非重组人胰岛素-样生长因子结合蛋白浓缩物制造技术

人胰岛素‑样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液和制备它们的方法包括在水性缓冲介质中的非重组人IGF结合蛋白‑3 (nr‑IGFBP‑3)。所述储备溶液中的nr‑IGFBP‑3的浓度是在约16微克/毫升(µg/ml)至约40µg/ml范围内。包括nr‑IGFBP‑3的校准物集合的试剂盒。所述校准物的集合包括在约0.5µg/ml至约16µg/ml的范围内的不同浓度的nr‑IGFBP‑3，其被构造成包括患者样品的免疫测定中的IGFBP‑3分析物水平的可疑范围。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】非重组人胰岛素-样生长因子结合蛋白浓缩物相关申请的交叉引用本申请要求于2015年12月31日提交的美国临时申请号62/274,116的优先权，其通过引用整体并入本文。关于联邦资助的研究或开发的声明不适用背景胰岛素-样生长因子(IGF)（例如，IGF-1和IGF-2）属于参与细胞生长调节的蛋白激素家族。肝分泌IGF-1，例如，作为生长激素(GH)刺激的结果。IGF的作用通过与胰岛素-样生长激素结合蛋白(IGFBP)的结合来介导。存在六种对IGF-1和IGF-2具有高亲和力的IGF结合蛋白(例如，IGFBP-1至IGFBP-6)，其中IGFBP-3是最占优势的。IGFBP促进IGF的作用的调节，以便实现以下一种或两种：在某些情形下抑制IGF作用，和在其它情形下促进IGF作用。具体地，IGF-1以1:1摩尔比结合IGFBP-3。看起来IGFBP-3的生成与IGF-1一样取决于生长激素GH，而相反，IGFBP-1生成受肽激素胰岛素调节。IGFBP-3将在血流中的IGFBP-3的稳定复合物内的IGF（例如，IGF-1或IGF-2）和酸不稳定的亚基(ALS)蛋白(也是GH依赖性的)运输至身体组织，且IGFBP-3具有循环功能、细胞外功能和细胞内功能。例如，IGFBP-3可以结合来自不同细胞类型的IGF；可以阻断IGF向IGF受体的接近；可以与细胞表面处的蛋白相互作用；和可以结合细胞核中的激素受体。为了表征健康和疾病的目的，监测人体中的IGF水平。例如，在结构上与胰岛素类似的IGF-1在儿童期生长中起重要作用。在儿童期发育中监测IGF的水平有助于表征发育是否是正常的。在其它例子中，IGF在监测糖尿病中和可能在监测老化和癌症中起重要作用。因此，通过血清免疫测定监测人类中的IGF的水平、特别是IGFBP-3水平会为监测儿童和成年人提供重要的诊断工具。将来自人血清的患者样品的免疫测定的关于IGFBP-3水平的结果与一组已知IGFBP-3浓度的校准物或标准品进行对比。例如，在多种浓度制备IGFBP-3校准标准品，所述浓度包括在患者样品中预见到的IGFBP-3分析物的可疑目标浓度范围。使用校准物来校准免疫测定设备，包括、但不限于，IMMULITE®系统和CENTAUR®系统，例如，二者来自SiemensHealthcareDiagnostics,Inc.，使得可以准确地测量人患者中的IGFBP-3分析物水平。尽管IGFBP-3在人血清中是相对丰富的，但是已经发现为了制备用于免疫测定的校准标准品集合而以足够浓度从人血液中分离IGFBP-3是有问题的和困难的。相反，人IGFBP-3的重组形式已经用于制备患者样品的免疫测定所用的校准标准品。不幸的是，人IGFBP-3的商购可得的重组形式是昂贵的，且可能不具有IGFBP-3的纯人形式所具有的结构完整性。因此，在免疫测定校准标准品中使用人IGFBP-3的重组形式的负面影响可能是比仅仅成本问题更显著的。专利技术概述在某些实施方案中，根据本文描述的原理，提供了一种人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液。所述人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液包含在水性缓冲介质中的非重组人IGF结合蛋白-3(nr-IGFBP-3)，其具有在约16微克/毫升(µg/ml)至约40µg/ml范围内的nr-IGFBP-3浓度。在某些实施方案中，根据本文描述的原理，提供了一种试剂盒，其包含人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白的校准标准品集合。所述集合的每种校准标准品包含含有非重组人IGF结合蛋白3(nr-IGFBP-3)的水溶液。所述集合的每种校准标准品中的nr-IGFBP-3的浓度是不同的，且所述集合中的nr-IGFBP-3的不同浓度是在约0.5µg/ml至约16µg/ml的范围内。在某些实施方案中，根据本文描述的原理，提供了一种形成非重组人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白3(nr-IGFBP-3)在水溶液中的浓缩物的方法。所述方法包括：使人血清和来自人血清的IGF结合蛋白之一的水溶液与多孔基质接触，和，在接触所述多孔基质以后，收集水溶液中浓缩的nr-IGFBP-3，其中所述水溶液中收集的nr-IGFBP-3具有在约16µg/ml至约40µg/ml范围内的浓度。附图简述参考以下结合附图的详细描述，可以更容易地理解根据本文描述的原理的实施方案和实施例的不同特征，其中相同的附图标记表示相同的结构元件，且其中：图1A解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中形成非重组人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白3(nr-IGFBP-3)在水溶液中的浓缩物的方法的程序框图。图1B解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中在图1A的方法中使人血清的水溶液与多孔基质接触的过程的程序框图。图2解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中提供来自人血清的IGF结合蛋白的溶液的程序框图。图3解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中制备基本上不含有胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白的人血清稀释剂的方法的程序框图。