所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉中KH2PO4的质量优选为0.82g。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、KH2PO46mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间。一种快速制备蛋白电泳缓冲液的预制试粉的使用方法如下：在室温下，将每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶，即得到1L1×浓度的电泳缓冲液。此过程无需称量试粉，无需调节缓冲液pH值，通过与一定体积的去离子水混合互溶，快速制备固定浓度、固定pH值的变性或非变性的蛋白电泳缓冲液。一种快速制备蛋白电泳缓冲液的预制试粉的制备方法如下：所述的预制试粉可进行放大或缩小规模的制备，以1L1×浓度缓冲液试粉中各组分质量份数为基准，根据目标缓冲液体积和浓度的乘积，计算得到基准中各组分质量的放大或缩小倍数，称量各组分且均匀混合后，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。举例如下：如配备1L10×浓度电泳缓冲液试粉，则将基准中各组分质量放大至10倍，如配备5L0.5×浓度电泳缓冲液试粉，则将基准中各组分质量放大至2.5倍。所述的预制试粉还可以整体制备，按照所述组分的质量比例，称量且均匀混合各组分，储存于塑料容器或袋中。在配制电泳缓冲液时，根据待配缓冲液的浓度和体积的乘积，先计算所需预制试粉质量，再称量预制试粉，最后与待配缓冲液体积的去离子水充分混合，制得电泳缓冲液。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术的预制试粉的使用方法简便快速，使得缓冲液的制备过程可在5-10分钟内完成，提高蛋白电泳实验的整体效率。(2)本专利技术试粉所制备的缓冲液，具有较长的电泳寿命和较好的蛋白稳定性，在连续电泳10小时以上的电泳槽中，正负极的pH值变化不超过3％，蛋白结构稳定不被降解。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术做进一步说明。实施例1基于配制1L1×浓度的蛋白变性电泳缓冲液，制备预制试粉，每份试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.7g的KH2PO4。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的蛋白变性电泳缓冲液，pH值8.30(Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L、KH2PO45.1mmol/L)，室温电泳8小时后，正极pH值8.21，负极pH值8.40，蛋白样品稳定，考马斯亮蓝染色成像良好。实施例2基于配制1L1×浓度的蛋白变性电泳缓冲液，制备预制试粉，每份试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.72g的KH2PO4。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的蛋白变性电泳缓冲液，pH值8.21(Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L、KH2PO45.3mmol/L)，室温电泳8小时后，正极pH值8.12，负极pH值8.29，蛋白样品稳定，考马斯亮蓝染色成像良好。实施例3基于配制1L1×浓度的蛋白非变性电泳缓冲液，制备预制试粉，每份试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、0.82g的KH2PO4。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的蛋白非变性电泳缓冲液，pH值8.36(Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、KH2PO46.0mmol/L)，室温电泳8小时后，正极pH值8.25，负极pH值8.43，蛋白样品稳定，考马斯亮蓝染色成像良好。实施例4基于配制1L1×浓度的蛋白非变性电泳缓冲液，制备预制试粉，每份试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、0.84g的KH2PO4。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的蛋白非变性电泳缓冲液，pH值8.29(Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、KH2PO46.0mmol/L)，室温电泳8小时后，正极pH值8.18，负极pH值8.37，蛋白样品稳定本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种快速制备蛋白变性电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的预制试粉中各组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68‑0.72g的KH2PO4；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L，KH2PO45.0‑5.3mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间；试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式储存。
【技术特征摘要】
1.一种快速制备蛋白变性电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的预制试粉中各组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68-0.72g的KH2PO4；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L，KH2PO45.0-5.3mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间；试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式储存。2.根据权利要求1所述的一种快速制备蛋白变性电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉中KH2PO4的质量优选为0.7g；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L，KH2PO45.1mmol/L，pH值稳定在8.3±0.1之间。3.一种快速制备蛋白非变性电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的预制试粉中各组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液，每份预制试粉含有3....
【专利技术属性】
技术研发人员：许建强，徐卫平，薛宏宇，关水，孙世博，张楠，张竞争，王晓晓，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21
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