图4解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中以相对光单位(RLU)表示的相对于IMMULITE®赋值标准品的来自原型CENTAUR®XP测定的硫酸铵沉淀的nr-IGFBP-3剂量响应的图。图5解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中对比来自原型CENTAUR®XP测定的硫酸铵沉淀的nr-IGFBP-3校准标准品的剂量值(完全曲线)和IMMULITE®赋值标准品的图。图6解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中对比来自原型CENTAUR®XP测定的硫酸铵沉淀的nr-IGFBP-3校准标准品的剂量值(2-点计算)和IMMULITE®赋值标准品的图。图7解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中来自酸处理过的、木炭吸附的人血清的血清蛋白(‘OD280’)和nr-IGFBP-3的洗脱特性的条形图。图8解释了根据符合本文描述的原理的一个实施方案，在一个实施例中在原型CENTAUR®XP测量的结果与用酸处理过的、木炭吸附的人血清稀释过的样品的计算结果之间的线性关系的图。某些实施例和实施方案具有其它特征，所述其它特征是以下情况之一或二者：除了上面提及的附图中所述的特征之外，和替代上面提及的附图中所述的特征。在下面参考上面提及的附图详述了这些和其它特征。专利技术详述符合本文描述的原理的实施方案和实施例提供了人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白的储备溶液，其包含人IGF结合蛋白-3的非重组形式(nr-IGFBP-3)在水性介质中的浓缩物。所述储备溶液中的nr-IGFBP-3浓缩物具有足以制备IGFBP-3分析物患者样品的免疫测定的校准标准品集合的浓度。短语‘足以制备校准标准品集合的浓度’是指，所述储备溶液中的nr-IGFBP-3的浓度至少与特定测定的nr-IGFBP-3校准标准品(‘校准物’)的最高浓度一样高。符合本文描述的原理的实施方案和实施例还提供了包含nr-IGFBP-3的不同浓度的校准标准品集合，其被构造成包括在患者样品中预见到的IGFBP-3分析物的可疑目标浓度范围。在某本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人胰岛素‑样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液，其包含：在水性缓冲介质中的非重组人IGF结合蛋白‑3 (nr‑IGFBP‑3)，其具有在约16微克/毫升(µg/ml)至约40µg/ml范围内的nr‑IGFBP‑3浓度。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.31 US 62/274,1151.一种人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液，其包含：在水性缓冲介质中的非重组人IGF结合蛋白-3(nr-IGFBP-3)，其具有在约16微克/毫升(µg/ml)至约40µg/ml范围内的nr-IGFBP-3浓度。2.权利要求1的人IGF结合蛋白储备溶液，其中所述nr-IGFBP-3浓度是在约20µg/ml至约30µg/ml的范围内。3.包含权利要求1的人IGF结合蛋白储备溶液的校准标准品集合，其中所述集合的每种校准标准品具有不同的nr-IGFBP-3浓度，所述集合中的校准标准品的不同nr-IGFBP-3浓度是在约0.5µg/ml至约16µg/ml的范围内。4.权利要求1的人IGF结合蛋白储备溶液，其中所述人IGF结合蛋白储备溶液不包括重组IGF结合蛋白。5.权利要求1的人IGF结合蛋白储备溶液，其中所述nr-IGFBP-3的水性缓冲介质不包括重组IGFBP-3。6.用于IGFBP-3分析物免疫测定的校准物集合，所述集合的每种校准物包含用人血清稀释剂稀释的权利要求1的人IGF结合蛋白储备溶液，其中所述集合的校准物的nr-IGFBP-3浓度是不同的，所述不同的nr-IGFBP-3浓度被构造成包括患者样品中的IGFBP-3分析物水平的可疑范围。7.权利要求6的校准物的集合，其中所述人血清稀释剂是基本上不含有IGF结合蛋白的酸处理过的、木炭吸附的人血清。8.一种试剂盒，其包含人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白的校准物集合，所述集合的每种校准物包含含有非重组人IGF结合蛋白3(nr-IGFBP-3)的水溶液，其中所述集合的每种校准物中的nr-IGFBP-3浓度是不同的，所述集合中的nr-IGFBP-3的不同浓度是在约0.5微克/毫升(µg/ml)至约16µg/ml的范围内。9.权利要求8的试剂盒，其中所述校准物集合中的nr-IGFBP-3的不同浓度范围被构造成包括患者样品中的IGFBP-3分析物和IGF-1分析物中的一种或两种的浓度的可疑范围，所述集合中的校准物是具有在约16µg/ml至约40µg/ml范围内的nr-IGFBP-3浓度的人IGF结合蛋白储备溶液的不同稀释液。10.权利要求8的试剂盒，其中所述集合的每种校准物进一步包含人血清稀释剂，所述人血清稀释剂包含基本上不含有IGF结合蛋白的酸处理过的、木炭吸附的人血清，所述人血清稀释剂的量被构造成将所述nr-IGFBP-3稀释至不同的nr-IGFBP-3浓度范围。11.权利要求8的试剂盒，其中所述校准物的集合不包括重组人IGF结合蛋白。12.一种形成非重组人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白3(nr-IGFBP-3)在水溶液中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：S林，K奥塞夸彭，O库赖施，S辛哈，M史密斯，S迪夫兰西斯科，R斯皮尔斯，D拉瓦尔，D霍瓦内奇伯恩斯，R欧文斯，
申请(专利权)人：西门子医疗保健诊断公司，
类型：发明
国别省市：美国,US